一种多氯联苯降解菌株P52-2及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种多氯联苯降解菌株P52

【技术实现步骤摘要】
一种多氯联苯降解菌株P52
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2及其应用

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[0001]本专利技术属于有机污染物降解领域，具体涉及一种多氯联苯降解菌株P52
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2及其应用。

技术介绍
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[0002]随着现代工业过程的快速发展，工业废水污染日益严重，使得工业废水和底泥中存有各种持久性有机污染物(POPs)。其中，多氯联苯(PCBs)是一类典型的POPs，也是当前国际上受到广泛关注的12重POPs之一。PCBs作为工业原料主要组分在国内外广泛生产，在早期氯代联苯的应用过程中，有大量的氯代联苯泄漏到环境中，造成环境的长期污染。由于这类物质具有潜在的致癌、致畸、致突变性及生物累积性等特性，能够对生态环境和人类健康构成重大危害。因此，早在2001年，PCBs就被列入了斯德哥儿摩公约，并将其确定为禁止使用的“毒性极强的污染物”，同时规定到2025年必须将其从环境中消除。
[0003]环境中有毒有害有机污染物的自然衰减主要依赖相关微生物代谢作用，生物修复技术具有成本低、效果好、无二次污染等优点，因此该方法是目前多氯联苯污染修复最具潜力的修复手段。目前，已报道的多氯联苯降解菌株较少，主要包括厌氧降解细菌Desulfitobacterium、Dehalospirillum multivorans、Desulfomonile tiedjei、Dehalobacter restricus、Desulforomonas chloroethenica和好氧降解菌Burkholderia xenovorans、Alcaligenes sp.和Sphingomonas paucimobilis。然而，大部分降解细菌都属于严格厌氧细菌，需要在严格的厌氧条件下对高氯PCBs(四氯以上的高氯联苯)进行脱氯，降解成低氯联苯。低氯联苯很少进行厌氧脱氯过程，大部分低氯联苯可以直接被好氧降解菌经过联苯降解途径转化为氯代苯甲酸，产生的氯代苯甲酸通过其他好氧菌进一步矿化为二氧化碳和水。由于环境中的大部分微生物都是不可培养的，很多微生物尤其是具有特定功能的微生物都不能通过纯培养的方式分离获得。因此，筛选出能有效降解多氯联苯的菌株具有重要的应用价值和现实意义。

技术实现思路
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[0004]本专利技术的第一个目的是提供一种具有多氯联苯降解能力的Ochrobactrum haematophilum P52
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2。该菌于2021年6月2日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，地址：广东省广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，邮编：510070，保藏编号为：GDMCC No：61708。
[0005]本专利技术的第二个目的是提供Ochrobactrum haematophilum P52
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2在降解多氯联苯中的应用。
[0006]优选是将Ochrobactrum haematophilum P52
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2应用在多氯联苯污染的环境中对多氯联苯进行降解。
[0007]本专利技术的第三个目的是提供一种多氯联苯降解菌剂，其包含Ochrobactrum haematophilum P52
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2作为活性成分。
[0008]优选，所述的多氯联苯是PCB9。
[0009]本专利技术从广东省清远市某电子垃圾回收厂污水底泥中驯化和分离得到1株以高浓度多氯联苯(PCB9)作为碳源的菌株P52
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2，对其进行鉴定，并研究其生长特性和对PCB9的降解特性，为PCBs污染环境的生物修复提供参考。
[0010]Ochrobactrum haematophilum P52
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2于2021年6月2日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，地址：广东省广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，邮编：510070，保藏编号为：GDMCC No：61708。
附图说明：
[0011]图1是在以多氯联苯为碳源的无机盐固体培养基上生长的P52
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2。
[0012]图2是P52
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2和其相关菌的基于16S rRNA基因序列的系统发生关系，构建方法为邻接法，自展值设定重复1000次，图中仅展示了自展值大于50％的结果，比例尺0.005代表每个核苷酸的替换率。
[0013]图3是菌株P52
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2在高浓度PCB9的无机盐培养基中的降解效率(初始浓度10mg
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‑1)。
具体实施方式：
[0014]以下实施例是对本专利技术的进一步说明，而不是对本专利技术的限制。
[0015]实施例1：Ochrobactrum haematophilum P52
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2的分离和鉴定
[0016]1、材料与方法
[0017]1.1样品来源
[0018]从广东清远某电子垃圾回收厂污水底泥中采集污水样品，以高浓度多氯联苯(PCB9)为碳源进行长期驯化，通过多次筛选和分离纯化得到高效的多氯联苯降解菌。
[0019]1.2培养基
[0020]1.2.1无机盐培养基
[0021]无机盐培养基用于样品中微生物的富集培养和纯菌条件下多氯联苯降解实验。该培养基配方见表1(含多氯联苯溶液)，其配制方法是将各成分加入到溶剂水中，混合均匀，灭菌制得。
[0022]表1无机盐培养基配方
[0023][0024][0025]1.2.2营养培养基
[0026]营养培养基用于细菌的分离、纯化、保藏、活化等常规微生物的培养。本实验所用的液体营养培养基种类及成分见表2。若实验需要配制固体培养基，仅需在原有培养基配方的基础上增添1.5
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2％的琼脂粉。若菌株的培养条件无特别说明，培养基pH均调节至7.0。具体配制方法是将各成分加入到溶剂水中，混合均匀，调pH值，灭菌制得。
[0027]表2Luria
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Bertani培养基(LB)成分
[0028][0029]1.3菌株的驯化、筛选和分离
[0030]将采集的污水加入到富集培养基(无机盐培养基)中，分别以浓度为10mg
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‑1的多氯联苯作为降解的底物，放置于30℃培养箱中避光震荡培养。利用以多氯联苯为碳源的无机盐培养基进行菌株驯化，7d为一个驯化周期。取体积比10％的接种量转接到具有相同培养体系的新鲜富集培养基中并重复上述富集过程，如此重复三次。
[0031]将上述获得的第四代富集培养样品以稀释平板法进行涂布分离，样品用营养培养基分离。将涂布好的样品置于原培养温度条件下培养，经过48小时左右，培养基表面形成明显的单菌落，根据菌落的形态大小、颜色、透明度等特征挑取不相同的若干单菌落，并在营养培养基平板上进行划线纯化，培养。若经过划线纯化的平板上仍能观察到不同特征的单菌落，将其再次进行划线分离，直至在同一平板上只能观察到相同特征的单菌落为止。实验中筛选得到1株对多氯联苯有高效降解性能的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.Ochrobactrum haematophilum P52
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2，保藏编号为：GDMCC No：61708。2.权利要求1所述的Ochrobactrum haematophilum P52
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2在降解多氯联苯中的应用。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，将Ochrobactrum haematophilum P52
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【专利技术属性】
技术研发人员：李继兵，罗春玲，王霜，江龙飞，张干，
申请(专利权)人：中国科学院广州地球化学研究所，
类型：发明
国别省市：