SARS-CoV-2胃肠炎症动物模型的构建方法技术

技术编号:30233064 阅读:14 留言:0更新日期:2021-09-29 10:09
本发明专利技术属于动物模型构建技术领域,公开了SARS

【技术实现步骤摘要】
SARS

CoV

2胃肠炎症动物模型的构建方法


[0001]本专利技术涉及动物模型构建
,更具体地,涉及SARS

CoV

2胃肠炎症动物模型的 构建方法。

技术介绍

[0002]COVID

19由SARS

CoV

2引起严重急性呼吸系统疾病,自爆发以来已经引起全世界范 围内的大流行。典型的呼吸道症状已被确认为SARS

CoV

2感染的共同特征,气道被确认为 靶器官。然而,自从我们课题组提供第一个胃肠道的证据,且随着SARS

CoV

2感染研究深 入,有胃肠道症状的病例的临床报告不断升级,这些症状通常表现为腹泻、厌食、恶心和呕 吐。此外,无法解释的是,一些感染SARS

CoV

2的患者在发病时甚至在病程中仅表现出消 化系统症状,说明胃肠道对SARS

CoV

2的高度易感性。病理上,腹部CT显示肠壁增厚。 值得注意的是,在ICU患者中能观察到小肠壁增厚。然而,COVID

19患者胃肠道易感部位 的系统特征以及胃肠道症状发生的机制尚不清楚,部分原因是缺乏专为SARS

CoV

2胃肠道 感染设计的动物模型。
[0003]世界各国对于抗新型冠状病毒肺炎的疫苗、抗体、药物研究迅速推展开来,动物模型在 上述研究中具有重要作用,甚至可能成为限制这些研究进展的主要因素,现有技术急需 SARS

CoV

2胃肠道感染的动物模型的构建。

技术实现思路

[0004]本专利技术所要解决的技术问题是克服现有技术存在的上述缺陷,提供SARS

CoV

2胃肠炎 症动物模型的构建方法。
[0005]本专利技术的目的是通过以下技术方案实现的:
[0006]SARS

CoV

2引起的胃肠炎症动物模型的构建方法,包括以下步骤:
[0007]S1、小鼠禁食16~24h后进行麻醉;
[0008]S2、从小鼠肛门注入乙酸,倒立小鼠,并对小鼠进行灌洗;
[0009]S3、一段时间后小鼠腹腔注射SARS

CoV

2 Spike Protein;
[0010]S4、数小时后即成功得到由SARS

CoV

2引起的胃肠炎症动物模型。
[0011]现有技术有一些关于新型冠状病毒SARS

CoV

2的肺部感染动物模型,本专利技术在发现 SARS

CoV

2 Spike蛋白可能引起胃肠道水肿和炎症的前提下,旨在构建SARS

CoV

2引起的 胃肠道炎症的动物模型,本专利技术研究发现,仅仅是用SARS

CoV

2 Spike Protein刺激只会引起 胃肠道的轻度炎症,无法与人类所表现出的胃肠道炎症一致,为了模拟人类的感染途径,本 专利技术在用腹腔注射SARS

CoV

2 Spike Protein之前,先对胃肠道上皮进行酸灌肠处理,添加的 乙酸能够造成一个轻微的损伤,在进行酸灌肠处理后,再用SARS

CoV

2 Spike Protein刺激则 更有利于SARS

CoV

2 Spike Protein的结合;经过这种方式获得的动物模型与现有技术报道的 有关COVID

19患者的临床症状一致,因此本专利技术方法构建的动物模型可以复制临床 COVID

19患者的胃肠道表现。
[0012]前期对乙酸的浓度进行了考察,当选用5%的乙酸时,会造成严重的炎症和胃肠道损伤, 不符合COVID

19患者的胃肠道表现,优选地,上述动物模型的构建方法中,步骤S2乙酸的 浓度为1~2%,体积为500μL~1000μL。
[0013]另外,前期还对酸刺激所作用的时间进行了考察,发现在乙酸刺激并完成灌洗后16~24h 时注射SARS

CoV

2 Spike Protein,就可以达到临床COVID

19患者的胃肠道损伤表现,因此, 优选地,上述动物模型的构建方法中,步骤S3是在灌洗后16~24h对小鼠进行腹腔注射。
[0014]优选地,上述动物模型的构建方法中,步骤S3所述SARS

CoV

2 Spike Protein的用量为 5.5nM/kg小鼠体重。
[0015]同样,还对腹腔注射SARS

CoV

2 Spike Protein的作用时间进行了优化,发现6h后即可 以达到临床COVID

19患者的胃肠道损伤表现,且24h与6h的临床COVID

19患者的胃肠道 损伤表现差异不明显。因此,优选地,上述动物模型的构建方法中,其特征在于,步骤S4 所述数小时是指6~24h。
[0016]作为一种具体的实施方式,上述动物模型的构建方法中,步骤S2所述注入乙酸的具体操 作为:吸入异氟烷,5~10分钟后,将500μL~1000μL乙酸从肛门处注入。
[0017]作为一种具体的实施方式,步骤S2所述灌洗的具体操作为:小鼠倒立后,用PBS进行 灌洗,洗掉注入的乙酸。
[0018]由于COVID

19病毒属于冠状病毒。冠状病毒是一种具有包膜的正链RNA病毒,属于冠 状病毒亚科,其下分为4个属,包括α、β、γ和δ冠状病毒,而SARS

CoV病毒、MERS病 毒和SARS

CoV

2病毒同属β冠状病毒。在以往发生的重大传染性疾病中,30%的中东呼吸 综合征(MERS)患者和10.6%的SARS患者有腹泻症状,MERS更被证实存在于胃肠液中。 可见消化道感染并引起胃肠道症状在冠状病毒中有普遍的代表意义。因此,可以预想的到, 本专利技术上述动物模型的构建方法也适用于其他冠状病毒(例如MERS病毒)引起的胃肠道动 物模型的构建。
[0019]本专利技术还提供上述动物模型构建方法制备得到的动物模型,该动物模型能够复制临床 COVID

19患者的胃肠道表现,可作为COVID

19引发的胃肠道炎症的治疗的工具。
[0020]与现有技术相比,本专利技术具有以下有益效果:<本文档来自技高网
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.SARS

CoV

2引起的胃肠炎症动物模型的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、小鼠禁食16~24h后进行麻醉;S2、从小鼠肛门注入乙酸,倒立小鼠,并对小鼠进行灌洗;S3、一段时间后小鼠腹腔注射SARS

CoV

2Spike Protein;S4、数小时后即成功得到由SARS

CoV

2引起的胃肠炎症动物模型。2.根据权利要求1所述的SARS

CoV

2引起的胃肠炎症动物模型的构建方法,其特征在于,步骤S2乙酸的浓度为1~2%v/v,体积为500μL~1000μL。3.根据权利要求1所述的SARS

CoV

2引起的胃肠炎症动物模型的构建方法,其特征在于,步骤S3是在灌洗后16~24h对小鼠进行腹腔注射。4.根据权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员:何欢欢曾发敏何建忠李颖雯邓昭华
申请(专利权)人:中山大学附属第五医院
类型:发明
国别省市:

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