嵌合RSV和hMPVF蛋白、免疫原性组合物和使用方法技术

本公开涉及编码嵌合RSV和hMPV F蛋白的嵌合呼吸道合胞病毒以及该嵌合病毒或其中的组分在疫苗中的用途。在某些实施例中，本公开涉及用嵌合RSV和hMPV F蛋白替代RSV的F蛋白的包含RSV主链的减毒活疫苗。含RSV主链的减毒活疫苗。含RSV主链的减毒活疫苗。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】嵌合RSV和hMPV F蛋白、免疫原性组合物和使用方法
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2019年2月11日提交的美国临时申请第62/804,005号的权益，其全部内容通过引用并入本文。

技术介绍

[0003]人类偏肺病毒(hMPV)是一种呼吸道病毒病原体，其引起一系列范围从无症状感染到严重细支气管炎的疾病。hMPV是包括呼吸道合胞病毒(RSV)在内的肺泡病毒科(Pneumoviridae)的负链单链RNA病毒。hMPV是季节性的，大致遵循与流感类似的季节性分布。到5岁时，几乎所有儿童都将暴露于hMPV，并且通常发生再感染。尽管在大多数情况下，感染症状是轻微的，但在年轻的、免疫受损的或年老的患者中，如果感染与继发病症诸如哮喘混合，则感染可能导致住院治疗或甚至死亡。目前还没有批准的疫苗或抗病毒剂来解决hMPV。因此，需要鉴定用于预防和治疗hMPV感染的方法。
[0004]疫苗可以是活病毒株的杀死(灭活)或弱化(减毒)形式。Zhang等人报道了通过抑制病毒mRNA帽甲基转移酶的人偏肺病毒减毒活疫苗候选物。《病毒学杂志(J Virol)》，2014，88(19)：11411
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29。Olmedillas等人报道了作为免疫原诱导交叉中和抗体应答的嵌合肺泡病毒科融合蛋白。《EMBO分子医学(EMBO Mol Med.)》2017，e201708078。
[0005]Liang等人报道了由副流感病毒载体表达的RSV融合蛋白。《病毒学杂志》2016，90(21)：10022
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10038。Stobart等人报道了具有工程热稳定性的活RSV疫苗，其在棉鼠中是免疫原性的。《自然通信(Nature Communications)》，7，文章编号：13916(2016)。也参见WO 2017/075125和WO 2014/152534。
[0006]本文引用的参考文献不是对现有技术的认可。

技术实现思路

[0007]本公开涉及以下发现：向hMPV F蛋白添加RSV F蛋白的跨膜结构域和/或胞质尾可以成功地用于嵌合RSV
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hMPV病毒中以产生疫苗。不希望受理论的束缚，据信RSV F蛋白的胞质尾促进病毒组装，导致病毒产生增加。因此，本公开涉及编码嵌合RSV和hMPV F蛋白的嵌合呼吸道合胞病毒，以及所述嵌合病毒或其中的组分在疫苗中的用途。在某些实施例中，本公开涉及用嵌合RSV和hMPV F蛋白替代RSV的F蛋白的包含RSV主链的减毒活疫苗。
[0008]在某些方面，本公开涉及包含hMPV F蛋白胞外域和RSV F蛋白胞质尾的嵌合RSV和hMPV F蛋白。在某些实施例中，嵌合RSV和hMPV F蛋白还包括RSV F蛋白跨膜结构域，其中嵌合RSV和hMPV F蛋白在N至C末端方向包含hMPV F蛋白胞外域、RSV F蛋白跨膜结构域和RSV F蛋白胞质尾。
[0009]在某些实施例中，本公开涉及包含活嵌合病毒的免疫原性组合物，所述活嵌合病毒具有编码嵌合RSV和hMPV F蛋白的核酸。在某些实施例中，活嵌合病毒包含编码SEQ ID NO：1或其变体的核酸，例如，其与SEQ ID NO：1具有至少约85％序列同一性的变体。在某些实施例中，编码SEQ ID NO：1的核酸包含SEQ ID NO：2或其变体，例如，其与SEQ ID NO：2具
有至少约85％序列同一性的变体。在某些实施例中，活嵌合病毒不含编码呼吸道合胞病毒SH蛋白的基因。
[0010]在某些实施例中，本公开涵盖融合蛋白和嵌合颗粒，其包含具有SEQ ID NO：1或其变体或具有大于50、60、70、80、90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％序列同一性的变体的嵌合hMPV和RSV F蛋白。在某些实施例中，变体包含一、二、三、四、五、六、七、八、九、十或更多个氨基酸取代或保守氨基酸取代。
[0011]在某些实施例中，嵌合hMPV和RSV F蛋白具有SEQ ID NO：6的N末端hMPV序列，
[0012][0013]其中X1是I或V，X2是A或T，X3是E或D，X4是R或Q，X5是R或S，X6是L或F，X7是V或I，X8是T或N，X9是N或G，X
10
是E或D，X
11
是R或S，X
12
是A或D，X
13
是V或Y，X
14
是V或I，X
15
是K或E，X
16
是K或R，X
17
是Q或K，X
18
是K或R，X
19
是N或S，X
20
是S或N，X
21
是V或I，X
22
是K或R，X
23
是N或S，并且/或者X
24
是S或N，诸如在F[人类偏肺病毒]登录号中提供的那些：
[0014][0015][0016][0017][0018]在某些实施例中，X1至X
24
各自单独且独立地是任何氨基酸或其中鉴定的那些的保守取代。
[0019]在某些实施例中，嵌合hMPV和RSV F蛋白具有SEQ ID NO：7的C末端RSV序列，
[0020]X2MITTIIIVIIVILLX1LIAVGLLLYCKARSTPX3TLSKDQLSGINNIAFSN，
[0021]其中X1是S或L，X2是I或V，X3是V或I，诸如在具有登录号AUC68149.1、AHW81430.1、AIZ95893.1、AHW81440.1和AJZ70067.1的A型呼吸道合胞病毒中提供的那些。在某些实施例中，X1至X3各自单独且独立地是任何氨基酸或其中鉴定的那些的保守取代。
[0022]在某些实施例中，本公开涵盖编码具有SEQ ID NO：1或其具有大于50％、60％、70％、80％、90％、95％、98％或99％序列同一性的变体的嵌合hMPV和RSV F蛋白的核酸或载体。在某些实施例中，核酸包含SEQ ID NO：2或其变体。在某些实施例中，变体是含有同义密码子或密码子去优化的那些。
[0023]在某些实施例中，嵌合RSV
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hMPV具有编码RSV NS1和NS2或嵌合hMPV和RSV F蛋白的基因，它们任选地被密码子去优化，使得与野生型A2病毒相比，该蛋白在Vero细胞中的表达率减少超过一半。
[0024]在某些实施例中，与野生型A2病毒株相比，NS1在Vero细胞中的表达率减少超过三分之一(1/3)、四分之一(1/4)、五分之一(1/5)或十分之一(1/10)。
[0025]在某些实施例中，与野生型A2病毒株相比，NS2在Vero细胞中的表达率减少超过三分之一(1/3)、四分之一(1/4)、五分之一(1/5)或十分之一(1/10)。
[0026]在某些实施例中，使编码SH蛋白的基因缺失或改变，使得表达截短的蛋白或不表达蛋白。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种包含hMPV F蛋白胞外域和RSV F蛋白胞质尾的嵌合RSV和hMPV F蛋白。2.根据权利要求1所述的嵌合RSV和hMPV F蛋白，其进一步包含RSV F蛋白跨膜结构域，其中所述嵌合RSV和hMPV F蛋白在N至C末端方向包含所述hMPV F蛋白胞外域、所述RSV F蛋白跨膜结构域和所述RSV F蛋白胞质尾。3.根据权利要求1所述的嵌合RSV和hMPV F蛋白，其中所述嵌合RSV和hMPV F蛋白包含SEQ ID NO：1或其与SEQ ID NO：1具有至少约85％序列同一性的变体。4.一种包含活嵌合病毒的免疫原性组合物，所述活嵌合病毒包含编码根据权利要求1至3中任一项所述的嵌合RSV和hMPV F蛋白的核酸。5.根据权利要求4所述的免疫原性组合物，其中所述核酸包含SEQ ID NO：2或其与SEQ ID NO：2具有至少约85％序列同一性的变体。6.根据权利要求4或权利要求5所述的免疫原性组合物，其中所述活嵌合病毒不含编码呼吸道合胞病毒SH蛋白的基因。7.根据权利要求4至6中任一项所述的免疫原性组合物，其进一步包含佐剂和/或其...

【专利技术属性】
技术研发人员：马丁，
申请(专利权)人：亚特兰大儿童医疗保健公司，
类型：发明
国别省市：