胆汁淤积症预后生物标记物检测试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及用于胆汁淤积症指示预后的生物标记物、标记物检测方法及相应试剂盒。预后指示生物标记物选自甘氨酰化猪胆酸(Glyco

【技术实现步骤摘要】
胆汁淤积症预后生物标记物检测试剂盒


[0001]本专利技术涉及医药
，具体涉及胆汁淤积症的预后检测试剂盒及其在胆汁淤积症预后检测中的用途。

技术介绍

[0002]Alagille综合征(缩写为ALGS)是具有表型特征的慢性胆汁淤积的最常见原因，是一种累及多系统的遗传性疾病，约94％的ALGS由JAG1基因突变引起。该综合征在1969年由Alagille等首次报道。Alagille综合征涉及的脏器包括肝脏、心脏、骨骼、眼睛和颜面等，发病率大约为1/30，000
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70，000。其临床表型差异很大，严重者婴儿期就需要肝移植，也可无明显肝病表现生存至成人。此外也有部分患儿胆汁淤积在生命的前几年严重，后逐渐改善。
[0003]JAG1突变的类型和位置与疾病的严重性之间缺乏强相关性，甚至在同一家系受影响成员中表型明显不同。遗传给患儿的亲本临床表型亦可非常轻微。基因型
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表型缺乏明显相关性限制了遗传数据应用于临床管理。由于依靠早期临床表现和基因信息难以区分预后较好和需要肝移植的患儿，因此寻找可判断预后的生物标志对病人临床管理具有积极意义。
[0004]胆汁酸是胆汁的主要组成成分，可作为内源性信号分子参与调节肝脏和周围组织中脂质和糖类的代谢和能量平衡。肝脏、胆囊和肠道协同参与维持人体内胆汁酸的稳态。肝脏或胆道疾病可引起胆汁酸的分布或代谢紊乱，导致血清胆汁酸的组成和含量发生显着变化。胆汁酸是两性分子，同时具有亲水性和疏水性基团。高浓度的胆汁酸蓄积因其细胞毒性作用，可导致严重的肝损伤。
[0005]胆汁酸的细胞毒性与其结构相关，疏水性强的胆汁酸具有脂解性，高浓度时具有细胞毒性，共轭(甘氨酰化、牛磺酰化、硫酸化及葡萄糖醛酸化)和羟基化均可通过增加胆汁酸的溶解性来降低胆汁酸的毒性。血和尿中胆汁酸代谢谱是体内肝脏胆固醇代谢和胆汁酸肠肝循环等的综合反映。早在2001年，Wang 等在Bsep
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(Abcb11
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或Spgp
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)小鼠胆酸池中检测出高水平的四羟基胆汁酸 (Tetrahydroxy bile acid，THBA)并据此推断THBA引起的胆酸池亲水性增高可能是导致小鼠与胆盐外运泵(Bile salt export pump，BSEP)缺陷患儿临床表型差异的原因。后经鉴定，这种THBA为3α,6β,7β,12α
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THBA。2017年中国台湾学者在婴儿胆汁淤积症患儿尿液胆酸谱检测后发现，尿THBA比例>7.23％时指示患儿预后良好，且THBA比例≤7.23％是导致无移植存活率降低的独立因素。后Wang等发现在Bsep和Mdr2双敲除小鼠体内亦具有增加的亲水性胆酸THBA 及鼠胆酸(Muricholic acid，MCA)等，这种变化可预防Mdr2
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小鼠的肝损伤而起保护作用。专利技术人通过前期对钠离子
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牛磺胆酸钠共转运多肽(Sodiumtaurocholate co
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transporting polypeptide，NTCP)缺陷患儿和小鼠体内胆汁酸的检测还发现，硫酸化的胆酸增加亦可能是引起较轻临床表型的原因。尿液中硫酸化的胆汁酸亦可区分不同严重程度妊娠期胆汁淤积症。据此推断，特定的胆汁酸可以作为胆汁淤积症的预后指标，对于胆汁淤积症的预后指示具有重要临床意义。且目前国际上无相关ALGS患儿胆汁酸谱研究，ALGS患儿胆汁酸谱分析具有十分重要临床意义。

技术实现思路

[0006]本专利技术所要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供了一种用于胆汁淤积症预后检测、判断的生物标记物，检测受试者血液中生物标记物水平的方法，及用于该检测方法的试剂盒。本专利技术还涉及根据检测到的受试者血液中标记物的浓度水平判断预后状况的方法。将对于预后的判断结论告知预测或治疗对象，指导临床治疗或用药。
[0007]本专利技术的第一方面，提供了胆汁淤积症指示预后标记物及其检测试剂在制备用于胆汁淤积症预后检测试剂盒的应用。
[0008]其中，所述胆汁淤积症或胆汁淤积性肝病包括原发性胆汁性胆管炎(Primarybiliarycholangitis，PBC)、原发性硬化性胆管炎(Primarysclerosingcholangitis，PSC)和各种基因缺陷引起的胆汁淤积症。基因缺陷引起的胆汁淤积症包括SLC25A13基因缺陷引起的希特林蛋白缺乏症(Neonatalintrahepaticcholestasiscausedbycitrindeficiency，NICCD)、先天性胆汁酸合成障碍(Congenitalbileacidsynthesisdefect，CABS)[例如，CBAS1型，HSD3B7基因缺陷；CBAS2型，AKR1D1基因缺陷及CYP27A1基因缺陷引起的脑腱黄瘤病(Cerebrotendinousxanthomatosis，CTX)]及家族性肝内胆汁淤积症(Progressivefamilialintrahepaticcholestasis，PFIC)1～6型(进一步的，分别为PFIC1型，ATP8B1(编码FIC1蛋白)基因缺陷；PFIC2型，ABCB11(编码BSEP蛋白)基因缺陷；PFIC3型，ABCB4(编码MDR3蛋白)基因缺陷；PFIC4型，TJP2(编码TJP2蛋白)基因缺陷；PFIC5型，NR1H4(编码FXR蛋白)基因缺陷及PFIC6型，MYO5B(编码MYO5B蛋白)基因缺陷)、由JAG1或NOTCH2基因缺陷引起的Alagille综合征等；
[0009]其中，所述标记物选自GHCA、Tauro
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2β,3α,7α,12α
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THBA、THCA、Tauro
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3α,6β,7α,12α
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THBA、Tauro
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3α,6α,7α,12α
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THBA、总Tauro
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THBAs中一种或多种。
[0010]本专利技术第二方面，提供了一种用于胆汁淤积症预后标记物检测的试剂盒，试剂盒中包括用于预后标记物检测的试剂，所述试剂包括预后标记物标准品或稳定同位素标记的与待测预后标记物相同的化合物，其中标准品或稳定同位素标记的化合物用于定量和校正待诊断标记物。
[0011]用于胆汁淤积症预后的生物标记物可选自GHCA、Tauro
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2β,3α,7α,12α
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THBA、THCA、Tauro
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3α,6β,7α,12α
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THBA、Tauro
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3α,6α,7α,12α
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THBA、总Tauro
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THBAs中一种或多种。
[0012]优选地，所述预后标记物为Tauro
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2β本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.胆汁淤积症指示预后标记物，其特征在于，所述标记物选自甘氨酰化猪胆酸(即Glyco
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hyoCA或GHCA)、牛磺酰化
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2β,3α,7α,12α
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四羟基胆酸(即Tauro
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2β,3α,7α,12α
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Tetrahydroxy bile acid或Tauro
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2β,3α,7α,12α
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THBA)、牛磺酰化猪胆酸(即Tauro
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hyoCA或THCA)、Tauro
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3α,6β,7α,12α
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THBA、Tauro
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3α,6α,7α,12α
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THBA、总Tauro
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THBAs中一种或多种。2.权利要求1所述的标记物或其检测试剂在制备用于胆汁淤积症预后检测试剂盒的应用。3.一种用于胆汁淤积症预后检测的试剂盒，其特征在于，包括用于指示预后标记物检测的试剂，所述试剂包括诊断标记物标准品或稳定同位素标记的与待测诊断标记物相同的化合物，其中标准品或稳定同位素标记的化合物用于定量和校正待诊断标记物。4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述预后标记物选自GHCA、Tauro
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2β,3α,7α,12α
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THBA、THCA、Tauro
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【专利技术属性】
技术研发人员：王建设，王梦宣，刘腾，
申请(专利权)人：清佰医药公司，
类型：发明
国别省市：