一种基于标准品的QPCR激发光强自动调整方法和系统技术方案

本发明专利技术公开了一种基于标准品的QPCR激发光强自动调整方法和系统，方法包括:S1、将装有标准荧光染料的QPCR管放入反应仓并设定目标荧光值及浮动范围；S2、测量多组设定的光源强度对应的荧光值，并建立关系函数；S3、根据关系函数计算出目标荧光值对应的目标测算光源强度值；S4、测量目标测算光源强度值对应的实际荧光值；S5，判断实际荧光值是否在目标荧光值的浮动范围内；若是，S6，将实际荧光值保存并结束调试，若否，S7，对实际荧光值减去调整数值作为调整后数值并转S5，其中，调整数值为实际荧光值向最接近目标荧光值的浮动范围变化的增量且增量的绝对值小于实际荧光值与目标荧光值的浮动范围最接近的数值的差值。实现自动调整，提高使用效率。提高使用效率。提高使用效率。

【技术实现步骤摘要】
一种基于标准品的QPCR激发光强自动调整方法和系统


[0001]本专利技术涉及QPCR
，尤其是一种基于标准品的QPCR激发光强自动调整方法和系统。

技术介绍

[0002]qpcr的英文全名是real
‑
time quantitative pcr detecting system，即实时荧光定量核酸扩增检测系统，也叫实时定量基因扩增荧光检测系统，简称qpcr，是指在pcr反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个pcr进程，使每一个循环变得“可见”，最后通过ct值和标准曲线对样品中的dna(或cdna)的起始浓度进行定量的方法。与传统的pcr相比，qpcr能实现准确定量。
[0003]qpcr的基本原理是：扩增呈指数增长，在反应体系和条件完全一致的情况下，样本dna含量与扩增产物的对数成正比。由于反应体系中的荧光染料或荧光标记物与扩增产物结合发光，其荧光量与扩增产物成正比。随着反应荧光信号强度不断增加，每经过一个循环，收集一次荧光强度信号，经过一定的循环后，得到一条荧光扩增曲线图。
[0004]目前市场上的qpcr产品其激发光源部分通常使用led或卤钨灯等，在qpcr产品批量生产时，由于光源LED或卤素灯存在的批间差以及使用过程中的损耗，导致每台qpcr产品的激发光源强度存在差异。为控制qpcr产品的批间差及补偿仪器使用过程中的损耗，需要对其进行光强调节，使qpcr产品的激发光强在一个统一的范围内。
[0005]现有技术中qpcr产品的激发光源一般采用恒流源驱动，电流的大小决定光源强度的强弱，而电流的调节经常用PWM或采样电阻控制，PWM控制是通过调整PWM的占空比或频率来控制电流的大小，采样电阻控制是通过调整采样电阻的阻值来调节反馈电压，进而控制电流的大小。
[0006]现有的qpcr产品在进行光强调整时，首先将装有标准的荧光物质的PCR管放入反应仓中，用光源进行激发后测量其荧光，然后根据荧光大小来调整PWM的占空比或频率、采样电阻来调整光源强度。在具体操作时经常根据经验数据进行光强调整，由于光源本身之间的差异、光强与激发电流之间的非线性、光强与荧光强度之间的非线性以及光源在使用一段时间后损耗增加导致调试繁琐，需要多次重复操作。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的是提供了一种基于标准品的QPCR激发光强自动调整方法和系统，实现自动调整，提高了使用效率。
[0008]为解决上述技术问题，本专利技术提供了一种基于标准品的QPCR激发光强自动调整方法，包括:
[0009]S1、将装有标准荧光染料的QPCR管放入反应仓并设定目标荧光值及所述目标荧光值的浮动范围；
[0010]S2、测量多组设定的光源强度对应的荧光值，并建立光源强度与对应荧光值之间
的光源荧光关系函数；
[0011]S3、根据所述光源荧光关系函数计算出所述目标荧光值对应的目标测算光源强度值；
[0012]S4、测量所述目标测算光源强度值对应的实际荧光值；
[0013]S5，判断所述实际荧光值是否在所述目标荧光值的浮动范围内；
[0014]若是，S6，将所述实际荧光值保存并结束调试，若否，S7，对所述实际荧光值减去调整数值作为调整后数值并转所述S5，其中，所述调整数值为所述实际荧光值向最接近所述目标荧光值的浮动范围变化的增量且所述增量的绝对值小于所述实际荧光值与所述目标荧光值的浮动范围最接近的数值的差值。
[0015]其中，在所述S2之前，还包括：
[0016]按照预定梯度输入电流，并获得所述光源的光源强度值，并拟合出所述光源的关于光源强度与驱动电流的关系函数。
[0017]其中，所述S2包括根据测量多组在设定光源强度对应的荧光值，计算获得荧光值与光源强度之间的线性关系函数，或计算获得荧光值与光源强度之间的多项式关系函数。
[0018]其中，所述S7包括：
[0019]所述调整数值至少包括第一调整数值、第二调整数值，所述第一调整数值的绝对值大于所述第二调整数值的绝对值，所述第一调整数值为对所述实际荧光值第一次调整的数值，所述第二调整数值为对所述实际荧光值的调整次数大于等于2时采用的调整数值。
[0020]其中，所述S7还包括：
[0021]对所述调整数值进行输入设定或修改。
[0022]除此之外，本专利技术实施例还提供了一种基于标准品的QPCR激发光强自动调整系统，包括：
[0023]目标荧光设定模块，用于在将装有标准荧光染料的QPCR管放入反应仓并设定目标荧光值及所述目标荧光值的浮动范围；
[0024]关系函数生成模块，用于在测量多组设定的光源强度对应的荧光值，并建立光源强度与对应荧光值之间的光源荧光关系函数；
[0025]光源强度回估模块，根据所述光源荧光关系函数计算出所述目标荧光值对应的目标测算光源强度值；
[0026]估算测量模块，用于测量所述目标测算光源强度值对应的实际荧光值；
[0027]判断调整模块，用于在判定所述实际荧光值在所述目标荧光值的浮动范围内后，将所述实际荧光值保存并结束调试，若否，对所述实际荧光值减去调整数值作为调整后数值后重新判断，其中，所述调整数值为所述实际荧光值向最接近所述目标荧光值的浮动范围变化的增量且所述增量的绝对值小于所述实际荧光值与所述目标荧光值的浮动范围最接近的数值的差值。
[0028]其中，还包括与所述关系函数生成模块连接的电流光强函数单元，用于按照预定梯度输入电流，并获得所述光源的光源强度值，并拟合出所述光源的关于光源强度与驱动电流的关系函数。
[0029]其中，还包括与所述判断调整模块连接的数值设定模块，用于设定第一次或多次调整的调整数值。
[0030]本专利技术实施例提供的基于标准品的QPCR激发光强自动调整方法和系统与现有技术相比较，具有以下优点：
[0031]本专利技术实施例提供的所述基于标准品的QPCR激发光强自动调整方法和系统，在将装有标准荧光染料的QPCR管放入反应仓并设定目标荧光值及所述目标荧光值的浮动范围之后，测量多组设定的光源强度对应的荧光值，并建立光源强度与对应荧光值之间的光源荧光关系函数；根据所述光源荧光关系函数计算出所述目标荧光值对应的目标测算光源强度值；与实际测量所述目标测算光源强度值对应的实际荧光值比较，判断是否在所述目标荧光值的浮动范围内；若是，说明书获得的关系式较准确，可以直接使用，将所述实际荧光值保存并结束调试，若否，需要进行调整，对所述实际荧光值减去调整数值作为调整后数值并重新进行判断，其中，所述调整数值为所述实际荧光值向最接近所述目标荧光值的浮动范围变化的增量且所述增量的绝对值小于所述实际荧光值与所述目标荧光值的浮动范围最接近的数值的差值。采用这种方式可以实现自动调整，提高了调整效率，以及使用效率。无需进行人工重复操作。
附图说明
[0032]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于标准品的QPCR激发光强自动调整方法，其特征在于，包括:S1、将装有标准荧光染料的QPCR管放入反应仓并设定目标荧光值及所述目标荧光值的浮动范围；S2、测量多组设定的光源强度对应的荧光值，并建立光源强度与对应荧光值之间的光源荧光关系函数；S3、根据所述光源荧光关系函数计算出所述目标荧光值对应的目标测算光源强度值；S4、测量所述目标测算光源强度值对应的实际荧光值；S5，判断所述实际荧光值是否在所述目标荧光值的浮动范围内；若是，S6，将所述实际荧光值保存并结束调试，若否，S7，对所述实际荧光值减去调整数值作为调整后数值并转所述S5，其中，所述调整数值为所述实际荧光值向最接近所述目标荧光值的浮动范围变化的增量且所述增量的绝对值小于所述实际荧光值与所述目标荧光值的浮动范围最接近的数值的差值。2.如权利要求1所述基于标准品的QPCR激发光强自动调整方法，其特征在于，在所述S2之前，还包括：按照预定梯度输入电流，并获得所述光源的光源强度值，并拟合出所述光源的关于光源强度与驱动电流的关系函数。3.权利要求2述基于标准品的QPCR激发光强自动调整方法，其特征在于，所述S2包括根据测量多组在设定光源强度对应的荧光值，计算获得荧光值与光源强度之间的线性关系函数，或计算获得荧光值与光源强度之间的多项式关系函数。4.权利要求3述基于标准品的QPCR激发光强自动调整方法，其特征在于，所述S7包括：所述调整数值至少包括第一调整数值、第二调整数值，所述第一调整数值的绝对值大于所述第二调整数值的绝对值，所述第一调整数值为对所述实际荧光值第一次调整的数值，所...

【专利技术属性】
技术研发人员：王聪，赵俊虎，王超，李涛，刘聪，魏文娟，
申请(专利权)人：安图实验仪器郑州有限公司，
类型：发明
国别省市：