一种肝爽颗粒指纹图谱检测方法技术

本发明专利技术属于图谱检测技术领域，涉及一种肝爽颗粒指纹图谱检测方法，1)采用甲醇对肝爽颗粒进行超声提取，得到待检测供试品溶液；2)采用超高效液相色谱法对供试品溶液进行高效液相色谱检测，记录40min内的色谱数据；根据《中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版》，由色谱数据生成肝爽颗粒指纹图谱。本发明专利技术提供的检测方法具有准确度高，稳定性高，重复性好的特点，能够较为全面反映肝爽颗粒的质量，保证产品的质量。量。量。

【技术实现步骤摘要】
一种肝爽颗粒指纹图谱检测方法


[0001]本专利技术属于图谱检测
，涉及一种肝爽颗粒指纹图谱检测方法。

技术介绍

[0002]中药指纹图谱是指某种中药材或中成药中所共有的、具有特征性的某类或数类成分的色谱或光谱的图谱。中药指纹图谱的特点包括整体性、特征性及可量化等方面，突出中药的完整面貌，在研究中药有效成分，控制中药质量以及鉴别方面的作用越来越突出。
[0003]肝爽颗粒(国药准字Z20027671)为保定步长天浩制药有限公司生产的独家中药品种，对急、慢性肝炎，肝硬化，肝功能损害有独特的疗效。肝爽颗粒由柴胡(醋制)、白芍、当归、茯苓、白术(炒)、党参、鳖甲(烫)、蒲公英、虎杖、枳壳、夏枯草、丹参、桃仁13味药材组成，功效疏肝健脾、清热散淤、保护肝脏、软坚散结。用于急慢性肝炎、肝硬化、肝功能损害。方中柴胡疏肝解郁；党参益气健脾，二药配伍疏肝健脾，共为君药。白术健脾燥湿，加强党参健脾之功；当归补血活血；丹参凉血活血；虎杖清热解毒；四药合用，清热散淤，用为臣药。茯苓健脾渗湿以助白术；白芍补血柔肝以加强当归补血之功；桃仁活血祛瘀，以配合丹参活血；鳖甲软坚散结；蒲公英清热解毒；夏枯草清热软坚；枳壳行气宽胸，与柴胡相配则一升一降，调气之功更著，上七位共为佐药。柴胡引诸药入肝胆，兼使药之用。诸药配伍，共奏疏肝健脾，清热散淤，软坚散结之功。
[0004]肝爽颗粒的现有药品标准中，主要通过芍药苷这一种单一成分对肝爽颗粒进行质量控制。但由于肝爽颗粒药味繁多，成分复杂，个别成分分析具有一定的片面性，要控制肝爽颗粒的质量，只针对其一两个化学成分进行表征和控制是不够的，难以全面反映药品的全面信息。

技术实现思路

[0005]针对现有技术存在的技术问题，本专利技术提供一种肝爽颗粒指纹图谱检测方法，具有准确度高，稳定性高，重复性好的特点，能够较为全面反映肝爽颗粒的质量，保证产品的质量。
[0006]为了实现上述目的，本专利技术采用的技术方案是：
[0007]一种肝爽颗粒指纹图谱检测方法包括以下步骤：
[0008]1)采用甲醇对肝爽颗粒进行超声提取，得到待检测供试品溶液；
[0009]2)采用超高效液相色谱法对供试品溶液进行高效液相色谱检测，记录40min内的色谱数据；根据《中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版》，由色谱数据生成肝爽颗粒指纹图谱；
[0010]所述超高效液相色谱法的条件为：色谱柱为Waters Acquity UPLC H
‑
Class柱；检测波长为210～400nm；流动相A为乙腈，流动相B为体积分数0.05％～0.2％的磷酸水溶液；流速为0.3～0.5mL/min；洗脱方式为梯度洗脱，所述梯度洗脱的洗脱程序如下所示：
[0011]时间(min)流动相A(％)流动相B(％)
09645928108713158713188515198020248020286040336040355050402080。
[0012]进一步的，所述步骤1)的具体过程是，精密称取肝爽颗粒粉末0.3g，并置于具塞锥形瓶中，加入50％～90％甲醇水溶液50mL，超声处理30min，放冷，采用50％～90％甲醇水溶液补足减失的质量，定容、摇匀，在1200rpm下离心10min，取上清液，过0.2～0.5μm微孔滤膜，过滤液为供试品溶液。
[0013]进一步的，所述超声功率为400～800W，超声频率为30～50KHZ，时间为20～60min。
[0014]进一步的，所述步骤2)中，色谱柱规格为2.1mm
×
50mm，1.7μm；柱温为30～50℃；进样体积为0.5～2μL。
[0015]进一步的，所述肝爽颗粒指纹图谱检测方法还包括以下步骤；3)配制混合对照品溶液，然后采用与供试品溶液相同的超高效液相色谱条件对混合对照品溶液进行测试，得到混合对照品溶液的色谱图；将混合对照品溶液的色谱图与步骤2)得到的肝爽颗粒指纹图谱进行对比，指认得出肝爽颗粒指纹图谱的色谱峰。
[0016]进一步的，所述混合对照品溶液的配制方法是，分别精密称取以下对照品：阿魏酸、虎杖苷、菊苣酸、柚皮苷、橙皮苷、迷迭香酸、新橙皮苷、丹酚酸B、大黄素和大黄素甲醚；并将称取的所有对照品与甲醇溶液混合配制成混合对照品溶液；所述混合对照品溶液中各对照品的的质量浓度分别为20μg/mL。
[0017]进一步的，以虎杖苷色谱峰为参照时，所述肝爽颗粒指纹图谱包括23个共有峰，各共有峰的相对保留时间分别为：
[0018]1号峰，相对保留时间为0.3195；
[0019]2号峰，相对保留时间为0.4468；
[0020]3号峰，相对保留时间为0.4712；
[0021]4号峰，相对保留时间为0.7869；
[0022]5号峰，相对保留时间为0.8963；
[0023]6号峰，相对保留时间为1；
[0024]7号峰，相对保留时间为1.0308；
[0025]8号峰，相对保留时间为1.1917；
[0026]9号峰，相对保留时间为1.4104；
[0027]10号峰，相对保留时间为1.4760；
[0028]11号峰，相对保留时间为1.5101；
[0029]12号峰，相对保留时间为1.5782；
[0030]13号峰，相对保留时间为1.7378；
[0031]14号峰，相对保留时间为1.8003；
[0032]15号峰，相对保留时间为1.9263；
[0033]16号峰，相对保留时间为2.0361；
[0034]17号峰，相对保留时间为2.1522；
[0035]18号峰，相对保留时间为2.2769；
[0036]19号峰，相对保留时间为3.0551；
[0037]20号峰，相对保留时间为3.1623；
[0038]21号峰，相对保留时间为3.3091；
[0039]22号峰，相对保留时间为3.5005；
[0040]23号峰，相对保留时间为3.7839。
[0041]进一步的，其中，5号峰为阿魏酸；6号峰为虎杖苷；7号峰为菊苣酸；11号峰为柚皮苷；12号峰为橙皮苷；13号峰为迷迭香酸；14号峰为新橙皮苷；16号峰为丹酚酸B；21号峰为大黄素；23号峰为大黄素甲醚。
[0042]本专利技术的有益效果是：
[0043]1、本专利技术提供的肝爽颗粒指纹图谱检测方法，得到的肝爽颗粒指纹图谱具有23个达到有效分离的共有峰，能够有效地表征肝爽颗粒的质量，有利于全面监控药物的质量、可靠性高。
[0044]2、本专利技术通过对18个不同批次的肝爽颗粒进行检测，结果表明，相同位置色谱峰的相对保留时间的RSD均在5％之内，说明本专利技术提供的指纹图谱具有较好的重现性，具有准确度高、稳定性高的特点。
附图说明
[0045]图1为本实施例200816批供试品色谱图；
[0046]图2为本发本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种肝爽颗粒指纹图谱检测方法，其特征在于：所述肝爽颗粒指纹图谱检测方法包括以下步骤：1)采用甲醇对肝爽颗粒进行超声提取，得到待检测供试品溶液；2)采用超高效液相色谱法对供试品溶液进行高效液相色谱检测，记录40min内的色谱数据；根据《中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版》，由色谱数据生成肝爽颗粒指纹图谱；所述超高效液相色谱法的条件为：色谱柱为Waters Acquity UPLC H
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Class柱；检测波长为210～400nm；流动相A为乙腈，流动相B为体积分数0.05％～0.2％的磷酸水溶液；流速为0.3～0.5mL/min；洗脱方式为梯度洗脱，所述梯度洗脱的洗脱程序如下所示：时间(min)流动相A(％)流动相B(％)09645928108713158713188515198020248020286040336040355050402080。2.根据权利要求1所述的肝爽颗粒指纹图谱检测方法，其特征在于：所述步骤1)的具体过程是，精密称取肝爽颗粒粉末0.3g，并置于具塞锥形瓶中，加入50％～90％甲醇水溶液50mL，超声处理30min，放冷，采用50％～90％甲醇水溶液补足减失的质量，定容、摇匀，在1200rpm下离心10min，取上清液，过0.2～0.5μm微孔滤膜，过滤液为供试品溶液。3.根据权利要求2所述的肝爽颗粒指纹图谱检测方法，其特征在于：所述超声功率为400～800W，超声频率为30～50KHZ，时间为20～60min。4.根据权利要求3所述的肝爽颗粒指纹图谱检测方法，其特征在于：所述步骤2)中，色谱柱规格为2.1mm
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50mm，1.7μm；柱温为30～50℃；进样体积为0.5～2μL。5.根据权利要求1
‑
4任一项所述的肝爽颗粒指纹图谱检测方法，其特征在于：所述肝爽颗粒指纹图谱检测方法还包括以下步骤；3)配制混合对照品溶液，然后采用与供试品溶液相同的超高效液相色谱条件对混合对照品溶液进行测试，得到混合...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘峰，韩东，彭修娟，李林林，许刚，陈衍斌，刘金华，程茜菲，李波，谢伟，
申请(专利权)人：陕西国际商贸学院，
类型：发明
国别省市：