一种含有苦木内酯类成分的鸦胆子药渣有效部位的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种含有苦木内酯类成分的鸦胆子药渣有效部位的制备方法。本发明专利技术制备得到的鸦胆子药渣有效部位，含有50％以上的苦木内酯类成分，其具有确切的抗腹水瘤、胰腺癌、肺癌、三阴性乳腺癌、结直肠癌等作用。其对胰腺癌、非小细胞肺癌、结肠癌细胞等多种肿瘤细胞具有抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡的功效；可显著降低肿瘤细胞的活性，促进肿瘤细胞凋亡，提高细胞凋亡率；能延长腹水瘤小鼠的生存时间，能够不同程度抑制小鼠体重和腹围增加，降低腹水体积和腹水细胞活力，提高细胞凋亡率；具有较强的抗乳腺癌活性，且在非靶向器官中没有发现明显的毒性，包括小肠、肝脏、肾脏。可用于制备抗肿瘤的药物，为抗肿瘤的治疗提供新的选择。提供新的选择。提供新的选择。

【技术实现步骤摘要】
一种含有苦木内酯类成分的鸦胆子药渣有效部位的制备方法


[0001]本专利技术涉及药渣有效部位
，具体地，涉及一种含有苦木内酯类成分的鸦胆子 药渣有效部位的制备方法。

技术介绍

[0002]目前，肿瘤已成为世界上继心血管疾病的第二大死因，患者人数在逐年增加。当前肿 瘤治疗方法主要包括手术、放疗、化疗和靶向药物治疗等。常规手术切除难以将肿瘤细胞 切除干净，因此容易出现术后复发；放疗和化疗在杀死肿瘤细胞的同时也会杀死正常细胞， 对患者造成较大伤害；靶向药物治疗虽然能减轻药物的不良反应，但易产生肿瘤耐药性从 而导致肿瘤复发。中医药在肿瘤治疗方面有较好的优势，近年来也取得了较多成果。在中 医药治疗肿瘤的研究中，寻找对肿瘤治疗具有良好治疗作用的中药，探明其作用机制，对 于发现抗肿瘤的新型治疗药物具有重要意义。
[0003]鸦胆子为苦木科植物鸦胆子Brueea javanica(L.)Merr.的干燥成熟果实，始载于《本 草纲目拾遗》，是我国民间传统常用中药，又名老鸦胆、鸦胆、苦参子等。2020年药典 记录，鸦胆子性味苦寒，有小毒，归大肠经、肝经，具有清热解毒、截疟、止痢、腐蚀赘 疣等功效，主治痢疾、症疾，外治用于赘疣、鸡眼。现代科学研究发现鸦胆子具有抗肿瘤 作用。
[0004]鸦胆子药渣是鸦胆子提取鸦胆子油后的药渣，鸦胆子药渣成分复杂，前期研究发现其 主要含有苦木内酯类化合物，还含有甾体类、生物碱类、黄酮类、苯丙素类等化合物。根 据文献报道，苦木内酯类化合物是鸦胆子属植物中发挥抗癌作用的主要成分。鸦胆子药渣 的抗肿瘤活性主要体现在抑制肿瘤细胞DNA合成、诱导细胞凋亡和分化、耐药逆转机制。 中国专利CN201210439561.2公开了一种从鸦胆子中提取纯化鸦胆子素D的制备方法；中 国专利CN201010120162.0公开了一种鸦胆子总萜提取物及其制备方法和用途；中国专利 CN202010234484.1公开了鸦胆子提取物及其制备方法和在防治乳腺癌方面的应用。但是， 目前尚无一种简单有效利用鸦胆子药渣的方法。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是为了克服现有技术的上述不足，提供一种含有苦木内酯类成分的鸦胆 子药渣有效部位的制备方法。
[0006]本专利技术的第一个目的是提供一种含有苦木内酯类成分的鸦胆子药渣有效部位的制备 方法。
[0007]本专利技术的第二个目的是提供任一所述的制备方法得到的含有苦木内酯类成分的鸦胆 子药渣有效部位。
[0008]本专利技术的第三个目的是提供所述的鸦胆子药渣有效部位在制备治疗癌症的药物中的 应用。
[0009]为了实现上述目的，本专利技术是通过以下方案予以实现的：
[0010]一种含有苦木内酯类成分的鸦胆子药渣有效部位的制备方法，包括以下步骤：
效部位，含有50％以上的苦木内酯类成分，其具有确切的抗腹水瘤、胰腺癌、肺癌、三阴 性乳腺癌、结直肠癌等作用。其对胰腺癌细胞系、非小细胞肺癌、结肠癌细胞等多种肿瘤 细胞具有抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡的功效。体外药理实验结果证明鸦胆子药 渣有效部位可显著降低肿瘤细胞的活性，促进肿瘤细胞凋亡，提高细胞凋亡率。体内动物 药理实验结果证明鸦胆子药渣有效部位能延长腹水瘤小鼠的生存时间，能够不同程度抑制 小鼠体重和腹围增加，降低腹水体积和腹水细胞活力，提高细胞凋亡率。具有较强的抗乳 腺癌活性，且在非靶向器官中没有发现明显的毒性，包括小肠、肝脏、肾脏；顺铂和鸦胆 子药渣有效部位的联合用药对CRC细胞具有协同抗肿瘤作用。本专利技术制备得到的鸦胆子 药渣有效部位可用于制备抗肿瘤的药物，为抗肿瘤的治疗提供新的选择。
附图说明
[0039]图1为鸦胆子药渣有效部位及化合物1(鸦胆子苦醇)的液相色谱图。
[0040]图2为实施例1制备得到的鸦胆子药渣有效部位对腹水瘤小鼠的体重(A)和腹围(B) 变化(Mean
±
SD,n＝8)；##：与正常组比较，P<0.01；*：与模型组比较，P<0.05；**： 与模型组比较，P<0.01
[0041]图3为实施例1制备得到的鸦胆子药渣有效部位对腹水瘤小鼠的腹水体积(A)和腹水 细胞活性(B)(Mean
±
SD,n＝8)；*：与模型组比较，P<0.05；**：与模型组比较，P<0.01
[0042]图4为实施例1制备得到的鸦胆子药渣有效部位对腹水瘤小鼠的腹水细胞凋亡情况(A) 和细胞凋亡率(B)(Mean
±
SD,n＝3)；*：与模型组比较，P<0.05；**：与模型组比较， P<0.01
[0043]图5为实施例1制备得到的鸦胆子药渣有效部位对腹水瘤小鼠的腹水细胞中 miRNA
‑
29b表达情况(Mean
±
SD,n＝6)；**：与模型组比较，P<0.01
[0044]图6为实施例1制备得到的鸦胆子药渣有效部位对腹水瘤小鼠的腹水细胞p53蛋白表 达情况(Mean
±
SD,n＝3)；*：与模型组比较，P<0.05；**：与模型组比较，P<0.01
[0045]图7为实施例1制备得到的鸦胆子药渣有效部位对腹水瘤小鼠的腹水细胞Bax，Bcl
‑
2， Bad蛋白表达情况(Mean
±
SD,n＝3)；*：与模型组比较，P<0.05；**：与模型组比较， P<0.01
[0046]图8为实施例1制备得到的鸦胆子药渣有效部位对腹水瘤小鼠的腹水细胞Cytochrome C，Caspase
‑
9(cleaved)，Caspase
‑
3(cleaved)蛋白表达情况(Mean
±
SD,n＝3)；*：与 模型组比较，P<0.05；**：与模型组比较，P<0.01
[0047]图9为实施例1制备得到的鸦胆子药渣有效部位对腹水瘤小鼠的腹水细胞PARP， PARP(cleaved)蛋白表达情况(Mean
±
SD,n＝3)。*：与模型组比较，P<0.05；**：与 模型组比较，P<0.01。
具体实施方式
[0048]下面结合说明书附图及具体实施例对本专利技术作出进一步地详细阐述，所述实施例只用 于解释本专利技术，并非用于限定本专利技术的范围。下述实施例中所使用的试验方法如无特殊说 明，均为常规方法；所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，为可从商业途径得到的试剂 和材料。
[0049]实施例1鸦胆子药渣有效部位的提取
[0050]一、材料
[0051]鸦胆子药渣来自于广州白云山明兴制药有限公司，由广州中医药大学苏子仁教授鉴定 为鸦胆子(Brucea javanica)，凭证样本保存于广州中医药本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种含有苦木内酯类成分的鸦胆子药渣有效部位的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.鸦胆子药渣加乙醇溶液回流浸提，得到提取液；S2.固液分离取液体，去除乙醇，得到总粗提取物；；S3.总粗提取物加水充分溶解混悬，依次是用石油醚和乙酸乙酯进行萃取得石油醚部位和乙酸乙酯部位；S4.乙酸乙酯部位去除溶剂即得目标初级产物；S5.用MCI柱层析对目标初级产物进行纯化。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S1中，乙醇溶液的浓度为60～95％(V/V)。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S1中，乙醇溶液与鸦胆子药渣的用量比为(3～5)：1(mL：g)。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S1中，乙醇提取2～3次，每次1～2小时。5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈红英，潘碧妍，周小琴，谢友良，欧阳冬生，李同根，苏子仁，
申请(专利权)人：广州白云山明兴制药有限公司，
类型：发明
国别省市：