一种元麦萌发期耐盐材料的筛选方法技术

一种元麦萌发期耐盐材料的筛选方法，其包括以下步骤：1)种子萌发及盐处理，盐处理组中加入NaCl浓度为200

【技术实现步骤摘要】
一种元麦萌发期耐盐材料的筛选方法


[0001]本专利技术属于农作物育种领域，具体涉及一种元麦萌发期耐盐材料的筛选方法。

技术介绍

[0002]元麦，即裸大麦，在我国南方地区也称为米麦，上海地区习惯叫元麦，在北方地区一般称为米大麦、仁大麦，而在青藏高原则称为青稞，青稞是藏民的主粮，也是重要的饲料，是粮饲两用的作物。近年来，随着经济的发展，人们在解决了吃得饱的问题后，对于饮食的营养、健康、保健问题越来越关注，而裸大麦在这些方面具有独特的优势。
[0003]上海地区拥有悠久的大麦种植历史，长期以来，经过人工、自然选择，形成了多种类型的大麦品种资源，包括元麦品种资源，这些品种资源对当地生态环境具有独特的、长期的适应性，为上海及周边地区的大麦生产、粮饲供给做出了巨大贡献。因此，保护这些元麦资源，并加以利用，不仅对于青藏高原青稞的品种改良，而且对于上海地区开发适合人们食用的高值元麦农产品，都将具有重要的意义。
[0004]另外，上海地区人多地少，耕地资源极其宝贵，但是其地处沿海，拥有大片的盐渍化滩涂地，据估计，约有90万亩，并且属于以NaCl为主的滨海盐土，因此，筛选或选育适合盐渍化滩涂地的元麦品种，不仅可以满足人们对于相关农产品的需求，也可以拓展耕地面积，同时解决“种子和耕地”的问题。
[0005]众所周知，种子萌发在作物的整个生育期里面处于起始阶段，其在该阶段的耐盐性对于作物的生长发育具有极其重要的地位，研究人员对大麦在种子萌发阶段的耐盐性做了很多研究工作。
[0006]发芽阶段是作物生长的重要阶段，种子能否发芽决定着作物群体的规模，而这个阶段对盐胁迫又是比较敏感的。因此，发芽率是大麦耐盐性评价筛选的一个重要指标。然而，尽管很多研究人员都以该指标来评价耐盐性，但所采用的具体标准却不完全相同，有的认为，有胚根有胚芽，并且胚芽长等于种子长度的1/2为发芽；有人认为，有胚根有胚芽，胚芽长超过种子长度的1/3或者胚根长超过种子长度的1/2为发芽；Lai Y等(Integrative transcriptomic and proteomic analyses of molecular mechanism responding to salt stress during seed germination in hulless barley.Int J Mol Sci.2020,21(1):359)认为胚根露出种子超过3毫米即为发芽；还有的认为胚根鞘突出即为发芽。
[0007]尽管现有技术对发芽的定义不同，但对元麦萌发期耐盐性的筛选时，一般是考虑7天发芽率，时间较长。

技术实现思路

[0008]本专利技术的目的在于提供一种元麦萌发期耐盐材料的筛选方法，针对元麦的发育特点，设置合适的盐浓度范围，统计1
‑
2个光照周期的发芽率，根据盐敏感度判断元麦的耐盐性，区分不同材料的耐盐性差异，提高元麦耐盐材料筛选的准确性。
[0009]为了达到上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
[0010]一种元麦萌发期耐盐材料的筛选方法，包括以下步骤：
[0011]1)种子萌发及盐处理
[0012]挑选饱满无病害、整齐一致的种子烘干，消毒后清洗，将种子分为对照组及盐处理组，对照组中加入清水，盐处理组中加入NaCl浓度为200
‑
400mM的盐处理液，置于培养箱中开始培养，暗培养3天；
[0013]暗培养3天后转移到光照条件下发芽，所述光照条件为：一个光照周期内白天16小时，晚上8小时；光照强度：2000
‑
5000lx，温度：白天20
‑
24℃，晚上为16
‑
20℃；
[0014]2)统计发芽率
[0015]每培养一个光照周期后，查看发芽情况，胚根从元麦种子表面露出来即为发芽，计入发芽种子数，计算发芽率，统计1
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2个光照周期的发芽率，根据发芽率计算相应的盐敏感度；
[0016]发芽率＝(每皿已发芽种子数/每皿种子总数)
×
100％；
[0017]基于发芽率的盐敏感度＝[(对照发芽率
‑
盐处理发芽率)/对照发芽率]×
100％；
[0018]3)盐敏感度判断
[0019]比较每种盐处理浓度下、不同处理时间下基于发芽率的盐敏感度，当盐敏感度≤20％即为高耐盐材料，20％<盐敏感度≤40％为耐盐材料，40％<盐敏感度≤60％为中耐盐材料，60％<盐敏感度≤80％为不耐盐材料，盐敏感度>80％为极不耐盐材料。
[0020]优选地，步骤1)中，设置三个盐处理组，盐处理液分别为：200mM NaCl、300mM NaCl和400mM NaCl。
[0021]优选地，步骤1)中，盐处理浓度为200mM NaCl时，统计一个光照周期的发芽率。
[0022]又，步骤1)中，盐处理浓度为300mM
‑
400mM NaCl时，统计两个光照周期的发芽率。
[0023]优选地，步骤1)中烘干种子时，烘干温度为28
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30℃，连续烘干3
‑
7天。
[0024]本专利技术中，利用NaCl盐溶液对元麦开展萌发期耐盐性筛选和鉴定，明确了元麦发芽的定义，以看到胚根从元麦种子表面露出来即为发芽，计算发芽率，利用暗培养之后的1
‑
2个光照周期的盐敏感度进行耐盐性判断，用时4
‑
5天，与传统的7天发芽率相比，可以提前进行判断，节省了鉴定时间，提高了鉴定效率。
[0025]在本专利技术的盐浓度处理下，1
‑
2个光照周期后，即从暗培养开始处理起算，4
‑
5天后，发芽率变异系数都比较大，可对不同材料进行区分，基于元麦的耐盐性，如果以通常采用的7天发芽率作为评价指标的话，如果盐浓度太低，其发芽率和对照相比没有显著差异，很难对不同元麦材料进行区分，另一方面也说明，在相对较低浓度盐胁筛选时，使用7天发芽率是不恰当的。
[0026]专利技术人在实验中发现，在本专利技术发芽定义下，元麦种子的发芽率变异系数与盐处理浓度及萌发天数密切相关，比如，在200mM NaCl处理下，四天发芽率变异系数非常大，达到了57.66％；在300mM NaCl处理下，四天和五天发芽率变异系数都比较大，四天发芽率变异系数为104.1％、五天发芽变异系数为16.84％；而在400mM NaCl处理下，五天、六天和七天发芽率变异系数都比较大。这说明提前统计发芽率，不仅可以对不同元麦品种耐盐性进行有效区分，而且使得基于发芽率的耐盐性评价试验的盐浓度选择更宽了，并且缩短了筛选时间。综合盐敏感度的判定情况，本专利技术设定200mM NaCl处理的四天发芽率、300mM
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400NaCl处理的五天发芽率用于元麦萌发期耐盐性评价都较适合，而且，从总体上来看，筛
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种元麦萌发期耐盐材料的筛选方法，包括以下步骤：1)种子萌发及盐处理挑选饱满无病害、整齐一致的种子烘干，消毒后清洗，将种子分为对照组及至少两个盐处理组，对照组中加入清水，盐处理组中加入浓度为200
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400mM NaCl的盐处理液，置于培养箱中开始培养，先暗培养3天；暗培养3天后再转移到光照条件下发芽，所述光照条件为：一个光照周期内白天16小时，晚上8小时；光照强度：2000
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5000lx，温度：白天20
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24℃，晚上为16
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20℃；2)统计发芽率每培养一个光照周期后，查看发芽情况，胚根从元麦种子表面露出来即为发芽，计入发芽种子数，计算发芽率，统计1
‑
2个光照周期的发芽率，根据发芽率计算相应的盐敏感度；发芽率＝(每皿已发芽种子数/每皿种子总数)
×
100％；基于发芽率的盐敏感度＝[(对照发芽率
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盐处理发芽率)/对照发芽率]
×
100％；3)盐敏感度判断...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈志伟，刘成洪，陆瑞菊，方春燕，宗营杰，徐红卫，
申请(专利权)人：上海市农业科学院，
类型：发明
国别省市：