CLRN3基因作为肿瘤治疗靶点的应用制造技术

本发明专利技术涉及生物医学领域，具体而言，涉及一种CLRN3基因作为肿瘤治疗靶点的应用。具体的，涉及特异性抑制CLRN3基因转录或翻译，或能够特异性抑制CLRN3蛋白的表达或活性的分子在制备防治肿瘤的药物中的用途；其中所述肿瘤选自肠癌、肺癌和胃癌。肺癌和胃癌。肺癌和胃癌。

【技术实现步骤摘要】
CLRN3基因作为肿瘤治疗靶点的应用


[0001]本专利技术涉及生物医学领域，具体而言，涉及一种CLRN3基因作为肿瘤治疗靶点的应用。

技术介绍

[0002]CLRN3(Clarin 3)是一种蛋白质编码基因。此前有研究发现与CLRN3相关的疾病包括Usher综合征和胃小管腺癌。该基因的一个重要旁系同源物是CLRN2，但现有技术中对CLRN3的研究仍十分匮乏，对其功能以及和其他疾病的关系了解并不多，且CLRN3基因与肿瘤之间的关系尚未见报道。
[0003]RNA干扰(RNA interference，RNAi)是指一种分子生物学上由双链RNA诱发的基因沉默现象，其机制是通过阻碍特定基因的转录或翻译来抑制基因表达。当细胞中导入与内源性mRNA编码区同源的双链RNA时，该mRNA发生降解而导致基因表达沉默。RNA干扰是近年来新兴的一种常用的研究基因功能、寻找疾病治疗方法的实验室技术。
[0004]因此本领域仍需要进一步明确CLRN3蛋白与疾病的关系，并在此基础上寻找能够影响CLRN3蛋白表达的药物，从而达到治疗疾病的目的。
[0005]有鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0006]本专利技术的专利技术人通过大量实验和反复研究，意外地首次发现下调CLRN3基因表达可以抑制肿瘤细胞增殖和/或侵染，从而达到治疗肿瘤的目的；并在此基础上进一步发现了可以高效抑制CLRN3基因表达的siRNA、shRNA等相关药物，由此完成了本专利技术。
[0007]本专利技术的第一目的在于提供一种特异性抑制CLRN3基因转录或翻译，或能够特异性抑制CLRN3蛋白的表达或活性的分子在制备防治肿瘤的药物中的用途；
[0008]其中所述肿瘤选自肠癌、肺癌和胃癌。
[0009]可选的，如上所述的用途，所述分子选自核酸分子、抗体药和干扰慢病毒。
[0010]可选的，如上所述的用途，所述核酸分子选自：反义寡核苷酸、dsRNA、micro RNA、siRNA和shRNA。
[0011]可选的，如上所述的用途，所述siRNA包含第一链和第二链，所述第一链和第二链互补共同形成RNA二聚体，并且所述第一链的序列包含选自1)～3)所示的序列中的一种：
[0012]1)SEQ ID NO：1～3至少一种所示的序列；
[0013]2)与1)中的序列在高等严紧条件下杂交的序列；
[0014]3)与1)或2)所述序列互补的序列。
[0015]可选的，如上所述的用途，所述shRNA包含正义链片段和反义链片段，以及连接所述正义链片段和反义链片段的茎环结构，所述正义链片段和反义链片段的序列互补，并且所述正义链片段的序列包含1)～3)所示的序列中的一种：
[0016]1)SEQ ID NO：1～3至少一种所示的序列；
[0017]2)与1)中的序列在高等严紧条件下杂交的序列；
[0018]3)与1)或2)所述序列互补的序列。
[0019]本专利技术的第二目的在于提供一种核酸构建体在制备防治肿瘤的药物中的用途；
[0020]其中所述肿瘤选自肠癌、肺癌和胃癌；
[0021]所述核酸构建体包含如上所定义的siRNA、或如上所定义的shRNA。
[0022]可选的，如上所述的用途，所述核酸构建体为慢病毒载体。
[0023]本专利技术的第三目的在于提供一种药物组合物在制备防治肿瘤的药物中的用途；
[0024]其中所述肿瘤选自肠癌、肺癌和胃癌；
[0025]所述药物组合物含有如上所定义的siRNA、如上所定义的shRNA、如上所定义的核酸构建体中的至少一种，以及药学上药学上可接受的载体或赋形剂。
[0026]本专利技术的第四目的在于提供一种分离的CLRN3基因或CLRN3蛋白在筛选防治肿瘤的药物中的用途；
[0027]其中所述肿瘤选自肠癌、肺癌和胃癌。
[0028]可选的，如上所述的用途，所述CLRN3基因为全长基因的部分片段，至少包含1)～3)所示的序列中的一种：
[0029]1)SEQ ID NO：1～3至少一种所示的序列；
[0030]2)与1)中的序列在高等严紧条件下杂交的序列；
[0031]3)与1)或2)所述序列互补的序列。
[0032]本专利技术的有益效果为：
[0033]首次发现下调CLRN3基因表达用于治疗肠癌、肺癌和胃癌，并提供了相应的下调手段。
附图说明
[0034]为了更清楚地说明本专利技术具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本专利技术的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0035]图1为本专利技术一个实施例中所采用的pCMV
‑
GFP
‑
NC空载载体图谱；
[0036]图2为本专利技术一个实施例中三种shRNA对于三种肿瘤细胞中CLRN3mRNA具有抑制作用(A)；qRT
‑
PCR检测人肠癌RKO细胞、肺癌A549细胞，胃癌BGC
‑
823细胞感染shCLRN3
‑
3后细胞中CLRN3的敲减效率(B)；
[0037]图3为本专利技术一个实施例中CCK
‑
8试剂检测CLRN3
‑
siRNA慢病毒对人肠癌RKO细胞(A)、肺癌A549细胞(B)，胃癌BGC
‑
823(C)细胞的增殖能力抑制作用；
[0038]图4为本专利技术一个实施例中侵染慢病毒的肿瘤细胞克隆形成实验结果图(A)以及统计图(B)；
[0039]图5为本专利技术一个实施例中流式凋亡检测的结果图(A)以及统计图(B)。
具体实施方式
[0040]现将详细地提供本专利技术实施方式的参考，其一个或多个实例描述于下文。提供每
一实例作为解释而非限制本专利技术。实际上，对本领域技术人员而言，显而易见的是，可以对本专利技术进行多种修改和变化而不背离本专利技术的范围或精神。例如，作为一个实施方式的部分而说明或描述的特征可以用于另一实施方式中，来产生更进一步的实施方式。
[0041]除非另有说明，用于披露本专利技术的所有术语(包括技术和科学术语)的意义与本专利技术所属领域普通技术人员所通常理解的相同。通过进一步的指导，随后的定义用于更好地理解本专利技术的教导。本文中在本专利技术的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本专利技术。本文所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。
[0042]本专利技术中所使用的术语“含有”、“包含”和“包括”是同义词，其是包容性或开放式的，不排除额外的、未被引述的成员、元素或方法步骤。
[0043]本专利技术中用端点表示的数值范围包括该范围内所包含的所有数值及分数，以及所引述的端点。
[0044]本专利技术本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.特异性抑制CLRN3基因转录或翻译，或能够特异性抑制CLRN3蛋白的表达或活性的分子在制备防治肿瘤的药物中的用途；其中所述肿瘤选自肠癌、肺癌和胃癌。2.根据权利要求1所述的用途，所述分子选自核酸分子、抗体药和干扰慢病毒。3.根据权利要求2所述的用途，所述核酸分子选自：反义寡核苷酸、dsRNA、micro RNA、siRNA和shRNA。4.根据权利要求3所述的用途，所述siRNA包含第一链和第二链，所述第一链和第二链互补共同形成RNA二聚体，并且所述第一链的序列包含选自1)～3)所示的序列中的一种：1)SEQ ID NO：1～3至少一种所示的序列；2)与1)中的序列在高等严紧条件下杂交的序列；3)与1)或2)所述序列互补的序列。5.根据权利要求3所述的用途，所述shRNA包含正义链片段和反义链片段，以及连接所述正义链片段和反义链片段的茎环结构，所述正义链片段和反义链片段的序列互补，并且所述正义链片段的序列包含1)～3)所示的序列中的一种：1)SEQ ID NO：1～3至少一种所示的序列...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈新页，张晓静，张琪，龚天宇，
申请(专利权)人：上海粒成生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：