一种侵袭性真菌的检测方法及检测试剂盒技术

本发明专利技术公开了一种侵袭性真菌的检测方法及检测试剂盒。所述检测方法为：步骤1，重组表达Dectin

【技术实现步骤摘要】
一种侵袭性真菌的检测方法及检测试剂盒


[0001]本专利技术属于生物医学诊断
，具体涉及一种侵袭性真菌的检测方法及检测试剂盒。

技术介绍

[0002]重症监护病房(ICU)患者由于严重的基础疾病和大型手术、各种导管的体内介入与留置，以及广谱抗菌药物和糖皮质激素的广泛应用等，常常导致免疫屏障受损与功能障碍，使得侵袭性真菌尤其是念珠菌感染的发病率不断上升，美国49所医院连续7年的监测资料表明，念珠菌在医院感染中居第4位，仅次于凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌和肠球菌，病死率则居首位。虽然目前新型、高效的氮唑类和棘白菌素类抗真菌药物不断问世，但是临床患者预后仍然不佳，病死率平均高达40%，是目前严重威胁人类健康的感染性疾病。侵袭性真菌感染起病隐匿、临床表现不典型，加之临床缺乏早期诊断指标，往往造成疾病的误诊误治，尸检研究发现75%的侵袭性真菌感染病例在生前漏诊。不能及时确诊、贻误治疗往往使得真菌感染发展成为脓毒症，导致临床抗真菌感染治疗失败。临床研究表明念珠菌血症患者中有32%发生多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfu本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种侵袭性真菌的检测方法，其特征在于：该方法包括如下步骤，步骤1，重组表达Dectin
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1分子胞外段蛋白，并对表达的Dectin
‑
1蛋白进行标记；步骤2，标记的Dectin
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1蛋白与样品中的β
‑
(1，3)
‑
D
‑
葡聚糖进行特异性结合反应；步骤3，通过测定标记的Dectin
‑
1蛋白量获得样品中β
‑
(1，3)
‑
D
‑
葡聚糖的含量，从而实现对侵袭性真菌的检测。2.如权利要求1所述的侵袭性真菌的检测方法，其特征在于：所述重组表达的Dectin
‑
1分子胞外段蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO: 1所示。3.如权利要求1所述的侵袭性真菌的检测方法，其特征在于，重组表达Dectin
‑
1分子胞外段蛋白的方法为：将表达Dectin
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1胞外段蛋白氨基酸序列的碱基融合6
×
His标签并亚克隆至表达载体PCDNA3.4；利用PEI转染Expi293细胞进行重组表达，收集细胞上清液，并利用Ni
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NTA磁珠进行纯化，收集纯化的蛋白即得到Dectin
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1胞外段蛋白。4.如权利要求1所述的侵袭性真菌的检测方法，其特征在于：采用辣根过氧化酶或生物素对Dectin
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1蛋白进行标记。5.如权利要求1所述的侵袭性真菌的检测方法，其特征在于：采用ELISA法或磁珠法测定样品中β
‑
(1，3)
‑
D
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葡聚糖的含量。6.如权利要求4所述的侵袭性真菌的检测方法，其特征在于：采用ELISA法测定样品中β
‑
(1，3)
‑
D
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葡聚糖含量的方法包括如下步骤，步骤1，将待测样品、阴性对照品加入到包被有Dectin
‑
1胞外段重组...

【专利技术属性】
技术研发人员：慎慧，安毛毛，陈思敏，郭诗雨，邹最，田复波，
申请(专利权)人：上海市第十人民医院，
类型：发明
国别省市：