化合物eutyscoparolH和L及其制备方法和在制备抗菌药物中的应用技术

本发明专利技术公开了化合物eutyscoparol H和L及其制备方法和在制备抗菌药物中的应用。本发明专利技术所述的化合物eutyscoparol H和eutyscoparol I(式I)是从内生真菌Eutypella scoparia SCBG

【技术实现步骤摘要】
化合物eutyscoparol H和L及其制备方法和在制备抗菌药物中的应用


[0001]本专利技术属于医药生物
，具体涉及化合物eutyscoparol H和L及其制备方法 和在制备抗菌药物中的应用。

技术介绍

[0002]Eutypella属真菌分布广泛，次级代谢产物丰富多样。主要代谢产物包括萜类、细胞松 弛素类、甾体类、内酯类，其中萜类主要以海松烷型二萜,倍半萜为主。并且，这些次级代 谢产物显示了抗肿瘤、抗菌、抗炎以及抗增殖等多种生物活性。Sesquiterpenes类化合物是 真菌中的一类代谢产物，结构特点为分子中含有15个碳原子组成的三个异戊二烯单元，具 有链状、环状等多种骨架结构。该类型分子已被报道具有多种生物活性。

技术实现思路
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[0003]本专利技术的第一个目的是提供具有抗菌活性的化合物eutyscoparol H和eutyscoparol I。
[0004]本专利技术的化合物eutyscoparol H和eutyscoparol I，其结构如式(I)中所示：
[0005][0006]本专利技术的第二个目的是提供一种化合物eutyscoparol H和eutyscoparol I的制备方法，该 制备方法中所述的化合物eutyscoparol H和eutyscoparol I从植物内生真菌Eutypella scoparia SCBG
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8的发酵培养物中分离制备得到的，具体包括以下步骤：
[0007](1)制备内生真菌Eutypella scoparia SCBG
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8的固体发酵培养物，用乙酸乙酯萃取该 固体发酵培养物，将乙酸乙酯萃取液经浓缩后得浸膏；
[0008]浸膏经过硅胶柱层析，用石油醚
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乙酸乙酯以体积比为100:1，50:1，20:1，10:1，5:1， 2:1，1:1，0:1作为洗脱剂，梯度洗脱；收集正己烷
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乙酸乙酯体积比2:1洗脱获得的且经TLC 薄层层析以正己烷：丙酮＝5:1v/v展开得Rf＝0.5
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0.6的组分Fr.4；
[0009]将组分Fr.4经反相柱色谱，用甲醇
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水体积比70:30,75:25,80:20,85:15,90:10,95:5,100:0, 丙酮梯度洗脱，得到14个亚组分Fr.4.1
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Fr.4.14，收集甲醇
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水体积比80:20洗脱获得的且经 TLC薄层层析以正己烷：丙酮＝5:1v/v展开得Rf＝0.2
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0.6的组分Fr.4.6；
用半制备HPLC 分离纯化组分Fr.4.6，得到化合物eutyscoparol H和化合物eutyscoparol I。
[0010]所述的半制备HPLC分离纯化是使用YMC
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ODS
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A/AQ柱，流动相为体积比70:30的乙 腈/水，流速为3mL/min，收集保留时间为10min的洗脱组分，得到化合物eutyscoparol H， 收集保留时间为11.5min的洗脱组分，得到化合物eutyscoparol I。
[0011]所述的制备内生真菌Eutypella scoparia SCBG
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8的固体发酵培养物具体步骤为：挑取内 生真菌SCBG
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8的菌丝体接种于马铃薯葡萄糖液体培养基中，在28℃、120r/min条件下培 养5天，制得种子液，然后将种子液按0.1mL/g的接种量接种于大米培养基中，28℃条件 下培养30天，制得内生真菌SCBG
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8的固体发酵培养物，所述的马铃薯葡萄糖液体培养基， 每升是通过以下方法配制的：用500mL的纯水煮200g的马铃薯，煮沸20min，过滤得马 铃薯汁，再加入葡萄糖20g、KH2PO
4 3g、MgSO
4 1.5g、维生素B
1 10mg，用水补足至1000 mL，灭菌制得；所述的大米培养基是通过以下方法配制的：按每300g大米与360mL水混 合灭菌制得。
[0012]本专利技术通过实验发现，化合物eutyscoparol H和化合物eutyscoparol I对金黄色葡萄球菌、 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的IC
50
值为6.25μg/mL。阳性对照物万古霉素对以上两种革兰氏 阳性菌的IC
50
值为1.25μg/mL。此结果表明：本专利技术的化合物eutyscoparol H和化合物 eutyscoparol I具有比较显著的抗菌活性。
[0013]因此，本专利技术的第三个目的是提供化合物eutyscoparol H或化合物eutyscoparol I，或其 药用盐在制备抗菌药物中的应用。所述的抗菌药物优选为抗金黄色葡萄球菌，抗耐甲氧西 林金黄色葡萄球菌药物。
[0014]本专利技术的第四个目的是提供一种抗菌药物，该抗菌药物包含化合物eutyscoparol H或化 合物eutyscoparol I，或其药用盐作为活性成分。优选，所述的抗菌药物为抗金黄色葡萄球 菌，抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌药物。
[0015]本专利技术的第五个目的是提供内生真菌Eutypella scoparia SCBG
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8在制备化合物 eutyscoparol H或化合物eutyscoparol I中的应用。
[0016]与现有技术相比，本专利技术的优势在于：
[0017]本专利技术从内生真菌Eutypella scoparia SCBG
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8中分离制备得到化合物eutyscoparol H和 化合物eutyscoparol I，该类化合物eutyscoparol H和化合物eutyscoparol I具有比较显著的抗 菌活性，可以用于制备抗菌药物，为研究与开发新的抗菌药物提供了候选化合物，为开发 利用植物内生菌来源的天然活性物质提供了科学依据。
[0018]本专利技术的海洋真菌Eutypella scoparia SCBG
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8已公开于Wenge Zhang,Miaomiao Wang, Sha Zha,Kangping Xu,Guishan Tan,Shengxiang Qiu,Zhenxing Zou,Haibo Tan.EutyscoparolsA
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G,polyketide derivatives from endophytic fungus Eutypella scoparia SCBG
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8.Fitoterapia, 2020,146,104681.该菌株本申请人也持有，并保证自申请日起20年内向公众提供。
附图说明
[0019]图1是化合物eutyscoparol H的1H NMR谱；
[0020]图2是化合物eutyscoparol H的
13
C NMR谱；
[0021]图3是化合物eu本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.如式(I)所示的任一化合物：2.一种权利要求1所述的化合物eutyscoparol H和eutyscoparol I的制备方法，其特征在于，所述的化合物eutyscoparol H和eutyscoparol I是从内生真菌Eutypella scoparia SCBG
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8的发酵培养物中分离得到的。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：(1)制备内生真菌Eutypella scoparia SCBG
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8的固体发酵培养物，用乙酸乙酯萃取该固体发酵培养物，将乙酸乙酯萃取液经浓缩后得浸膏；(2)浸膏经过硅胶柱层析，用石油醚
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乙酸乙酯以体积比为100:1，50:1，20:1，10:1，5:1，2:1，1:1，0:1作为洗脱剂，梯度洗脱；收集正己烷
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乙酸乙酯体积比2:1洗脱获得的且经TLC薄层层析以正己烷：丙酮＝5:1v/v展开得Rf＝0.5
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0.6的组分Fr.4；将组分Fr.4经反相柱色谱，用甲醇
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水体积比70:30,75:25,80:20梯度洗脱，收集甲醇
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水体积比80:20洗脱获得的且经TLC薄层层析以正己烷：丙酮＝5:1v/v展开得Rf＝0.2
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0.6的组分Fr.4.6；用半制备HPLC分离纯化组分Fr.4.6，得到化合物eutyscoparol H和化合物eutyscoparol I。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述的半制备HPLC分离纯化是使用YMC
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ODS
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A/AQ柱，流动相为体积比70:30的乙腈/水，流速为3mL/min，收集保留时间为10min的洗脱组分，得到化合物eutyscopar...

【专利技术属性】
技术研发人员：谭海波，张文歌，周忠玉，陈妍，陆秀响，周婷婷，郑安全，
申请(专利权)人：中国科学院华南植物园，
类型：发明
国别省市：