美国白蛾vATPaseA基因dsRNA及其细菌表达液及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种美国白蛾vATPase A基因dsRNA及其细菌表达液，该vATPase A基因dsRNA片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明专利技术采用重组质粒在大肠杆菌HT115中表达大量所需的外源目的dsRNA，持续饲喂IPTG诱导表达靶标dsRNA的大肠杆菌HT115菌液后，对美国白蛾具有高致死能力，且对其生长发育有显著的抑制作用，采用本发明专利技术的细菌表达液防治美国白蛾的方法可实施性强、操作方便、有效性和灵敏性好、杀虫效率高，且具有环境友好等诸多优点，有很好的应用前景。的应用前景。的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
美国白蛾vATPase A基因dsRNA及其细菌表达液及应用


[0001]本申请涉及分子生物学
，具体而言，涉及一种美国白蛾 vATPase A基因dsRNA及其细菌表达菌液和应用。

技术介绍

[0002]美国白蛾(Hyphantria cunea)，又称秋幕毛虫，属鳞翅目、灯蛾科 (Lepidoptera:Arctiidae)，是我国极度危险性的外来入侵林业害虫。美国白蛾自1979年在我国首次发现以来，已经对我国农林业生态系统造成了巨大的经济损失和严重的生态威胁。美国白蛾具有繁殖能力强，食性杂、食量大，适应性极强等危害特点。美国白蛾平均每头雌虫产卵800
‑
900粒，最高可达2000余粒。该虫可以取食几乎所有种类的栽培树木、花卉和农作物，幼虫以群居形式取食叶片，4龄末期进入暴食期后，严重的一夜便可毁坏成片树林，具有极强的成灾性。此外，美国白蛾还具有很强的耐温性和生态适应性，能够承受低至
‑
16℃，高达40℃的温度，成虫具有很强的扩散能力，雄虫可在12小时内平均飞行超过7千米，最高可超过23千米。这些特本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种美国白蛾vATPase A基因dsRNA，其特征在于，所述dsRNA片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。2.一种表达权利要求1所述的dsRNA的细菌表达液，其特征在于，所述细菌表达液的制备方法包括：(1)以美国白蛾cDNA为模板，用dsHcvATPase A引物进行PCR扩增，获得所述dsRNA片段，所述dsHcvATPase A引物序列如SEQ ID NO.10和11所示；(2)将所述dsRNA片段连接到线性质粒上，构建重组载体；(3)将含有dsRNA片段的重组表达载体导入到细菌感受态细胞中培养；(4)通过IPTG诱导dsRNA产生，培养收集菌液。3.根据权利要求2所述的细菌表达液，其特征在于，所述质粒为线性化的L4440，和/或所述细菌为大肠杆菌HT115。4.权利要求1所述的dsRNA或权利要求2所述的细菌表达...

【专利技术属性】
技术研发人员：张真，张珣，张苏芳，孔祥波，刘福，樊智智，方加兴，
申请(专利权)人：中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所，
类型：发明
国别省市：