一种磁珠@SM、制备方法及应用技术

本发明专利技术属于材料技术领域，特别涉及一种磁珠@SM、制备方法及应用，包括如下步骤：S1：FeCl3·

【技术实现步骤摘要】
一种磁珠@SM、制备方法及应用


[0001]本专利技术涉及生物技术
，特别涉及一种磁珠@SM、制备方法及应用。

技术介绍

[0002]随着近年来分子生物学技术的高速发展，核酸扩增，核酸杂交将成为进行物种鉴定，物种起源、多样性评估及其亲缘关系、系统计划等常用研究手段之一，这样的分子检测和分子诊断技术在人体健康体检、视频法医等领域中具有至关重要的作用，而在所有的现代分子生物学检测技术首先面临的问题就是如何从样品中快速有效的分离提取所需的基因组核酸，但传统技术，在核酸纯化质量，操作复杂程度上，都有较大的缺陷。
[0003]目前磁珠用来提取核酸研究属于热点研究，磁珠制造工艺程序复杂，同时核酸提取量分布不均一。

技术实现思路

[0004]针对现有技术的不足，本专利技术旨在提供一种磁珠@SM，通过修饰DMSA后，直接偶联链霉素用来核酸提取，工艺简单，更重要的是提取量均一，减少实验误差。
[0005]为了实现上述目的，本专利技术具体采用如下技术方案：
[0006]一种磁珠@SM的合成方法，包括如下步骤：
[0007]S1：将FeCl3
·
6H2O和FeCl2
·
4H2O按照质量比为2～4:1溶于超纯水中，通氮气或惰性气体并加入氨水，反应30min得到Fe3O4颗粒；
[0008]S2：超纯水洗涤Fe3O4颗粒，后用超纯水悬浮纳米Fe3O4颗粒并超声；
[0009]S3：继步骤S2，加入油酸，氮气或惰性气体保护下于60℃
>‑
80℃反应12h
‑
14h得到氧化铁粒子悬浮液；
[0010]S4：将步骤S3所得氧化铁粒子悬浮液磁性分离得到磁性粒子，用乙醇洗涤磁性粒子，干燥；
[0011]S5：将干燥后的磁性粒子DMSO中，加入DMSA，搅拌过夜得到Fe3O4@DMSA；
[0012]S6：将步骤S5所得Fe3O4@DMSA加入O
‑
苯并三氮唑
‑
四甲基脲六氟磷酸盐和N,N
‑
二异丙基乙胺中，同时加入链霉亲和素，氮气鼓泡混匀12h，即得磁珠@SM。
[0013]优选的，所述步骤S1中FeCl3
·
6H2O和FeCl2
·
4H2O的质量比为3:1。
[0014]优选的，所述步骤S1中的氨水与超纯水的体积比为1～2：10。
[0015]优选的，所述步骤S6中Fe3O4@DMSA和O
‑
苯并三氮唑
‑
N,N,N
’
,N
’‑
四甲基脲六氟磷酸盐的质量比为1:70～80，所述链霉亲和素与Fe3O4@DMSA的质量比为1:9～12。
[0016]前述任一项所述的合成方法所得到的磁珠@SM。
[0017]前述所述的磁珠@SM在核酸提取中的应用。
[0018]有益效果
[0019]本专利技术提供了一种快速、简洁的磁性纳米粒子标记的生物分子的方法；
[0020]本专利技术得到的链霉亲和素磁珠通过链霉亲和素和生物素之间的高亲和力作用，可
以绑定任何生物素标记的分子，如抗体、蛋白质、多肽、DNA等。粒子具有较大的比表面积和很高的捕获效率。PuriMag G
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streptavidin
‑
biotinbiomolecule复合物通过磁分离易于从溶液中分离，链霉亲和素磁珠可用于各种下游分离过程：蛋白纯化、细胞分离、免疫及分子检测；
[0021]本专利技术方法可以有效改善磁珠的水溶性，增强材料的生物相容性和降低毒副作用，更重要的该方法成本降低，引入COOH基基团和巯基基团，为后续多元化修饰提供便利。
附图说明
[0022]图1本专利技术实施例1所得产品1μm电镜图。
[0023]图2本专利技术实施例1所得产品200nm电镜图。
具体实施方式
[0024]下面将结合本专利技术的具体实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。以下对至少一个示例性实施例的描述实际上仅仅是说明性的，决不作为对本专利技术及其应用或使用的任何限制。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0025]需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本申请的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。
[0026]下面结合实施例对本专利技术进行详细说明，以方便本领域技术人员理解本专利技术。
[0027]下述实施例所用材料来源如下：
[0028]FeCl3
·
6H2O、FeCl2
·
4H2O和DMSA购自西格玛
[0029]氨水、乙醇、O
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苯并三氮唑
‑
N,N,N
’
,N
’‑
四甲基脲六氟磷酸盐和N,N
‑
二异丙基乙胺购自国药
[0030]链霉亲和素购自安捷伦
[0031]实施例1
[0032]S1：将15g的FeCl3·
6H2O和5g的FeCl2·
4H2O充分溶解在100mL超纯水中于三颈烧瓶中，通氮气并加入15mL氨水，反应30min得到Fe3O4颗粒；
[0033]S2：超纯水洗涤Fe3O4颗粒，除去未反应的氨水，然后用100mL超纯水悬浮洗涤后的纳米Fe3O4颗粒并超声5分钟；
[0034]S3：继续加入2ml油酸，氮气保护下于70℃反应12小时得到氧化铁粒子悬浮液；
[0035]S4：反应结束后，将氧化铁粒子悬浮液转入锥形瓶中，用磁铁将粒子与液相分离，弃液相，得到磁性粒子，用无水乙醇洗涤磁性粒子后，氮气风吹至干。
[0036]S5：将干燥后的磁性粒子加入20mLDMSO中，加入50mg DMSA，机械搅拌过夜得到Fe3O4@DMSA；
[0037]S6：将50mg Fe3O4@DMSA加入0.1mol O
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苯并三氮唑
‑
N,N,N
’
,N
’‑
四甲基脲六氟磷酸盐和0.1mol N,N
‑
二异丙基乙胺溶液中，同时加入5mg链霉亲和素，氮气鼓泡混匀12
‑
14h，即
得磁珠@SM。
[0038]该实施例所得磁珠@SM形貌如图1和图2所示，可以看出本实施例所得到的磁珠@SM粒径大多在300nm～500nm，磁珠大小均匀，因此在提取核酸过程中，提取量均一，重复性高。
[0039]实施例3
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种磁珠@SM的合成方法，其特征在于，包括如下步骤：S1：将FeCl3·
6H2O和FeCl2·
4H2O按照质量比为2～4:1溶于超纯水中，通氮气或惰性气体并加入氨水，反应得到Fe3O4颗粒；S2：超纯水洗涤Fe3O4颗粒，后用超纯水悬浮纳米Fe3O4颗粒并超声；S3：继步骤S2，加入油酸，氮气或惰性气体保护下于60℃
‑
80℃反应12h
‑
14h得到氧化铁粒子悬浮液；S4：将步骤S3所得氧化铁粒子悬浮液磁性分离得到磁性粒子，用乙醇洗涤磁性粒子，干燥；S5：将干燥后的磁性粒子DMSO中，加入DMSA，搅拌过夜得到Fe3O4@DMSA；S6：将步骤S5所得Fe3O4@DMSA加入O
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苯并三氮唑
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四甲基脲六氟磷酸盐和N,N
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【专利技术属性】
技术研发人员：史东生，张俊，谢俊，薛明杰，
申请(专利权)人：徐州捷创生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：