转基因烟草的LAMP检测引物体系、试剂盒及方法技术

本发明专利技术提供了一种转基因烟草的LAMP检测引物体系，引物体系根据15种基因设计，15种基因包括18S rRNA、Nr、CaMV35S、FMV35S、NPT II、NOS、Btc、CpTI、EPSPS、CMV

【技术实现步骤摘要】
转基因烟草的LAMP检测引物体系、试剂盒及方法


[0001]本专利技术属于基因检测
，特别涉及一种转基因烟草的LAMP检测引物体系、 LAMP检测试剂盒及LAMP检测方法。

技术介绍

[0002]1983年，世界上首例转基因作物也即转基因烟草在美国研发成功后，数十年来，转基因烟草在世界范围内广泛应用。我国发布的相关规范有国烟法[1998]168号《烟草基因工程研究及其应用管理办法》、国烟科[2003]387号《国家烟草专卖局关于加强对转基因烟草监控的通知》，在2005至2006年还陆续传达了加强出口烟草转基因检测的几个文件。
[0003]基因扩增检测技术是检测转基因烟草的主流方法，以温控程序区别可粗分为变温、恒温两类，变温技术以PCR为代表，如GB/T 24310
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2009《烟草及烟草制品转基因检测方法》。但是使用该方法检测对硬件和场地要求比较高，需要建设符合GB/T 19495.2要求的实验室，通常需超过50m2场地、大约30万元的装修费用；关键仪器PCR仪及电泳仪和凝胶成像系统、qPCR仪、dPCR仪等常规本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种转基因烟草的LAMP检测引物体系，其特征在于，所述引物体系根据15种基因设计，15种所述基因包括18S rRNA、Nr、CaMV35S、FMV35S、NPT II、NOS、Btc、CpTI、EPSPS、CMV
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cp、PVY
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cp、TMV
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cp、CMV
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sat、PVY
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Nib、TMV
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54kD；所述引物体系包括核苷酸序列为序列1～序列60的引物；其中，序列1为18S rRNA的F3引物、序列2为18S rRNA的B3引物、序列3为18SrRNA的FIP引物、序列4为18S rRNA的BIP引物；序列5为Nr的F3引物、序列6为Nr的B3引物、序列7为Nr的FIP引物、序列8为Nr的BIP引物；序列9为CaMV35S的F3引物、序列10为CaMV35S的B3引物、序列11为CaMV35S的FIP引物、序列12为CaMV35S的BIP引物；序列13为FMV35S的F3引物、序列14为FMV35S的B3引物、序列15为FMV35S的FIP引物、序列16为FMV35S的BIP引物；序列17为NPT II的F3引物、序列18为NPT II的B3引物、序列19为NPT II的FIP引物、序列20为NPT II的BIP引物；序列21为NOS的F3引物、序列22为NOS的B3引物、序列23为NOS的FIP引物、序列24为NOS的BIP引物；序列25为Btc的F3引物、序列26为Btc的B3引物、序列27为Btc的FIP引物、序列28为Btc的BIP引物；序列29为CpTI的F3引物、序列30为CpTI的B3引物、序列31为CpTI的FIP引物、序列32为CpTI的BIP引物；序列33为EPSPS的F3引物、序列34为EPSPS的B3引物、序列35为EPSPS的FIP引物、序列36为EPSPS的BIP引物；序列37为CMV
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cp的F3引物、序列38为CMV
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cp的B3引物、序列39为CMV
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cp的FIP引物、序列40为CMV
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cp的BIP引物；序列41为PVY
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cp的F3引物、序列42为PVY
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cp的B3引物、序列43为PVY
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cp的FIP引物、序列44为PVY
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cp的BIP引物；序列45为TMV
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cp的F3引物、序列46为TMV
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cp的B3引物、序列47为TMV
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cp的FIP引物、序列48为TMV
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cp的BIP引物；序列49为CMV
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sat的F3引物、序列50为CMV
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sat的B3引物、序列51为CMV
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sat的FIP引物、序列52为CMV
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sat的BIP引物；序列53为PVY
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Nib的F3引物、序列54为PVY
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Nib的B3引物、序列55为PVY
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Nib的FIP引物、序列56为PVY
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Nib的BIP引物；序列57为TMV
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54kD的F3引物、序列58为TMV
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54kD的B3引物、序列59为TMV
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54kD的FIP引物、序列60为TMV
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54kD的BIP引物。2.一种转基因烟草的LAMP检测试剂盒，其特征在于，包括如权利要求1所述的引物体系；所述引物体系包括18S rRNA引物组、Nr引物组、CaMV35S引物组、FMV35S引物组、NPT II引物组、NOS引物组、Btc引物组、CpTI引物组、EPSPS引物组、CMV
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cp引物组、PVY
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cp引物组、TMV
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cp引物组、CMV
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sat引物组、PVY
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Nib引物组、TMV
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54kD引物组；
每组引物组包括对应基因的F3引物、B3引物、FIP引物和BIP引物；每组所述引物组中各引物的浓度为：F3引物2μmol/L、B3引物2μmol/L、FIP引物16μmol/L、BIP引物16μmol/L。3.如权利要求2所述的LAMP检测试剂盒，其特征在于，还包括：LAMP试剂：适用于所述引物体系；阳性对照，包括分别以每组所述引物组的F3引物和B3引物为扩增片段扩增的转基因烟草源性DNA，每个扩增的所述转基因烟草源性DNA的浓度为105copies/...

【专利技术属性】
技术研发人员：董睿，童福强，王维维，张丽，陈永芳，
申请(专利权)人：贵州中烟工业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：