【技术实现步骤摘要】
编码可溶性HPV23 L1蛋白的基因及其重组质粒的构建与应用
[0001]本专利技术涉及基因工程
,具体涉一种编码可溶性HPV23 L1蛋白的基因及其重组质粒的构建与应用。
技术介绍
[0002]人乳头瘤病毒(Human Papillomavirus,HPV)是一类双链小分子DNA病毒,具有严格的种属特异性,主要感染人的皮肤和粘膜组织,引起相应部位上皮组织的增生性病变。1977年Laverty(Laverty,C.R.,Russell,P.et al.1977)在电镜中观察到宫颈癌组织中存在HPV颗粒根据核酸序列同源性,目前发现的HPV约有200多种基因型 (Chen, Casini et al. 2001)。根据“属”的分类水平,HPV可分为α属、β属等(Dawes 2005)。α属,也被称为粘膜HPV,主要感染生殖器和粘膜,导致良性皮肤疣和其他疾病;β属HPV主要侵染部位是皮肤(de Koning, Struijk et al. 2007)。HPV23属于乳头瘤病毒科(Papillomaviridae)β
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【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种编码可溶性人乳头瘤病毒23亚型L1蛋白的基因HPV23L1,其DNA序列如SEQ ID NO.1所示。2.一种载体质粒pUC
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23L1,包括载体质粒pUC57及装载其中的权利要求1所述基因HPV23L1或其片段。3.一种重组质粒pESUMO
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23L1,包括载体质粒pE
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SUMO及装载其中的权利要求1所述基因HPV23L1或其片段。4.一种重组质粒pET32a
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23L1,包括载体质粒pET32及装载其中的权利要求1所述基因HPV23L1或其片段。5.一种表达可溶性HPV23 L1蛋白的重组质粒,含有权利要求1所述基因HPV23L1或其片段。6.权利要求5所述表达可溶性HPV23 L1蛋白的重组质粒的构建方法,包括如下步骤:(1)设计权利要求1所述基因HPV23L1的扩增引物,且其正向引物包含EcoR I 或Bsa I限制性内切酶位点、反向引物包括位于终止密码子侧翼的Xho I限制性内切酶位点;(2)以所述扩增引物PCR扩增基因HPV23L1;(3)取pET32或pESUMO质粒与所得PCR扩增产物分别进行限制性内切核酸酶EcoR I 或Bsa I与Xho I双酶切消化,回收空载体质粒pET32或pE
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SUMO和HPV23 L1基因的双酶切产物,用T4 DNA连接酶16℃连接过夜,得到重组质粒;(4)将上步所得重组质粒pET32a
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23L1或pESUMO
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【专利技术属性】
技术研发人员:王爱萍,陈玉梅,周景明,刘红亮,刘燕凯,梁超,丁培阳,朱习芳,
申请(专利权)人:郑州大学,
类型:发明
国别省市:
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