微生物检查试剂盒、微生物检查方法及微生物检查装置制造方法及图纸

提供一种能够容易地实施高精度的微生物检查的技术。本公开的微生物检查试剂盒的特征在于，具备：第一注射器，其能够采集样本且具有第一注射器针；第二注射器，其容纳ATP提取试剂且具有第二注射器针；密闭的反应容器，其具有第一开口部、嵌合于所述第一开口部的第一密封构件、喷嘴、覆盖所述喷嘴的喷嘴盖和以将所述第一开口部与所述喷嘴之间分隔的方式配置的过滤器；减压密闭的废液容器，其具有第二开口部和嵌合于所述第二开口部的第二密封构件；和减压密闭的发光测量容器，其具有第三开口部和嵌合于所述第三开口部的第三密封构件且容纳有在ATP的存在下发光的发光试剂。有在ATP的存在下发光的发光试剂。有在ATP的存在下发光的发光试剂。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】微生物检查试剂盒、微生物检查方法及微生物检查装置


[0001]本公开涉及微生物检查试剂盒、微生物检查方法以及微生物检查装置。

技术介绍

[0002]在医药品工厂、饮料工厂中，在实现了在无菌环境的制造设施内进行产品的制造。以往，在用于保证制造设施、产品的无菌性的微生物检查中，采用培养法。培养法是将添加了培养基的样本在恒温机中培养数日～14天，通过目视对生长的菌的菌落数进行计数的方法。因此，为了得到检查结果而花费时间，需要等待检查结果直到产品出货为止。基于这样的背景，期望开发迅速地进行无菌判定的微生物检查方法。
[0003]作为迅速且简便的微生物检查方法之一，有三磷酸腺苷(Adenosine triphosphate，ATP)生物发光法(以下称为ATP法)。ATP法是利用萤火虫的发光反应将存在于菌体内的ATP转换为光而进行测定的方法。更具体地，将荧光素和ATP分子并入荧光素酶中，并且测量在ATP的消耗的同时氧化的荧光素(氧化荧光素)从激发态转变为基态时的发光量。此时，由于ATP 1分子的消耗对应于1个光子(photon)的生成，因此光子产生数与ATP的个数成比例。1个活菌中存在相当于1原子摩尔(amol＝10
‑
18
mol)的ATP分子来作为能量源，因此能够根据样本中的ATP的发光量来推定活菌的总数。
[0004]由于荧光素
‑
荧光素酶反应在生物发光和化学发光中具有最优异的量子效率(Φ
BL
：≈0.5)，因此可以将1个细胞检测为相当于数十万个的光子。因此，ATP法是原理上能够检测相当于1个细胞的光的方法。
[0005]但是，为了高灵敏度、高精度地检测混入到样本中的极微量(数个的水平)的菌，不仅必须使发光测量装置的性能为高灵敏度，还必须防止存在于环境中的ATP、菌、人所保有的微生物、吸附ATP的灰尘等的污染。另外，一般而言，由于在样本中混杂有来自死菌的ATP、游离ATP，因此在将样本直接用于发光测量的情况下，无法估计准确的活菌数。
[0006]在专利文献1中，记载了为了除去样本中的游离ATP，使用样本液的过滤、三磷酸酰胺双磷酸酶等ATP分解酶预先分解微生物、死菌。
[0007]现有技术文献
[0008]专利文献
[0009]专利文献1：国际公开第2016/147313号

技术实现思路

[0010]专利技术所要解决的课题
[0011]然而，包括专利文献1中记载的方法在内，ATP法通常反应操作繁杂，检查环境、作业者的技能容易影响检查结果。因此，容易受到来自检查环境、作业者的污染而降低检查精度，成为假阳性。即使在安全柜内实施无菌操作，也难以完全防止污染，特别是在无菌试验那样的阴性/阳性判定检查中，难以明确地证明是假阳性还是真阳性。
[0012]因此，本公开提供一种能够容易地实施高精度微生物检查的技术。
[0013]用于解决课题的手段
[0014]本公开的微生物检查试剂盒的特征在于，具备：
[0015]第一注射器，其能够采集样本且具有第一注射器针；
[0016]第二注射器，其容纳ATP提取试剂且具有第二注射器针；
[0017]密闭的反应容器，其具有第一开口部、嵌合于所述第一开口部的第一密封构件、喷嘴、覆盖所述喷嘴的喷嘴盖和以将所述第一开口部与所述喷嘴之间分隔的方式配置的过滤器；
[0018]减压密闭的废液容器，其具有第二开口部和嵌合于所述第二开口部的第二密封构件；和
[0019]减压密闭的发光测量容器，其具有第三开口部和嵌合于所述第三开口部的第三密封构件，且容纳在ATP的存在下发光的发光试剂。
[0020]根据本说明书的记述、附图，与本公开相关的进一步的特征将变得清楚。另外，本公开的方式通过要素以及多种要素的组合以及以后的详细的记述和所附的权利要求书的方式来实现。
[0021]本说明书的记述只不过是典型的例示，在任何意义上都不限定本公开的权利要求书或应用例。
[0022]专利技术效果
[0023]根据本公开的微生物检查试剂盒，能够容易地实施高精度的微生物检查。
[0024]上述以外的课题、构成以及效果通过以下的实施方式的说明而变得明确。
附图说明
[0025]图1是表示第一实施方式涉及的微生物检查试剂盒的反应瓶的示意图。
[0026]图2是表示第一实施方式涉及的微生物检查试剂盒的废液瓶的示意图。
[0027]图3是表示第一实施方式涉及的微生物检查试剂盒的发光测量容器的示意图。
[0028]图4A是表示第一实施方式涉及的微生物检查试剂盒的取样注射器的示意图。
[0029]图4B是表示第一实施方式涉及的微生物检查试剂盒的试剂填充注射器的示意图。
[0030]图5A是表示使用了第一实施方式涉及的微生物检查试剂盒的微生物检查方法的图。
[0031]图5B是表示使用了第一实施方式涉及的微生物检查试剂盒的微生物检查方法的图。
[0032]图5C是表示使用了第一实施方式涉及的微生物检查试剂盒的微生物检查方法的图。
[0033]图5D是表示使用了第一实施方式涉及的微生物检查试剂盒的微生物检查方法的图。
[0034]图5E是表示使用了第一实施方式涉及的微生物检查试剂盒的微生物检查方法的图。
[0035]图5F是表示使用了第一实施方式涉及的微生物检查试剂盒的微生物检查方法的图。
[0036]图5G是表示使用了第一实施方式涉及的微生物检查试剂盒的微生物检查方法的
图。
[0037]图5H是表示使用了第一实施方式涉及的微生物检查试剂盒的微生物检查方法的图。
[0038]图5I是表示使用了第一实施方式涉及的微生物检查试剂盒的微生物检查方法的图。
[0039]图6是表示使用了第一实施方式涉及的微生物检查试剂盒的微生物检查方法的一例的流程图。
[0040]图7是表示光子计数时间进程的图。
[0041]图8是表示第四实施方式涉及的微生物检查装置的构成的示意图。
[0042]图9是表示第五实施方式涉及的微生物检查装置的构成的示意图。
具体实施方式
[0043]以下，参照附图对本公开的实施方式进行说明。但是，应该注意的是，各实施方式只不过是用于实现本公开的一个例子，并不限定本公开。另外，对各图中共同的构成标注相同的参照编号。
[0044][第一实施方式][0045]<微生物检查试剂盒>
[0046]如后所述，第一实施方式涉及的微生物检查试剂盒具备反应瓶1(反应容器)、废液瓶8(废液容器)、发光测量容器12、取样注射器22(第一注射器)、试剂填充注射器15(第二至第五注射器)。
[0047]图1是表示第一实施方式涉及的微生物检查试剂盒的反应瓶1的示意图。如图1所示，反应瓶1(反应容器)具有密封盖2(第一密封构件)、喷嘴4、过滤器5、喷嘴盖6本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种微生物检查试剂盒，其特征在于，具备：第一注射器，其能够采集样本，且具有第一注射器针，第二注射器，其容纳ATP提取试剂，且具有第二注射器针，密闭的反应容器，其具有第一开口部、嵌合于所述第一开口部的第一密封构件、喷嘴、覆盖所述喷嘴的喷嘴盖以及以将所述第一开口部与所述喷嘴之间分隔的方式配置的过滤器，减压密闭的废液容器，其具有第二开口部和嵌合于所述第二开口部的第二密封构件，减压密闭的发光测量容器，其具有第三开口部和嵌合于所述第三开口部的第三密封构件，且容纳在ATP的存在下发光的发光试剂。2.根据权利要求1所述的微生物检查试剂盒，其特征在于，所述第一密封构件能够在保持所述反应容器密闭的状态下使所述第一注射器针和所述第二注射器针贯通，所述第二密封构件能够在保持所述废液容器密闭的状态下使所述喷嘴贯通，所述第三密封构件能够在保持所述发光测量容器密闭的状态下使所述喷嘴贯通。3.根据权利要求1所述的微生物检查试剂盒，其特征在于，还具备容纳ATP消除试剂且具有第三注射器针的第三注射器，所述第一密封构件能够在保持所述反应容器密闭的状态下使所述第三注射器针贯通。4.根据权利要求1所述的微生物检查试剂盒，其特征在于，所述反应容器的内部被减压。5.根据权利要求1所述的微生物检查试剂盒，其特征在于，所述过滤器的孔径为0.20μm以上。6.根据权利要求1所述的微生物检查试剂盒，其特征在于，在所述反应容器中容纳有含有培养基成分的试剂。7.根据权利要求6所述的微生物检查试剂盒，其特征在于，所述试剂还包含ATP消除试剂。8.根据权利要求6所述的微生物检查试剂盒，其特征在于，所述试剂为液态。9.根据权利要求6所述的微生物检查试剂盒，其特征在于，所述试剂为粉末状，所述微生物检查试剂盒还具备容纳所述试剂的溶剂且具有第四注射器针的第四注射器。10.根据权利要求1所述的微生物检查试剂盒，其特征在于，还具备容纳清洗试剂且具有第五注射器针的第五注射器。11.一种微生物检查方法，其特征在于，包括：准备权利要求1所述的微生物检查试剂盒，通过所述第一注射器采集所述样本，使所述第一注射器针贯通所述第一密封构件，将所述样本导入所述反应容器，使所述喷嘴贯通所述第二密封构件，利用所述反应容器与所述废液容器的压力差，通过所述过滤器过滤所述样本，捕捉所述样本中的微生物，使所述第二注射器针贯通所述第一密封构件，将所述ATP提取试剂导入所述反应容器，从所述微生物提取ATP，使所述喷嘴贯通所述第三密封构件，利用所述反应容器与所述发光测量容器的压力
差，将所述ATP的提取液导入所述发光测量容器并与所述发光试剂接触。12.根据权利要求11所述的微生物检查方法，其特征在于，所述微生物检查试剂盒还具备容纳ATP消除试剂且具有第三注射器针的第三注射器，所述微生物检查方法包括：在通过所述过滤器过滤所述样本并捕捉所述样本中的微生物后，使所述第三注射器针贯通所述第一密封构件，将所述ATP消除试剂导入所述反应容器，以及使所述喷嘴贯通所述第二密封构件，利用所述反应容器与所述废液容器的压力差，将所述ATP消除试剂排出至所述废液容器。13.根据权利要求11所述的微生物检查方法，其特征在于，所述反应容器容纳含有培养基成分的试剂，所述微生物检查方法还包括在将所述样本导入所述反应容器后培养所述样本。14.根据权利要求13所述的微生物检查方法，其特征在于，所述试剂为粉末状，所述微生物检查试剂盒还具备容纳所述试剂的溶剂且具有第四注射器...

【专利技术属性】
技术研发人员：野田英之，石丸真子，
申请(专利权)人：株式会社日立高新技术，
类型：发明
国别省市：