通过使亚硝酸盐或固态酸性试剂浸渗于亲水性原材料而能够控制样本展开的用于提取并测定糖链抗原的免疫层析试验片制造技术

本发明专利技术的目的在于提供用于控制免疫层析试验片上的样本的展开，适当控制基于酸性试剂、亚硝酸盐和中和试剂的处理的免疫层析试验片及使用该试验片的免疫层析方法。一种免疫层析试验片，其特征在于，用于提取样本中的糖链抗原而进行测定，包含：用于添加与亚硝酸盐或酸性溶液混合而得的样本的样品垫、包含标识了对于糖链抗原的抗体的标识抗体的标识体区域以及将对于所述糖链抗原的抗体进行了固相化的检测区域，在检测区域形成抗体

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】通过使亚硝酸盐或固态酸性试剂浸渗于亲水性原材料而能够控制样本展开的用于提取并测定糖链抗原的免疫层析试验片


[0001]本专利技术涉及能够在免疫层析试验片上进行糖链抗原的亚硝酸提取处理的用于提取并测定糖链抗原的免疫层析试验片。

技术介绍

[0002]以免疫层析法为原理的快速诊断药的大部分作为快速、简便地测定病毒或细菌感染症、确定治疗方针的一个手段而广泛使用。
[0003]一般的以免疫层析法为原理的快速诊断药是使样本悬浮于样本悬浮液后，通过将该悬浮液供给至免疫层析试验片，能够快速、简便地进行测定。
[0004]为了检测A群β溶血性链球菌(A群β溶连菌)、口腔内链球菌等属于链球菌属的微生物，有必要提取糖链抗原，并测定糖链抗原。
[0005]例如，报告了通过预先使亚硝酸钠和中和试剂包含于免疫层析试验片，仅通过将样本悬浮于乙酸等酸性溶液而供给至免疫层析试验片的操作，即可在免疫层析试验片上进行亚硝酸提取处理的方法(专利文献1)。
[0006]另外，还有预先使酸性试剂和中和试剂包含于免疫层析试验片，将样本悬浮于亚硝酸盐而供给至免疫层析试验片的方法。
[0007]进而，报告了在免疫层析试验片上有效地进行糖链抗原的亚硝酸提取处理的方法(专利文献2～4)。
[0008]但是，在使用在设备上提取的机构时，为了达成作为目标的性能，需要在设备上保证一定的提取时间。
[0009]现有技术文献
[0010]专利文献
[0011]专利文献1：国际公开WO2005/121794号公报
[0012]专利文献2：日本特开2018
‑
151329号公报
[0013]专利文献3：日本特开2018
‑
151330号公报
[0014]专利文献4：日本特开2018
‑
151331号公报

技术实现思路

[0015]专利技术要解决的技术问题
[0016]现在市售的以免疫层析法为原理的A群β溶连菌(Strep A)抗原检测试剂大部分采用使将亚硝酸盐溶液(R1)和酸溶液(R2)混合而产生的酸性亚硝酸通过免疫层析法用检测试剂(试验片)上的干燥状态的中和剂(R3)中和而反应的技术，但也已知通过将R1或者R2涂布于垫，省略了R1和R2的必需制备及提取工序的一步骤化的技术。在一步骤的A群β溶连菌抗原检测试剂中，在测试设备上进行提取工序，因此在样品滴下后，必须保证一定的提取时间。但是，为了实现一步骤化，还没有能够解决反应时间和性能(灵敏度/特异性)这两者的
手段。
[0017]本专利技术的目的在于，提供用于控制样本在免疫层析试验片上的展开，适当控制基于酸性试剂、亚硝酸盐和中和试剂的处理的免疫层析试验片及使用该试验片的免疫层析方法。
[0018]用于解决技术问题的技术方案
[0019]本专利技术的专利技术人等对控制样本在免疫层析试验片上的展开，适当控制基于酸性试剂、亚硝酸盐和中和试剂的处理的方法进行了深入研究。
[0020]其结果发现，通过用于浸渗固态酸性试剂或亚硝酸盐的材料使用具有亲水性的材料，从而使反应时间和灵敏度提高。
[0021]还发现，通过使用厚度是0.2mm～1.0mm的原材料，且使用克重是30g/m2～131g/m2的原材料，从而使反应时间和灵敏度提高。
[0022]即，本专利技术如下。
[0023][1]一种免疫层析试验片，其特征在于，用于提取样本中的糖链抗原并进行测定，包含：样品垫，用于添加与亚硝酸盐或酸性溶液混合而得的样本；标识体区域，包含标识了对于糖链抗原的抗体的标识抗体；以及，检测区域，将对于所述糖链抗原的抗体进行了固相化，在检测区域形成抗体
‑
糖链抗原
‑
标识抗体的复合体，并测定糖链抗原，在所述标识体区域的上游具有浸渗有中和试剂的区域，进而在浸渗有该中和试剂的区域的上游，在使用与亚硝酸盐混合而得的样本时具有浸渗有固态酸性试剂的区域，在使用与酸性溶液混合而成的样本时具有使亚硝酸盐浸渗的区域，
[0024]在浸渗有亚硝酸盐或固态酸性试剂的区域使用具有亲水性的原材料。
[0025][2]根据[1]所述的免疫层析试验片，浸渗有亚硝酸盐或固态酸性试剂的具有亲水性的原材料是克重是30g/m2～131g/m2，且厚度是0.2mm～1.0mm。
[0026][3]根据[1]或[2]所述的免疫层析试验片，浸渗有亚硝酸盐或固态酸性试剂的具有亲水性的原材料从由玻璃纤维、滤纸、无纺布及它们中的任两种以上的混合物组成的组选择。
[0027][4]根据[1]～[3]的任一者所述的免疫层析试验片，在样品垫上存在浸渗有固态酸性试剂或者亚硝酸盐的区域。
[0028][5]根据[1]～[4]中任一者所述的免疫层析试验片，固态酸性试剂从由丙二酸、苹果酸、马来酸、柠檬酸及酒石酸组成的组选择。
[0029][6]根据[1]～[5]中任一者所述的免疫层析试验片，中和试剂是三羟甲基氨基甲烷或氢氧化钠。
[0030][7]根据[1]～[6]中任一者所述的免疫层析试验片，糖链抗原是原生动物、真菌、细菌、支原体、立克次体、衣原体或病毒的糖链抗原。
[0031][8]一种免疫层析试验试剂盒，包含[1]～[7]中任一者所述的免疫层析试验片和亚硝酸盐溶液或者酸性溶液。
[0032][9]一种测定样本中的糖链抗原的方法，使用[1]～[7]中任一者所述的免疫层析试验片通过免疫层析法测定样本中的糖链抗原，
[0033]所述测定样本中的糖链抗原的方法包括：在免疫层析试验片具有浸渗有固态酸性试剂的区域时将样本与亚硝酸溶液混合，在免疫层析试验片具有浸渗有亚硝酸盐的区域时
使样本与酸性溶液混合，并添加至所述免疫层析试验片的样品垫，
[0034]在浸渗有固态酸性试剂的区域或浸渗有亚硝酸盐的区域，通过由亚硝酸盐与固态酸性试剂的反应产生的亚硝酸的作用从样本提取出糖链抗原，
[0035]在浸渗有中和试剂的区域，包含所述糖链抗原的酸性溶液被中和，
[0036]在检测区域，形成抗体
‑
糖链抗原
‑
标识抗体的复合体，所述测定样本中的糖链抗原的方法通过免疫层析法控制样本在免疫层析试验片上的展开速度和/或展开方向，控制基于酸性试剂、亚硝酸盐和中和试剂的处理，并测定样本中的糖链抗原。
[0037]本说明书包括作为本申请的优先权基础的日本专利申请号2019
‑
012835号的公开内容。
[0038]专利技术効果
[0039]在一步骤的A群β溶连菌抗原检测试剂中，作为浸渗亚硝酸盐或固态的酸性试剂的原材料，通过考虑原材料的厚度、克重、吸水性来选择，能够将基于固态酸性试剂和亚硝酸盐的处理所需的时间调节为最适的时间。作为结果，提供能够发挥目标的性能(线显色时间早，灵敏度高)的免疫层析试验片。
附图说明
[0040]图1是示意性示出具有固态酸性试剂本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种免疫层析试验片，其特征在于，用于提取样本中的糖链抗原并进行测定，该免疫色谱试验片包含：样品垫，用于添加与亚硝酸盐或酸性溶液混合而得的样本；标识体区域，包含标识了对于糖链抗原的抗体的标识抗体；以及，检测区域，将对于所述糖链抗原的抗体进行了固相化，在检测区域形成抗体
‑
糖链抗原
‑
标识抗体的复合体，并测定糖链抗原，在所述标识体区域的上游具有浸渗有中和试剂的区域，进而在浸渗有该中和试剂的区域的上游，在使用与亚硝酸盐混合而得的样本时具有浸渗有固态酸性试剂的区域，在使用与酸性溶液混合而成的样本时具有使亚硝酸盐浸渗的区域，在浸渗有亚硝酸盐或固态酸性试剂的区域使用具有亲水性的原材料。2.根据权利要求1所述的免疫层析试验片，其中，浸渗有亚硝酸盐或固态酸性试剂的具有亲水性的原材料的克重是30g/m2～131g/m2，且厚度是0.2mm～1.0mm。3.根据权利要求1或2所述的免疫层析试验片，其中，浸渗有亚硝酸盐或固态酸性试剂的具有亲水性的原材料从由玻璃纤维、滤纸、无纺布及它们中的任两种以上的混合物组成的组中选择。4.根据权利要求1至3中任一项所述的免疫层析试验片，其中，在样品垫上存在浸渗有固态酸性试剂或者亚硝酸盐的区域。5.根据权利要求1至4中任一项所述的免疫层析试验片，其中，固态酸性试剂从由丙二酸、苹果...

【专利技术属性】
技术研发人员：加藤大介，村松志野，
申请(专利权)人：电化株式会社，
类型：发明
国别省市：