一种野蔷薇内源多胺的测定方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种野蔷薇内源多胺的测定方法及应用，包括：取野蔷薇组织研磨成粉末，加入高氯酸冰浴浸提；离心取200～400μL上清液作为冰浴浸提液，加入4μL苯甲酰氯、300μL 2mol/L NaOH，30～40℃水浴反应；然后加入饱和NaCl和乙醚，离心取上清，使乙醚挥发后加入甲醇，静置溶解除杂，收集溶解液定容后进行高效液相色谱检测，根据多胺的标准曲线计算得到待测组织中的多胺含量。本发明专利技术以苯甲酰氯做衍生化反应剂，以甲醇为溶剂，通过调节冰浴浸提液体积，以及与苯甲酰氯反应时的反应温度，显著提高多胺的提取率，并利用高效液相色谱法实现多种不同内源多胺的分离和定量测定，即本发明专利技术提供了一种降低样品用量，可简便高效提取多胺，并准确测定多胺含量的方法。并准确测定多胺含量的方法。并准确测定多胺含量的方法。

【技术实现步骤摘要】
一种野蔷薇内源多胺的测定方法及应用


[0001]本专利技术属于植物多胺提取
，具体涉及一种野蔷薇内源多胺的测定方法及应用。

技术介绍

[0002]多胺(Polyamines,PAs)存在于几乎所有生物体内，分为腐胺(Putrescine,Put)、亚精胺(Spermidine,Spd)、精胺(Spermine,Spm)及热精胺。多胺在植物体内被认为像“第二信使”般发挥重要作用，如调节保卫细胞质膜中依赖电压的内向K
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通道，并调节气孔孔径。研究表明，多胺是一种植物生长调节剂，能参与高等植物体内的许多生理过程，诸如形态发生、根系形成、花发育、果实发育以及衰老等。多胺可在外植体成花过程中积累，是成花的物质基础。此外，多胺可增强植物对环境的适应性，提高不同胁迫下植物的抗性，促进生长。
[0003]野蔷薇(Rosa multiflora Thunb.)是蔷薇科(Rosaceae)蔷薇属(Rosa)双子叶植物，用途广泛，具有广阔的开发应用前景，但植株的高效再生是前提，而关于野蔷薇体细胞胚胎发生的报道较少，且体细胞胚诱导率较低本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种野蔷薇内源多胺的测定方法，其特征在于，所述方法包括：步骤1、取野蔷薇组织研磨成粉末，向粉末中加入高氯酸，涡旋混合后，冰浴浸提；步骤2、冰浴浸提后离心取200～400μL上清液作为冰浴浸提液，加入4μL苯甲酰氯、300μL 2mol/L NaOH，涡旋混合后，30～40℃水浴反应；步骤3、反应结束后，加入饱和NaCl和乙醚，涡旋混合后，离心取上清，开盖离心使乙醚挥发完全，再加入甲醇，涡旋混合后，静置溶解；步骤4、静置溶解完全后离心除杂，收集溶解液，定容后进行高效液相色谱检测，并根据多胺的标准曲线计算得到待测野蔷薇组织中的多胺含量。2.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤2中，冰浴浸提后离心取300μL上清液作为冰浴浸提液。3.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤2中，于37℃条件下进行水浴反应。4.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤4中，所述高效液相色谱检测的参数包括：流动相为体积比60:40的甲醇：水；进样量15μL；流速1mL/min；检测波长254nm；柱温30℃；保留时间15min。5.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈锐，程文翰，陈金萍，马道铖，
申请(专利权)人：荆楚理工学院，
类型：发明
国别省市：