一种用于鸡性别鉴定的PCR引物、试剂盒及其方法技术

本发明专利技术提供一种用于鸡性别鉴定的PCR引物、试剂盒及其方法，所述鸡性别鉴定用PCR引物序列如SEQ ID NO.1和/SEQ ID NO.2所示。通过本发明专利技术的PCR引物进行PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳，利用电泳结果的条带数来确定鸭、鸡、鸽、番鸭、鹅或鹌鹑的性别，具有操作简单方便，鉴别结果快速准确，便于基层推广和使用，具有广阔的市场应用前景，此外，基于本发明专利技术方法开发的检测试剂盒，可产生可观的经济效益和良好的社会价值。价值。

【技术实现步骤摘要】
一种用于鸡性别鉴定的PCR引物、试剂盒及其方法
[0001]本申请为申请日为2021年01月28日，申请号为202110120742.8，专利技术名称为一种用于家禽性别鉴定的PCR引物、试剂盒及其方法的中国专利技术专利的分案申请。


[0002]本专利技术属于生物
，具体涉及一种用于鸡性别鉴定的PCR引物、试剂盒及其方法。

技术介绍

[0003]商业化家禽品种大都是以配套系模式生产的，父系一般生长速度较快，母系一般繁殖效率较高，因此都需要早期进行性别鉴定，父系要提前淘汰母雏，母系要提前淘汰公雏。肉用型家禽的公禽一般生长速度较快，公母分群饲养，养殖效益会更好。蛋用型家禽出雏时只保留母雏，公雏直接淘汰。因此家禽早期性别鉴定在生产中具有重要的意义。
[0004]目前家禽早期的性别鉴定除了伴性遗传(金银色羽、横斑羽、快慢羽)等方法外，主要通过翻肛观察生殖突起进行鉴别。但翻肛鉴别须在雏禽出生24小时内进行，超过这个时间段，雏禽肛门难以翻开，生殖突起萎缩甚至陷入泄殖腔深处，不便观察翻肛鉴别劳动强度大、工作环境差、专业性高，误鉴率也较高。
[0005]因此，需要开发一种简单方便，能够快速、准确鉴别家禽性别的方法。

技术实现思路

[0006]本专利技术目的在于解决的技术问题在于针对上述现有技术的不足，提供一种设计合理，可用于家禽早期性别快速鉴定的PCR引物。
[0007]本专利技术通过以下技术方案实现本专利技术的目的：
[0008]本专利技术目的之一在于提供一种性别鉴定用PCR引物，所述引物序列如SEQ ID NO.1/SEQ ID NO.2所示。即所述引物的核苷酸序列为：
[0009]正向引物(SEQ ID NO.1)：5'
‑
ATGAAAGAGTTTCAGCACTTGA
‑
3'；
[0010]反向引物(SEQ ID NO.2)：5'
‑
TTCATAATAGGAGCTCGAGCCA
‑
3'。
[0011]本专利技术目的之二在于提供包含本专利技术所述的性别鉴定用PCR引物的试剂盒。
[0012]在本专利技术的一种实施例中，本专利技术所述的试剂盒包含本专利技术所述的PCR引物、PCR反应液，在一些实施例中，还可以包含DNA提取液。
[0013]本专利技术目的之三在于提供本专利技术所述的PCR引物或本专利技术所述的试剂盒在养殖业中的应用。
[0014]本专利技术目的之四在于提供本专利技术所述的PCR引物或本专利技术所述的试剂盒在鸭性别鉴定中的应用。
[0015]本专利技术所述的在鸭性别鉴定中的应用，通过本专利技术所述的引物进行PCR扩增，电泳结果呈现1147bp一条带的为公鸭，呈现1147bp和851bp的两条带时为母鸭。
[0016]本专利技术目的之五在于提供本专利技术所述的PCR引物或本专利技术所述的试剂盒在鸡性别
鉴定中的应用。
[0017]本专利技术所述的在鸡性别鉴定中的应用，通过本专利技术所述的引物进行PCR扩增，电泳结果呈现983bp一条带的为公鸡，呈现983bp和798bp的两条带时为母鸡。
[0018]本专利技术目的之六在于提供本专利技术所述的PCR引物或本专利技术所述的试剂盒在鸽性别鉴定中的应用。
[0019]本专利技术所述的在鸽性别鉴定中的应用，通过本专利技术所述的引物进行PCR扩增，电泳结果呈现937bp一条带的为公鸽，呈现937bp和1153bp的两条带时为母鸽。
[0020]本专利技术目的之七在于提供本专利技术所述的PCR引物或本专利技术所述的试剂盒在番鸭性别鉴定中的应用。
[0021]本专利技术所述的在番鸭性别鉴定中的应用，通过本专利技术所述的引物进行PCR扩增，电泳结果呈现1153bp一条带的为公番鸭，呈现1153bp和832bp的两条带时为母番鸭。
[0022]本专利技术目的之八在于提供本专利技术所述的PCR引物或本专利技术所述的试剂盒在鹅性别鉴定中的应用。
[0023]本专利技术所述的在鹅性别鉴定中的应用，，电泳结果呈现1145bp一条带的为公鹅，呈现1145bp和833bp的两条带时为母鹅。
[0024]本专利技术目的之九在于提供本专利技术所述的PCR引物或本专利技术所述的试剂盒在鹌鹑性别鉴定中的应用。
[0025]本专利技术所述的在鹌鹑性别鉴定中的应用，电泳结果呈现1068bp一条带的为公鹌鹑，呈现1068bp和791bp的两条带时为母鹌鹑。
[0026]本专利技术还提供一种鸭、鸡、鸽、番鸭、鹅或鹌鹑性别快速鉴定方法，包括以下步骤：
[0027]1)提取待测家禽的基因组DNA；
[0028]2)以步骤1)中提取的DNA为模板，利用本专利技术所述引物对，进行PCR扩增反应；
[0029]3)PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳检测，
[0030]当待测家禽为鸭时，电泳结果呈现1147bp一条带的为公鸭公鸡，呈现1147bp和851bp的两条带时为母鸭；
[0031]当待测家禽为鸡时，电泳结果呈现983bp一条带的为公鸡，呈现983bp和798bp的两条带时为母鸡；
[0032]当待测家禽为鸽时，电泳结果呈现937bp一条带的为公鸽，呈现937bp和1153bp的两条带时为母鸽；
[0033]当待测家禽为番鸭时，电泳结果PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳检测，电泳结果呈现1153bp一条带的为公番鸭，呈现1153bp和832bp的两条带时为母番鸭；
[0034]当待测家禽为鹅时，电泳结果呈现1145bp一条带的为公鹅，呈现1145bp和833bp的两条带时为母鹅；
[0035]当待测家禽为鹌鹑时，电泳结果呈现1068bp一条带的为公鹌鹑，呈现1068bp和791bp的两条带时为母鹌鹑。
[0036]本专利技术所述的方法，步骤1)提取待测家禽的基因组DNA可以按照本领域常规方法提取，例如可以选用包括但不限于羽毛、血液、组织、器官等进行待测家禽的基因组DNA的提取。
[0037]本专利技术所述的方法，步骤2)中PCR反应体系可以为本领域的常规体系，在本专利技术的
一种具体的实施方式中，为：2
×
PCR Mix(南京诺唯赞生物有限公司)25μL，10μmol/L正向和反向引物各1μL，50
‑
100μg/ml模板DNA 2μL，超纯水21μL。
[0038]本专利技术所述的方法，步骤2)中PCR反应程序可以为本领域的常规体系，在本专利技术的一种具体的实施方式中，为：95℃5min，(95℃30s，60℃30s，72℃30s)35循环，72℃10min。
[0039]本专利技术与现有技术相比具有以下优点：本专利技术通过设计的PCR引物，进行PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳，利用电泳结果的条带数来确定家禽的性别，具有操作简单方便，鉴别结果快速准确，便于基层推广和使用，具有广阔的市场应用前景，此外，基于本专利技术方法开发的检测试剂盒，可产生可观的经济效益和良好的社会价值。
[0040]本专利技术的引物对家禽品种限制性小，因此对于所述的本专利技术所述的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种PCR引物或包含所述PCR引物的试剂盒在鸡性别鉴定中的应用，所述应用具体为通过所述的PCR引物或所述的试剂盒进行PCR扩增，电泳结果呈现983bp一条带的为公鸡，呈现983bp和798bp的两条带时为母鸡；所述引物的核苷酸序列为：正向引物序列如SEQ ID NO.1所示、反向引物序列如SEQ ID NO.2所示。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的试剂盒还包含PCR反应液和/或DNA提取液。3.一种鸡的性别快速鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：1)提取待测鸡的基因组DNA；2)以步骤1)中提取的DNA为模板，利用引物进行PCR扩增反应；所述引物的核苷酸序列为：正向引物序列如SEQ ID NO.1所示、反向引物序列如SEQ ID NO.2所示；3...

【专利技术属性】
技术研发人员：贾晓旭，高玉时，唐修君，陆俊贤，樊艳凤，姬改革，黄胜海，顾荣，张静，马尹鹏，张小燕，葛庆联，付胜勇，刘宏祥，
申请(专利权)人：江苏省家禽科学研究所，
类型：发明
国别省市：