一种尼日利亚菌素衍生物及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用技术

本发明专利技术公开了一种尼日利亚菌素衍生物及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用，属于天然产物领域。本发明专利技术从海洋链霉菌Streptomyces sp.HNM0561中分离到的式(I)的尼日利亚菌素29位甲基化衍生物29

【技术实现步骤摘要】
一种尼日利亚菌素衍生物及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用

：
[0001]本专利技术属于天然产物领域，具体涉及一种尼日利亚菌素衍生物及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用。

技术介绍
：
[0002]据世界卫生组织国际癌症研究机构(IARC)公布数据显示，2020年全球新发癌症病例1929万例，癌症死亡病例996万例，其中我国新发病例和死亡人数均位居全球第一。2020年全球男性新发癌症1007万例，占总人数的52％，其中前列腺癌(Prostate Cancer，PCa)是一种威胁全球男性健康的重大疾病。2020年最新数据显示，男性新发癌症中前列腺癌患癌人数达141万，仅次于第一位的肺癌(144万)。多年来，研究者致力于寻取新型、高效、低毒的抗肿瘤化合物，天然产物是研发新型抗肿瘤药物等人类重大疾病用药的宝贵资源，特别是海洋来源天然产物，从中筛选发现药物候选物，其活性要远高于许多其它成药来源的化合物，在抗肿瘤药物研发过程中具有举止轻重的地位。我国已上市的海洋类药物治疗领域主要集中于心血管类药物，抗肿瘤用途的海洋类药物亟需开发。因此，本专利技术人从海洋微生物中筛选发现具有良好抗肿瘤活性的天然产物对于抗前列腺癌药物研发具有重要意义。

技术实现思路
：
[0003]本专利技术的第一个目的是提供一种化合物，所述化合物为29
‑
O
‑
methylnigericin，其结构如式(Ⅰ)：
[0004][0005]本专利技术人通过对一株海洋链霉菌HNM0561摇床放大发酵和发酵提取物提取纯化，从中得到化合物1。经结构分析，化合物1被确定为尼日利亚菌素29
‑
O
‑
methylnigericin，为本专利技术人首筛选并分离纯化的天然产物。通过对化合物1的抗肿瘤活性评价，发现化合物1对五种人前列腺癌细胞PC3、22RV1、LNCaP、DU145和VCaP显示出较好的抑制作用，尤其是前列腺癌细胞PC3、22RV1和LNCaP的IC
50
分别达到了1.69，1.91和0.73μM，可以做为抗前列腺癌药物开发的候选先导化合物。
[0006]本专利技术的第二个目的是提供所述化合物29
‑
O
‑
methylnigericin或其药用盐在制备抗肿瘤药物中的应用。优选地，所述肿瘤为前列腺癌。
[0007]本专利技术的第三个目的是提供一种化合物29
‑
O
‑
methylnigericin的制备方法，包括以下步骤：
[0008]1)将海洋链霉菌Streptomyces sp.HNM0561接种到发酵培养基中培养，获得发酵培养物；
[0009]2)分离发酵液和菌丝体，将发酵液用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯萃取液浓缩得发酵液浸膏；
[0010]3)菌丝体经丙酮水溶液浸提，提取液经浓缩后，再用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯萃取液浓缩得菌丝体浸膏；
[0011]4)合并发酵液浸膏和菌丝体浸膏，用反相硅胶分离，采用甲醇：水从10:90,20:80,30:70,50:50,70:30,80:20,90:10,100:0,v/v梯度洗脱顺序得8个组分Fr1
‑
Fr8，收集甲醇：水80：20v/v洗脱的组分Fr6，经Sephadex LH
‑
20柱层析，以甲醇为洗脱剂，洗脱纯化后的产物，经高效液相纯化得到尼日利亚菌素29位甲基化衍生物29
‑
O
‑
methylnigericin。
[0012]在一优选例中，所述的制备海洋链霉菌Streptomyces sp.HNM0561的发酵培养物是将海洋链霉菌Streptomyces sp.HNM0561接种到发酵培养基中培养，所述的发酵培养基每1000mL含有：葡萄糖20g，酵母膏10g，牛肉膏3g，玉米浆3g，可溶性淀粉10g，磷酸氢二钾0.5g，硫酸镁0.5g，碳酸钙2g，余量为水。
[0013]另一优选例中，所述的经高效液相纯化是以210nm和255nm波长做检测、采用4ml/min的流速，以甲醇：水＝75:25,v/v进行等梯度洗脱进行半制备高效液相分离，HPLC柱子为YMC
‑
pack ODS
‑
A,10
×
250mm,5μm，于保留时间t
R 29.1min得到尼日利亚菌素29位甲基化衍生物29
‑
O
‑
methylnigericin。
[0014]本专利技术的第四个目的是提供一种药物，包括有效量的作为活性成分的所述化合物29
‑
O
‑
methylnigericin或其药用盐。
[0015]本专利技术的第五个目的是提供一种海洋链霉菌Streptomyces sp.HNM0561，其保藏编号为CCTCC NO：M 2020255。
[0016]本专利技术的第六个目的是提供海洋链霉菌Streptomyces sp.HNM0561在制备上述化合物29
‑
O
‑
methylnigericin中的应用。
[0017]与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
[0018](1)本专利技术筛选并分离纯化出具有抗肿瘤活性的天然物质尼日利亚菌素29位甲基化衍生物29
‑
O
‑
methylnigericin；
[0019](2)本专利技术29
‑
O
‑
methylnigerici能够明显抑制肿瘤细胞增殖活性和迁移，诱导肿瘤细胞凋亡；且抗肿瘤作用比一些现有药物更强。
[0020]本专利技术的Streptomyces sp.HNM0561于2020年06月30日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，地址：中国.武汉.武汉大学，邮编：430072，保藏编号：CCTCC NO：M2020255。
附图说明：
[0021]图1是29
‑
O
‑
methylnigericin(1)主要的1H
‑1H COSY，和HMBC信息；
[0022]图2是29
‑
O
‑
methylnigericin对PCa细胞克隆形成的影响；
[0023]图3是29
‑
O
‑
methylnigericin对22Rv1细胞凋亡的影响；
[0024]图4是29
‑
O
‑
methylnigericin对PC
‑
3细胞凋亡的影响；
[0025]图5是29
‑
O
‑
methylnigericin对PC
‑
3细胞迁移的影响。
具体实施方式：
[0026]以下实施例是对本专利技术的进一步说明，而不是对本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.如式(I)所示的化合物29
‑
O
‑
methylnigericin或其药用盐2.权利要求1所述的化合物29
‑
O
‑
methylnigericin或其药用盐在制备抗肿瘤药物中的应用。3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述肿瘤为前列腺癌。4.一种权利要求1所述化合物29
‑
O
‑
methylnigericin的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1)将海洋链霉菌Streptomyces sp.HNM0561接种到发酵培养基中培养，获得发酵培养物；2)分离发酵液和菌丝体，将发酵液用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯萃取液浓缩得发酵液浸膏；3)菌丝体经丙酮水溶液浸提，提取液经浓缩后，再用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯萃取液浓缩得菌丝体浸膏；4)合并发酵液浸膏和菌丝体浸膏，用反相硅胶分离，采用甲醇：水从10:90,20:80,30:70,50:50,70:30,80:20,90:10,100:0,v/v梯度洗脱顺序得8个组分Fr1
‑
Fr8，收集甲醇：水80：20v/v洗脱的组分Fr6，经Sephadex LH
‑
20柱层析，以甲醇为洗脱剂，洗脱纯化后的产物，经高效液相纯化得到尼日利亚菌素29位甲基化衍生物29
‑
O
‑
methylnigericin。5.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：王俊锋，王雪妮，刘永宏，
申请(专利权)人：南方海洋科学与工程广东省实验室广州，
类型：发明
国别省市：