WHsAg单克隆抗体作为ELISA检测试剂的应用制造技术

技术编号:30532809 阅读:36 留言:0更新日期:2021-10-30 12:41
本发明专利技术涉及抗WHsAg单克隆抗体作为ELISA检测试剂的应用,具体制备出适合WHsAg ELISA检测的抗WHsAg单克隆抗体,包括酶标抗体T9G10D4和包被抗体T1C3C9,并确定两者在WHsAg ELISA应用时的最佳使用浓度。对比改进前的检测方法,即使用抗WHsAg多克隆抗体,并采用生物素

【技术实现步骤摘要】
WHsAg单克隆抗体作为ELISA检测试剂的应用


[0001]本专利技术属于生物
,具体涉及两种能运用于WHsAg ELISA检测的 单克隆抗体及其包被抗体和酶标抗体的最佳浓度。

技术介绍

[0002]目前慢性乙型肝炎的治疗尚有许多问题有待解决,其相关研究离不开合 适的动物模型。土拨鼠肝炎病毒(woodchuck hepatitis virus,WHV)在病毒形态、 基因组结构、复制周期等方面与乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)类似, WHV可以自然感染旱獭,且感染后的自然经过与HBV感染类似,因此旱獭是 研究HBV较为理想的动物模型。
[0003]嗜肝DNA病毒表面抗原(HBsAg、WHsAg)是嗜肝DNA病毒的外壳蛋白, 是嗜肝DNA病毒现症感染的标志。目前检测HBsAg已经商品化,包括用于人、 大鼠、小鼠、猪、豚鼠等ELISA试剂盒,但尚无商品化的WHsAg ELISA试剂 盒,其检测方法及所需试剂只能自己摸索和制备,本专利技术专利对于WHsAgELISA试剂盒的制备具有重要应用价值。
专利技本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.WHsAg单克隆抗体作为ELISA检测试剂的应用。2.根据权利要求1所述的应用,其中,保藏号为CCTCC NO:C2019319的WHsAg单克隆抗体T9G10D4作为WHsAg ELISA酶标抗体的应用。3.根据权利要求2所述的应用,其中,WHsAg单克隆抗体T9G10D4作为WHsAg ELISA酶标抗体的应用方法为,多克隆抗体

抗WHsAb,稀释,包被ELISA板子;取出已包被ELISA板子;封闭;加入单克隆抗体T9G10D4,T9G10D4用稀释缓冲液稀释,稀释倍数分别为1/80000

1/5000;加入辣根过氧化物酶标记的多克隆兔抗鼠免疫球蛋白;加入过氧化氢和四甲基联苯胺显色;加入终止液,酶标仪以OD450nm读数。4.根据权利要求3所述的应用,其中,T9G10D4用碳酸盐包被缓冲液稀释,稀释倍数分别为1/5000、1/10000、1/20000、1/40000、1/80000中任一。5.根据权利要求4所述的应用,其中,T9G10D4用稀释缓冲液稀释倍数为1:20000。6.根据权利要求3所述的应用,其中,多克隆抗体

抗WH...

【专利技术属性】
技术研发人员:王宝菊王冬初杨东亮李蒙蒙李金杨雪晟冯雪梅李潇冉邓辉
申请(专利权)人:华中科技大学同济医学院附属协和医院
类型:发明
国别省市:

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