生长分化因子15(GDF-15)构建体制造技术

本发明专利技术涉及生长分化因子15(GDF

【技术实现步骤摘要】
生长分化因子15(GDF
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15)构建体
[0001]本申请为分案申请，原申请的申请日为2014年7月31日，申请号为201480043522.8(PCT/US2014/049254)，专利技术名称为“生长分化因子15(GDF
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15)构建体”。
[0002]序列表
[0003]本申请含有序列表，所述序列表已以ASCII格式电子提交并且由此以引用的方式整体并入本文。2014年7月29日创建的所述ASCII副本命名为A
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1850
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WO
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PCT_SL.txt，并且大小为630,200字节。
专利

[0004]本公开涉及包含多肽的单体和多聚体，所述多肽包含GDF15区。
[0005]专利技术背景
[0006]生长分化因子15(GDF15)为TGFβ超家族的分支成员。它也称为巨噬细胞抑制细胞因子1(MIC1)(Bootcov MR，1997，Proc Natl Acad Sci 94：11514
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9)、胎盘骨形态发生因子(PLAB)(Hromas R 1997，Biochim Biophys Acta.1354：40
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4)、胎盘转化生长因子β(PTGFB)(Lawton LN 1997，Gene.203：17
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26)、前列腺衍生因子(PDF)(Paralkar VM 1998，J Biol Chem.273：13760
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7)以及非甾体类抗炎药物活化基因(NAG
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1)(Baek SJ 2001，J Biol Chem.276：33384
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92)。
[0007]人GDF15基因位于染色体19p13.2
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13.1上；大鼠GDF15基因位于染色体16上；并且小鼠GDF15基因位于染色体8上。GDF15开放阅读框跨越两个外显子(Bottner M 1999，Gene.237：105
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11和NCBI)。成熟GDF15肽与其它家族成员共有低同源性(Katoh M 2006，Int J Mol Med.17：951
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5.)。
[0008]GDF15被合成为大的前体蛋白质，所述蛋白质在二元切割位点(dibasic cleavage site)上被切割以释放羧基端成熟肽。小鼠和大鼠GDF15前体肽原均含有303个氨基酸。人全长前体含有308个氨基酸。啮齿类动物成熟肽在RGRR(SEQ ID NO：1)切割位点加工后含有115个氨基酸。人成熟肽在RGRRRAR(SEQ ID NO：2)切割位点加工后含有112个氨基酸。人成熟GDF15肽与大鼠和小鼠成熟GDF15肽共有66.1％和68.1％的序列相似性(Bottner M 1999，Gene.237：105
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11；Bauskin AR 2000，EMBO J.19：2212
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20；NCBI)。在成熟GDF15肽中不存在糖基化位点。
[0009]成熟GDF15肽含有形成半胱氨酸结基序(具有三个链内二硫键)所需的七个保守半胱氨酸残基和对于TGFβ超家族成员常见的单个链间二硫键。成熟GDF15肽进一步含有形成第四链内二硫键的两个另外的半胱氨酸残基。生物活性GDF15是通过一个链间二硫键共价连接的成熟肽的25KD的同二聚体。
[0010]已报道GDF15循环水平在多种病理和生理状况，最明显地怀孕(Moore AG 2000.J Clin Endocrinol Metab 85：4781
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4788)、β
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地中海贫血(Tanno T 2007，Nat Med 13：1096
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101；Zimmermann MB，2008 Am J Clin Nutr88：1026
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31)以及先天性红细胞生成障碍性贫血(Tamary H 2008，Blood.112：5241
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4)中升高。在文献报道中，GDF15还与多种物活性有关。GDF15敲除和转基因小鼠的研究表明GDF15可防止局部缺血/再灌注或过载诱发的心
脏损伤(KempfT，2006，Circ Res.98：351
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60；Xu J，2006，Circ Res.98：342
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50)、防止衰老相关的运动神经元和感觉神经元损失(Strelau J，2009，J Neurosci.29：13640
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8)、适度防止肾的代谢性酸中毒，并且可引起癌症患者的恶病质(Johnen H 2007 Nat Med.11：1333
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40)。许多小组还研究了GDF15在细胞凋亡和增殖中的作用，并且报道了使用不同的细胞培养物和异种移植模型的有争议的结果。关于转基因小鼠的研究显示GDF15防止致癌物或Apc突变诱导的肠和肺中的瘤形成(Baek SJ 2006，Gastroenterology.131：1553
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60；Cekanova M 2009，Cancer Prev Res2：450
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8)。
[0011]专利技术概述
[0012]本文提供了包含GDF15多肽或GDF15突变体多肽和Fc结构域的融合蛋白。
[0013]在一个实施方案中，Fc结构域包含选自由以下组成的组的序列：SEQ ID NO：16、22、28、29、33、35、38、48、85、91、106、132、141、148、155、162、169、176、183、192、199、206、213、220、227、233、236、268、275、281、282、283、284、285、286、287、288、289、290、291、292、293、294、295、296、297、298、299、300、301和302。在另一个实施方案中，GDF15多肽或GDF15突变体多肽包含选自由以下组成的组的序列：SEQ ID NO：4、8、12、25、52和55。在另一个实施方案中，融合蛋白还包含多肽接头。在一个实施方案中，多肽接头具有选自由以下组成的组的序列：SEQ ID NO：18、30、34、40、58、61、64、69、72、75、78、113、116、119、122、125、128。在一个实施方案中，融合蛋白包含两个或多个Fc结构域。在一个实施方案中，融合蛋白包含两个或多个多肽接头。在一个实施方案中，融合蛋白包含选自由以下组成的组的序列：SEQ ID NO：46、24、27、32、37、20、42、50、54、57、60、63、66、68、71、74、77、82、84、88、93、96、98、100、102、104、108、134、137、139、143、146、150、153、269、272、276、279、157、160、164、167、171、174、178、181本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种融合蛋白，其包含GDF15区和Fc结构域。2.如权利要求1所述的融合蛋白，其中所述Fc结构域包含选自由以下组成的组的序列：SEQ ID NO：16、22、28、29、33、35、38、48、85、91、106、132、141、148、155、162、169、176、183、192、199、206、213、220、227、233、236、268、275、281、282、283、284、285、286、287、288、289、290、291、292、293、294、295、296、297、298、299、300、301和302。3.如权利要求2所述的融合蛋白，其中所述GDF15区包含选自由以下组成的组的序列：SEQ ID NO：4、8、12、25、52和55。4.如权利要求2所述的融合蛋白，其中所述GDF15区和所述Fc结构域通过多肽接头结合。5.如权利要求4所述的融合蛋白，其中所述多肽接头选自由以下组成的组：SEQ ID NO：18、30、34、40、58、61、64、69、72、75、78、113、116、119、122、125、128。6.如权利要求1所述的融合蛋白，其中所述融合蛋白包含选自由以下组成的组的序列：SEQ ID NO：46、24、27、32、37、20、42、50、54、57、60、63、66、68、71、74、77、82、84、88、93、96、98、100、102、104、108、134、137、139、143、146、150、153、269、272、276、279、157、160、164、167、...

【专利技术属性】
技术研发人员：Y，
申请(专利权)人：美国安进公司，
类型：发明
国别省市：