活菌DNA快速筛选仪制造技术

本实用新型专利技术公开了活菌DNA快速筛选仪，该筛选仪包括PMA顶盖、LED蓝光灯光源和由带有凹槽结构的上箱体和内置有电机的下箱体固定连接为一体的长方体箱式结构，还包括置于上箱体内的数显式计时器、数显式旋转调节器和旋转混匀器，旋转混匀器平行固定于上箱体凹槽内侧且可沿其中轴旋转，其上均匀分布有若干样品放置孔，LED蓝光灯光源为多个且均匀分布于上箱体内，PMA顶盖为不透明材质且橡胶封边的L形平板结构，一边固定于上箱体7凹槽开口一侧，一边可沿上箱体凹槽开口另一侧自由开合。本实用新型专利技术将暗处理和光交联合二为一，实现PMA前处理过程的一体化和全自动化，可用于水产品中副溶血性弧菌和霍乱弧菌的活菌定量检测。性弧菌和霍乱弧菌的活菌定量检测。性弧菌和霍乱弧菌的活菌定量检测。

【技术实现步骤摘要】
活菌DNA快速筛选仪


[0001]本技术涉及一种微生物分析器材，具体涉及活菌DNA快速筛选仪。

技术介绍

[0002]弧菌(Vibrio)是水产品中最为常见的致病菌，副溶血性弧菌(Vibrioparahaemolyticus)是我国主要水产源致病菌，由该菌引起的食物中毒事件居细菌性食物中毒事件的首位，同时也被视为世界范围内导致腹泻类疾病的最为主要因素之一。霍乱弧菌(Vibrio cholerae)是导致人体产生霍乱疾病的主要源头，流行广泛且属于烈性传染病之一，曾多次引起大面积的疾病，主要表现为剧烈的呕吐、腹泻、失水，严重的可导致死亡，如何快速、精准和高效地检测水产品中致病弧菌具有重要意义。
[0003]传统定量检测食品中副溶血性弧菌和霍乱弧菌的方法通常需要1周时间，基于DNA的 qPCR定量技术虽简便快捷，但无法区分样品中死菌和活菌，容易导致假阳性现象。光敏型核酸染料叠氮溴化丙锭(PMA)与qPCR技术相结合，可以选择性地识别水产品中的活菌DNA，可用于进行活菌定量检测。但是，PMA前处理包括暗处理和光交联两个关键步骤，传统的 PMA前处理方法通常在一个密闭的环境进行暗处理，手持600W左右的钠钨灯进行光交联，过程繁琐，全程人工操作费时耗力；基于蓝光LED管的光交联仪器(产自PMA公司)虽可大大简化PMA前处理过程，但其将暗处理和光交联的两个步骤分开处理，仍需繁琐的人工转移操作。

技术实现思路

[0004]本技术的目的是提供一种活菌DNA快速筛选仪，可将暗处理和光交联两个核心结构合二为一，实现PMA前处理过程一体化和全自动化，可以快速、精准和高效地检测水产品中致病弧菌。
[0005]为实现上述目的，本技术采用如下技术方案：
[0006]本技术提供的活菌DNA快速筛选仪，包括PMA顶盖、LED蓝光灯光源和由带有凹槽结构的上箱体和内置有电机的下箱体固定连接为一体的长方体箱式结构；
[0007]还包括置于所述上箱体内的数显式计时器、数显式旋转调节器和旋转混匀器，所述旋转混匀器平行固定于所述上箱体的凹槽内侧且可沿其中轴旋转，其上均匀分布有若干样品放置孔；
[0008]所述LED蓝光灯光源为多个且均匀分布于所述上箱体内；
[0009]所述PMA顶盖为不透明材质且橡胶封边的L形平板结构，位于所述旋转混匀器的上方，其一边固定于所述上箱体凹槽开口一侧，另一边可沿所述上箱体凹槽开口另一侧自由开合，当其闭合时与所述上箱体凹槽开口完全密封。
[0010]优选地，所述PMA顶盖外侧设有防水绝缘门把手。
[0011]优选地，所述LED蓝光灯光源的数量为24个，功率为1
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3w，电压参数为3.0
‑
3.7V，电流为350
‑
1000mA，色温波长为410
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420nm蓝中偏紫/深蓝光，且与PMA的激发波长一致。
[0012]优选地，所述旋转混匀器为304不锈钢材质。
[0013]优选地，所述活菌DNA快速筛选仪的尺寸为25cm
×
20cm
×
20cm。
[0014]优选地，所述数显式计时器和数显式旋转调节器的控制面板均位于所述上箱体上表面。
[0015]所述活菌DNA快速筛选仪对待检测样品进行活菌DNA检测的方法，包括以下步骤：
[0016](1)待检测样品中添加PMA并置于旋转混匀器的样品放置孔内，启动所述活菌DNA 快速筛选仪，设定暗处理时间、光交联时间和混匀速度参数，开启LED蓝光灯光源并关闭 PMA顶盖，形成同时进行暗处理和光交联反应环境；
[0017](2)根据上述设定参数同时进行暗处理和光交联反应：在避光黑暗条件下PMA选择性地进入检测样品中细胞膜损伤的死菌细胞内，在激发光源激活下PMA的叠氮基团分解为氮稀类化合物与双链DNA的碳氢化合物发生光交联反应，得到共价交联沉淀物，抑制死菌 DNA扩增。
[0018]上述活菌DNA快速筛选仪可用于定量检测水产品中弧菌，如副溶血性弧菌ATCC 33847 或霍乱弧菌GIM1.449。
[0019]与现有技术相比，本技术的有益效果是：
[0020]1.本技术将暗处理和光交联两个核心步骤设计合二为一，实现PMA前处理过程的一体化和全自动化，从根本上简化PMA
‑
qPCR的前处理过程，提升PMA的处理效率。
[0021]2.本技术可根据自身需求设定暗处理时间、光交联时间和混匀速度，PMA前处理条件灵活，采用的LED蓝光灯光源能够在长时间工作下保持较低的热能输出且不会破坏样本DNA，避免传统卤素灯(600
‑
1000W)照射时释放大量热量灼伤样品中活菌DNA引起假阴性的缺陷，同时保证PMA与死菌DNA充分交联，安全可靠。
[0022]3.本技术的检测方法对细胞膜完整的死菌没影响，且可完全消除死菌DNA假阳性结果，用于检测水产品中致病弧菌(如副溶血性弧菌ATCC33847与霍乱弧菌GIM1.449)快速、精准和高效。
[0023]4.本技术的活菌DNA快速筛选仪为一体箱式结构，小巧便携。
[0024]以下将结合附图对本技术的构思、具体结构及产生的技术效果作进一步说明，以充分地了解本技术的目的、特征和效果。
附图说明
[0025]附图作为本申请的一部分，用来提供对本技术的进一步的理解，本技术的示意性实施例及其说明用于解释本技术，但不构成对本技术的不当限定。显然，下面描述中的附图仅仅是一些实施例，对于本领域普通技术人员来说，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他附图。在附图中：
[0026]图1为本技术一实施例中活菌DNA快速筛选仪的结构示意图；
[0027]附图标记如下：1
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PMA顶盖、2
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激发光源、3
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数显式计时器、4
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数显式旋转调节器、 5
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旋转混匀器、6
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电机、7
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上箱体、8
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下箱体。
具体实施方式
[0028]下面通过具体实例和附图，对本技术的技术方案做进一步的菌体说明。应当
理解，以下描述的具体实例仅用于解释文本技术，并不用于限定本技术。所描述的实施例仅仅是本技术一部分实施例，而不是全部的实施例，基于本技术中的实施例，本领域的普通技术人员咋没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本技术保护的范围。
[0029]参见图1，示例性地描述了一种活菌DNA快速筛选仪，包括PMA顶盖1、LED蓝光灯光源2和由带有凹槽结构的上箱体7和内置有电机6的下箱体8固定连接为一体的长方体箱式结构；
[0030]还包括置于上箱体7内的数显式计时器3、数显式旋转调节器4和旋转混匀器5本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.活菌DNA快速筛选仪，其特征在于，包括PMA顶盖、LED蓝光灯光源和由带有凹槽结构的上箱体和内置有电机的下箱体固定连接为一体的长方体箱式结构；还包括置于所述上箱体内的数显式计时器、数显式旋转调节器和旋转混匀器，所述旋转混匀器平行固定于所述上箱体的凹槽内侧且可沿其中轴旋转，其上均匀分布有若干样品放置孔；所述LED蓝光灯光源为多个且均匀分布于所述上箱体内；所述PMA顶盖为不透明材质且橡胶封边的L形平板结构，位于所述旋转混匀器的上方，其一边固定于所述上箱体凹槽开口一侧，另一边可沿所述上箱体凹槽开口另一侧自由开合，当其闭合时与所述上箱体凹槽开口完全密封。2.根据权利要求1所述的活菌DNA快速筛选仪，其特征在于，所述PMA顶盖外侧设有防水绝缘门把手。3.根据权利要求1所述的活菌DNA快速筛选仪，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：张昭寰，黄振华，赵勇，童金蓉，吴倩，
申请(专利权)人：上海海洋大学，
类型：新型
国别省市：