利用藜麦制备皂苷的方法及藜麦皂苷的分离鉴定法技术

本发明专利技术涉及一种利用藜麦制备皂苷的方法、制得的藜麦皂苷提取物和分离鉴定藜麦皂苷提取物的方法，制备方法具体包括以下步骤：1)取藜麦粉和脱脂剂搅拌得到混合液，离心后取下层沉淀物进行干燥；2)取干燥后的样品加入提取剂中，依次进行水浴、超声和离心，将得到的上清液浓缩得到浓缩液；3)往浓缩液中加入水和纯化剂，依次进行涡旋和离心后取上层溶液，之后重复操作；4)收集步骤3)中得到的上层溶液并蒸干，之后冻干，得到藜麦皂苷提取物。与现有技术相比，本发明专利技术制得的藜麦皂苷提取物纯度高，并改善了藜麦皂苷组成复杂且不易出峰的情况。改善了藜麦皂苷组成复杂且不易出峰的情况。改善了藜麦皂苷组成复杂且不易出峰的情况。

【技术实现步骤摘要】
利用藜麦制备皂苷的方法及藜麦皂苷的分离鉴定法


[0001]本专利技术涉及功能食品领域，具体涉及一种利用藜麦制备皂苷的方法、藜麦皂苷提取物和藜麦皂苷的分离鉴定法。

技术介绍

[0002]藜麦是一种唯一能满足人体基本营养需求的单体植物，被认为是最适宜人类的全谷物食品。藜麦中皂苷含量丰富，皂苷是苷元为三萜或螺旋甾烷类化合物的一类糖苷，具有多种生物活性，如抗氧化、抗炎症和抗菌等，在人们健康和应用领域起到重要作用。然而，藜麦及其相关制品的皂苷含量检测没有明确的标准。目前，普遍使用的高氯酸
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香草醛法能够检出含有与皂苷类似官能团的酚类物质，但存在检测范围广、检测结果不准确等问题。因此，有必要基于藜麦皂苷的特点，建立一套标准的高效液相色谱测定法，才能对藜麦皂苷进行定性定量分析。
[0003]专利CN106176847A公开了一种具有增强抑菌作用的藜麦皂苷及其制备方法与应用。该制备方法，包括以下步骤：对藜麦麸皮粉碎70％甲醇提取、过滤浓缩提取液、乙酸乙酯和正丁醇除杂、碱溶液改性、脱盐、大孔树脂纯化，最后冷冻干燥得藜麦皂苷。进一步地，具体包括以下步骤：1)提取：将藜麦麸皮粉碎，过60目筛，加入8
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12倍量70％的甲醇，在45
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65℃水浴中搅拌提取，得提取液；2)浓缩：将提取液离心过滤，再将滤液旋蒸浓缩到一定体积，得浓缩液；3)除杂：向浓缩液中加入2倍量体积的乙酸乙酯，震荡分层，去掉乙酸乙酯层，再加入2倍量体积的正丁醇，震荡分层，取正丁醇层，于50℃水浴挥干，得藜麦粗皂苷；4)改性：用蒸馏水配制5
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10g/L的藜麦粗皂苷溶液，加入0.1
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0.2倍量体积1mol/L的NaOH溶液，于90
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95℃下搅拌反应2
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4小时，冷却至室温，加入0.1mol/L的盐酸调节pH至7，得中和液；5)脱盐：将步骤4)得到的中和液置于透析袋中，透析脱盐，浓缩；6)纯化：将步骤5)脱盐后的浓缩液过AB
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8大孔树脂柱，进行分离纯化，收集目的洗脱液，冷冻干燥得藜麦皂苷。该专利中采取碱水解的方式，不容易将皂苷水解成皂苷元，且水解时间更长，同时考虑到藜麦是作为食物被人食用进入到胃肠中，而人体胃部的消化液呈酸性，即碱水解条件和实际情况不太符合，而酸解条件更符合实际，另外透析袋存在的问题为分子量大小不是特别合适，透析脱盐效果不好，成本高，而大孔树脂纯化需要大量的样品且操作繁琐，过柱纯化收集不方便。而本专利技术只需要调节pH后冻干甲醇纯化，方便快捷，且皂苷元损失少。
[0004]专利CN109223809A公开了一种藜麦皂苷组合物及其在抗耐药菌方面的应用，并公开了藜麦皂苷化合物的制备方法，具体包括以下步骤：(1)提取：将藜麦麸皮粉碎，过40目筛，加入8
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10倍重量的75％的乙醇，室温超声震荡40min，静置两个小时得提取液；(2)浓缩：将提取液过滤，再将滤液旋蒸去除大部分乙醇，得到浓缩液；(3)除杂：向浓缩液中加入2倍体积的石油醚，震荡分层，去掉石油醚层，再加入2倍体积的乙酸乙酯，震荡分层，去掉乙酸乙酯层；(4)萃取：加入2倍体积的正丁醇层，萃取2
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3遍，静置分层，取正丁醇层，于60℃旋蒸浓缩，得藜麦皂苷粗提物浓缩液；(5)烘干：将上述得到的浓缩液置于60℃水浴中烘干，得到粗提皂苷；(6)粗分：使用大型大孔吸附树脂柱进行大量的分离，使用乙醇和水的混合液对
其进行梯度洗脱，得到大量的粗分的皂苷；(7)精分：使用C18反相液相色谱柱进行精确分离，得到所需的藜麦皂苷。该专利在液相色谱法这一步骤中直接分离的是皂苷，且文中提及到的藜麦皂苷1
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6均无标品，无法明确其方法的准确性。
[0005]CN109810163A一种利用藜麦种皮制备皂苷元及其分离定性的方法，包括如下步骤：(1)将藜麦种皮、复合酶和去离子水按质量比1～3：0.02～0.04：25～35混合，48～52℃，pH值5.2～5.8条件下酶解15～20min，灭酶，得到酶解液；所述复合酶包括纤维素酶和果胶酶，所述纤维素酶和果胶酶的质量比为(2～4)：2；(2)将所述酶解液与乙醇混合，调节混合后的乙醇的体积分数为68～72％，利用超声波提取酶解液中的藜麦皂苷，固液分离，得到藜麦皂苷提取液；(3)将所述藜麦皂苷提取液与盐酸混合，调节混合后的酸浓度为0.8～1mol/L，85～95℃酸解1～3h，得到酸解液；(4)用石油醚对所述酸解液进行萃取，得到萃取液；去除萃取液中的溶剂，得到皂苷元。该专利虽然采用了酸水解的方法得到皂苷元，但它的目的只是得到皂苷元，而且皂苷元仅为齐墩果酸和常春藤皂苷元两种，这说明制备方法有不足，无法提取出其他的皂苷元，另外提取过程比较复杂，用了多种酶，针对的是种皮中的皂苷，而本专利技术提取方法和该专利有差异，且针对的是提取藜麦籽粒中的皂苷，可得到3种皂苷元，并通过3种皂苷元定量测得皂苷含量，整个过程比该专利更简洁。

技术实现思路

[0006]本专利技术的第一个目的就是提供一种利用藜麦制备皂苷的方法。
[0007]本专利技术的目的通过以下技术方案实现：
[0008]一种利用藜麦制备皂苷的方法，所述方法具体包括以下步骤：
[0009]1)取藜麦粉和脱脂剂搅拌得到混合液，离心后取下层沉淀物进行干燥，此步骤是为了进行脱脂；
[0010]2)取干燥后的样品加入提取剂中，依次进行水浴、超声和离心，将得到的上清液浓缩得到浓缩液，此步骤是为了进行提取，可节约后续纯化所需的醇类的量，否则每100g藜麦粉一次性要消耗4L正丁醇；
[0011]3)往浓缩液中加入水和纯化剂，依次进行涡旋和离心后取上层溶液，之后重复操作，此步骤是为了进行纯化，因为浓缩液中有很多醇溶性物质，导致皂苷含量特别低；
[0012]4)收集步骤3)中得到的上层溶液并蒸干，之后冻干，得到藜麦皂苷提取物，冻干有利于后续进行酸解，使皂苷提取物有更好的酸解效果。
[0013]步骤1)中，所述藜麦粉由藜麦在研磨机中研磨得到。
[0014]步骤1)中，所述藜麦选自白藜麦、黑藜麦、红藜麦以及其他颜色的藜麦。
[0015]步骤1)中，所述脱脂剂采用正己烷或石油醚。其中，正己烷可重复利用，且价格低廉，便于大批量制备皂苷。
[0016]步骤1)中，所述藜麦粉和脱脂剂的料液比为1:2.5～4.0(w/v)。
[0017]步骤1)中，搅拌的时间为1～2h。
[0018]步骤1)中，离心的速率为4000～5000rpm，离心的时间为10～15min。
[0019]步骤1)中，在通风橱中通风干燥24～30h，脂质会进入正己烷等脱脂剂中，但是因为离心后依旧会有少量正己烷存在，而正己烷存在一定的毒性，因此通常正己烷脱脂离心后，所得到的脱脂粉末需要通风橱中干燥。
[0020]步骤2)中，所述提取剂采用甲醇。甲醇的提取效果最优。
[0021]步骤2)中，所述藜麦粉和提取剂本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利用藜麦制备皂苷的方法，其特征在于，所述方法具体包括以下步骤：1)取藜麦粉和脱脂剂搅拌得到混合液，离心后取下层沉淀物进行干燥；2)取干燥后的样品加入提取剂中，依次进行水浴、超声和离心，将得到的上清液浓缩得到浓缩液；3)往浓缩液中加入水和纯化剂，依次进行涡旋和离心后取上层溶液，之后重复操作；4)收集步骤3)中得到的上层溶液并蒸干，之后冻干，得到藜麦皂苷提取物。2.根据权利要求1所述的利用藜麦制备皂苷的方法，其特征在于，步骤1)中，所述脱脂剂采用正己烷或石油醚；步骤1)中，所述藜麦粉和脱脂剂的料液比为1:2.5～4.0(w/v)；步骤1)中，离心的速率为4000～5000rpm，离心的时间为10～15min；步骤1)中，在通风橱中通风干燥24～30h。3.根据权利要求1所述的利用藜麦制备皂苷的方法，其特征在于，步骤2)中，所述提取剂采用甲醇；步骤2)中，所述藜麦粉和提取剂的料液比为1:10～15(w/v)；步骤2)中，水浴的温度为40～50℃，水浴的时间为1～2h；步骤2)中，超声的频率为30～40kHz，超声的时间为1～2h；步骤2)中，离心的速率为4000～5000rpm，离心的时间为10～15min；步骤2)中，上清液采用旋转蒸发仪进行浓缩，旋转蒸发仪设置的温度为40～50℃，转速为80～110rpm。4.根据权利要求1所述的利用藜麦制备皂苷的方法，其特征在于，步骤3)中，所述纯化剂采用正丁醇；步骤3)中，水和纯化剂的体积比为1:2～3(v/v)；步骤3)中，涡旋的转速为2500～3000rpm，涡旋的时间为1～2min；步骤3)中，离心的速率为4000～5000rpm，离心的时间为10～15min。5.根据权利要求1所述的利用藜麦制备皂苷的方法，其特征在于，步骤4)中，采用旋转蒸发仪进行蒸干，旋转蒸发仪设置的温度为55～65℃，转速为80～110rpm；步骤4)中，冻干过...

【专利技术属性】
技术研发人员：管骁，张妤，陈俊达，李森，黄凯，曹洪伟，
申请(专利权)人：上海理工大学，
类型：发明
国别省市：