【技术实现步骤摘要】
生物样品中小分子物质检测的前处理试剂
[0001]本专利技术涉及分析检测
，尤其涉及生物样品中小分子物质检测的 前处理试剂。
技术介绍
[0002]生物样品通常是指植物的花、叶、茎、根、种子等，动物(包括人)的体 液(如尿、血、唾液、胆汁、胃液、淋巴液及生物体的其他分泌液等)、毛发、 肌肉和一些组织器官(如胸腺、胰腺、肝、肺、脑、胃、肾等)以及各种微生 物。由于生物样品的组成复杂，易对后续分析检测产生干扰，因此需要在分 析检测前进行样品前处理。
[0003]生物样品前处理，也称为样品制备、样品净化、样品提取，是生物分析 过程中的重要组成部分。对于临床检验用途的液相色谱串联质谱(LC
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MS/MS) 方法而言，样品分析检测之前对生物样品进行处理是十分必要的。样品前处 理的主要目的是从样品基质中将一个或多个目标分析物与其他组分分离。生 物样品前处理是LC
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MS/MS方法开发和优化极为关键的一环，因为样品前处理 是高通量检测的制约瓶颈以及分析误差的主要来源。LC
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【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.生物样品中小分子物质检测的前处理试剂，其包括：磁珠悬液、活化液、重悬液、清洗液和洗脱液；所述磁珠悬液中磁珠为表面修饰十八烷基的磁珠；所述活化液为三氯乙酸的水溶液；所述洗脱液为甲酸、甲醇和水的混合液；所述重悬液为水，所述清洗液为水。2.根据权利要求1所述的前处理试剂，其特征在于，所述磁珠悬液中溶液为纯化水，其中磁珠的密度为10mg/mL。3.根据权利要求1所述的前处理试剂，其特征在于，所述活化液中三氯乙酸的体积分数为0.1％。4.根据权利要求1所述的前处理试剂，其特征在于，所述洗脱液中，甲酸、甲醇和水的体积比为0.1:90:10。5.根据权利要求1～4任一项所述的前处理试剂，其特征在于，其中还包括解离剂，所述解离剂中包括：1.5g/L十二烷基磺酸钠、100g/L二甲基亚砜、50g/L乙醇、0.05M/L Tris
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HCl。6.根据权利要求1～4任一项所述的前处理试剂，其特征在于，其中还包括内标溶液，所述内标溶液为小分子物质的溶液，所述小分子物质包括泊沙康唑、25
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羟基维生素D2、25
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羟基维生素D3、维生素A、维生素E和/或免疫抑制剂；所述免疫抑制剂为他克莫司、西罗莫司、依维莫司、环孢霉素A、子囊霉素、西罗莫司
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d3、依维莫司
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d4和/或环孢霉素A
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d
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。7.生物样品中小分子物质检测的前处理方法，其特征在于，以权利要求1～6任一项所述的前处理试剂对生物样品进行处理。8.根据权利要求7所述的前处理方法，其特征在于，所述生物样品为血液；所述小分子物质为泊沙康唑、25
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羟基维生素D2、25
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羟基维生素D3、维生素A、维生素E和/或免疫抑制剂；所述免疫抑制剂为他克莫司、西罗莫司、依维莫司、环孢霉素A、子囊霉素、西罗莫司
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d3、依维莫司
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d4和/或环孢霉素A
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d
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。9.根据权利要求8所述的前处理方法，其特征在于，包括：将所述磁珠以所述活化液活化后，以超纯水重悬，得到磁珠工作液；将血液与所述磁珠工作液混合，孵育后分离磁珠；磁珠经超纯水清洗后，以洗脱液洗脱，然后取上清液；所述磁珠工作液中.0.，磁珠的密度为10mg/mL；所述血液与磁珠工作液的体积比为(10～100):100；所述孵育为室温孵育2～5min；所述磁珠与洗脱液的质量
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体积比为1mg:100μL。10.根据权利要求9所述的前处理方法，其特征在于，还包括血液与磁珠混合前，将血液以所述解析剂进行解析；所述血液与解析剂的体积比为1:2；所述解析的条件为37℃，30min。11.一种血液中小分子物质的检测方法，其特征在于，包括：以权利要求6～9任一项所述的前处理方法对血液进行处理后，以LC
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MS/MS的液相色谱
进行检测。12.根据权利要求11所述的检测方法，其特征在于，所述小分子物质为泊沙康唑：所述LC
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MS/MS的液相色谱的条件包括：色谱柱为C18柱，柱温为50℃，流动相流速为0.4mL/min；流动相A为含2mM乙酸铵、0.1wt％甲酸的水溶液；流动相B为含2mM乙酸铵、0.1wt％甲酸的甲醇溶液；洗脱程序包括：0～1.2min，流动相A的体积分数由95％至10％，1.2～2.0min，流动相A的体积分数为10％，2.0～2.1min，流动相A的体积分数由10％至95％，2.1～3.0min，流动相A的体积分数为95％；所述LC<...
【专利技术属性】
技术研发人员：耿瑞，蔡克亚，刘亚娟，赵高岭，张学东，孙江彦，高培丽，李宾宾，申业明，
申请(专利权)人：郑州安图生物工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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