重组III型人源化胶原蛋白的用途制造技术

本发明专利技术属于生物医药领域，涉及重组III型人源化胶原蛋白的用途。具体而言，本发明专利技术提供了该种重组III型人源化胶原蛋白在制备用于预防和/或治疗子宫相关疾病(尤其是慢性子宫内膜炎)的药物中的用途。本发明专利技术在实验中证明重组III型人源化胶原蛋白可以增大慢性子宫内膜炎患病大鼠的子宫内膜厚度并使其腺体数量增多、参与维持细胞外基质的动态稳定、降低炎症免疫因子的表达、减少内膜组织中CD138的表达、改善子宫内膜容受性从而促进胚胎种植。改善子宫内膜容受性从而促进胚胎种植。改善子宫内膜容受性从而促进胚胎种植。

【技术实现步骤摘要】
重组III型人源化胶原蛋白的用途


[0001]本专利技术属于生物医药领域，涉及重组III型人源化胶原蛋白的用途。

技术介绍

[0002]慢性子宫内膜炎(chronic endometritis,CE)是各种原因引起的子宫内膜结构发生持续性的炎性改变，常与慢性子宫颈炎、慢性输卵管炎同时存在。虽然慢性子宫内膜炎可能是无症状的，但在高达40％的不孕不育患者中会发现它的存在，并且该疾病是导致反复植入失败和反复流产的原因之一，近年研究表明，在反复移植失败的患者中CE患病率高达57.11％。虽然CE的治疗方法有很多，但因人群纳入选择和愈后标准不同导致结果差异较大。目前临床上常用口服抗生素治疗，但并没有给出统一的操作指南。
[0003]胶原蛋白，作为细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的主要成分之一，是动物体内含量最丰富的蛋白质，约占总蛋白质的30％，在细胞粘附等生理过程中发挥着重要作用。胶原蛋白对蛋白质分子具有较大的亲和力、较弱的抗原性、良好的生物相容性和生物降解安全性，可以通过自交联形成具有极高强度和稳定性的纤维，作为一种具有特殊生物相容性和理化特性的蛋白，已被广泛的应用于医药领域：包括心肌梗死、关节疾病等的治疗，以及作为外科手术用缝合线、止血剂、细胞培养基、人工血管和人工瓣膜等的材料等。
[0004]直至目前，各种研究使用的胶原蛋白绝大多数来自于动物组织、皮肤提取物。从动物体提取胶原蛋白水溶性差，可加工性很弱，直接限制了许多潜在用途的开发。因此，开发一种安全、有效并具有良好生物功能的胶原蛋白类材料在组织工程、医药美容等领域受到越来越广泛的关注。异种和异体胶原在人体中的应用具有高感染率、高排异性的风险,并且提取方法存在着成本高、污染重、来源受限制、提取量有限的致命缺点。因此利用基因工程技术生产胶原蛋白，可有效克服以上缺点。申请号为201811438582.6、专利技术名称为“多肽、其生产方法和用途”的专利申请(CN 109593126 A)记载了本专利技术的专利技术人在之前研究并生产的重组III型人源化胶原蛋白，但并未直接披露其在医药领域中的具体用途。

技术实现思路

[0005]专利技术要解决的问题
[0006]本专利技术拟应用CN 109593126 A中的重组III型人源化胶原蛋白作为原材料，评价其用于子宫内膜修复的有效性。具体而言，本专利技术拟提供利用CN 109593126 A中的重组III型人源化胶原蛋白来预防和/或治疗子宫相关疾病(特别是慢性子宫内膜炎)，用以改善子宫内膜的炎症状态，进一步提高CE患者的妊娠率。
[0007]用于解决问题的方案
[0008]本专利技术提供重组III型人源化胶原蛋白在制备用于预防和/或治疗子宫相关疾病的药物中的用途，所述重组Ⅲ型人源化胶原蛋白包含以SEQ ID No.1所示的序列的n个重复，n为大于等于1的整数，其中当n为大于等于2的整数时，各重复序列之间是直接连接的。
[0009]优选地，所述n为1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、14、16、20、24或32，其中当n为大于等
于2的整数时，各重复序列之间是直接连接的。
[0010]更优选地，所述n为16，各重复序列之间是直接连接的。
[0011]进一步地，在上述用途中，所述子宫相关疾病为子宫炎。
[0012]优选地，在上述用途中，所述子宫炎为子宫内膜炎。
[0013]更优选地，在上述用途中，所述子宫内膜炎为慢性子宫内膜炎。
[0014]进一步地，在上述用途中，所述慢性子宫内膜炎无症状或具有下列症状中的至少一种：子宫内膜变薄、子宫细胞外基质变化、炎症免疫因子表达上升和子宫内膜容受性降低。
[0015]进一步地，在上述用途中，所述子宫细胞外基质变化为金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP
‑
1)的增加和/或基质金属蛋白酶(MMPs)的降低。
[0016]进一步地，在上述用途中，炎症免疫因子选自IL
‑
1b、IL
‑
6中的至少一种。
[0017]专利技术的效果
[0018]本专利技术研究结果表明，重组III型人源化胶原蛋白可以减少内膜组织中CD138的表达，促进子宫内膜增厚和腺体的生成，抑制相关炎症免疫因子的表达，增加子宫内膜容受性并维护细胞外基质稳态，从而为治疗慢性子宫内膜炎的药物制备奠定基础，可以用于治疗慢性子宫内膜炎。
附图说明
[0019]图1为四组大鼠模型不同时期子宫切片分析结果。
[0020]图2为四组大鼠模型不同时期细胞外基质相关基因表达水平检测结果。
[0021]图3为四组大鼠模型不同时期炎症免疫相关因子基因表达水平检测结果。
[0022]图4为四组大鼠模型不同时期子宫内膜容受性分析结果。
[0023]图5为四组大鼠模型不同时期CD138表达水平检测结果。
具体实施方式
[0024]以下将结合具体的实施例来进一步阐述本专利技术的技术方案。
[0025]本专利技术所述重组III型人源化胶原蛋白为申请号为201811438582.6、专利技术名称为“多肽、其生产方法和用途”的专利申请记载。
[0026]在一项实施方案中，本专利技术的重组Ⅲ型人源化胶原蛋白包含以SEQ ID No.1所示的序列(由30个氨基酸组成，从N段到C段依次为GERGAPGFRGPAGPNGIPGEKGPAGERGAP)的n个重复，n为大于等于1的整数；其中，当n为大于等于2的整数时，各重复序列之间是直接连接的。
[0027]在一项优选的实施方案中，本专利技术的重组Ⅲ型人源化胶原蛋白包含以SEQ ID No.1所示的序列的n个重复，n为1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、14、16、20、24或32；其中，当n为大于等于2的整数时，各重复序列之间是直接连接的。
[0028]在一项更优选的实施方案中，本专利技术的重组Ⅲ型人源化胶原蛋白包含以SEQ ID No.1所示的序列的16个重复，各重复序列之间是直接连接的。
[0029]除非另有说明，本专利技术中使用的仪器、试剂、材料、实验动物等均可通过常规商业手段获得。
[0030]实施例1：重组III型人源化胶原蛋白促进CE大鼠子宫内膜形态学恢复
[0031]80只6
‑
8周Sprague Dawley大鼠(220
‑
260g)购买并饲养于重庆医科大学动物中心。饲养1周后，将大鼠随机分为正常对照组(n＝20，40个子宫)、假手术组(n＝20，40个子宫)、模型组(n＝20，40个子宫)、治疗组(n＝20，40个子宫)。
[0032]正常对照组(NC)大鼠不予以任何处理。假手术组(SHAM)仅大鼠麻醉、腹部消毒后，开腹，将子宫暴露在空气中30min后缝合腹部，24h麻醉后行相同的操作。模型组(MODEL)大鼠麻醉、腹部消毒后，开腹，自宫角处向两侧宫腔内各注射150μl LPS溶液(5mg/ml)后缝合腹部，24h本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.重组III型人源化胶原蛋白在制备用于预防和/或治疗子宫相关疾病的药物中的用途，所述重组Ⅲ型人源化胶原蛋白包含以SEQ ID No.1所示的序列的n个重复，n为大于等于1的整数，其中当n为大于等于2的整数时，各重复序列之间是直接连接的。2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述n为1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、14、16、20、24或32，其中当n为大于等于2的整数时，各重复序列之间是直接连接的。3.根据权利要求1或2所述的用途，其特征在于，所述n为16，各重复序列之间是直接连接的。4.根据权利要求1至3中任一项所述的用途，其特征在于，所述子宫相关疾病为子宫炎。5.根据权利要求4所述的用途，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨霞，兰小宾，何振瑞，王建，王玲玲，张玢玢，闫欣，胡丽娜，游爽，
申请(专利权)人：重庆医科大学附属第二医院，
类型：发明
国别省市：