一种适用于杜鹃花属物种鉴定的matK引物及方法技术

本发明专利技术涉及分子生物学DNA技术领域，提出了一种适用于杜鹃花属物种鉴定的matK引物，所述引物为一对；正向引物matK

【技术实现步骤摘要】
一种适用于杜鹃花属物种鉴定的matK引物及方法


[0001]本专利技术涉及分子生物学DNA
，具体的，涉及一种适用于杜鹃花属物种鉴定的matK引物及方法。

技术介绍

[0002]杜鹃花属是杜鹃花科中种类最多、特有性极强的大属。杜鹃花属植物具有重要的观赏价值和医药价值，市场前景广阔。由于其种类繁多，仅有极少数专家能够通过形态特征进行准确鉴定。目前，DNA条形码技术已被广泛应用于物种(品种)的鉴定工作中，matK就是常用的DNA条形码之一。但前人利用常用的matK引物对杜鹃花属植物进行扩增时，成功率却很低。
[0003]刘义梅在《杜鹃花属药用植物DNA条形码的鉴定研究》中，对杜鹃花属38个物种68份样品进行物种鉴定，结果显示采用matK序列PCR扩增率过低，“故在后续的数据分析中排除了matK序列的数据”。Yan L J等在《DNA barcoding of Rhododendron(Ericaceae),the largest Chinese plant genus in biodiversity hotspots of the H本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种适用于杜鹃花属物种鉴定的matK引物，其特征在于，所述引物为一对；正向引物matK
‑
390F的核苷酸序列(5
’‑3’
)为CGATCTATTCATTCAATATTTC反向引物matK
‑
Rh_R的核苷酸序列(5
’‑3’
)为GCCCGCTATAATAATGAGAAAGAYTTC。2.一种适用于杜鹃花属物种鉴定的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、提取杜鹃花属植物标本的总DNA；S2、引物PCR扩增得到PCR产物，所述引物为：matK
‑
390F(5
’‑3’
)(CGATCTATTCATTCAATATTTC)matK
‑
Rh_R(5
’‑3’
)(GCCCGCTATAATAATGAGAAAGAYTTC)；S3、检测PCR扩增结果；S4、将所述PCR产物进行测序；S5、将DNA序列进行比对调整；S6、对调整好的序列进行建树并进行聚类分析。3.根据权利要求2所述的一种适用于杜鹃花属物种鉴定的方法，其特征在于，所述步骤S2中，用于测序的PCR扩增总反应体积为25μL，其中包括2
×
Taq MIX 12.5μL，引物各1.25μL，浓度为(30
±
1)ng/μL的DNA模板2.5μL，加灭菌的超纯水至25μL；PCR反应程序为，94℃预变性3min，94℃变性30s、54℃退火40s、72℃延伸40s(以上变性、退火、延伸进行34个循环)，7...

【专利技术属性】
技术研发人员：石硕，沈风娇，白霄霞，李志斌，李琳，赵建成，蒋淑磊，
申请(专利权)人：河北师范大学，
类型：发明
国别省市：