一种病毒保存液配方及其制作方法组成比例

本发明专利技术公开了一种病毒保存液配方及其制作方法，包括以下组分及各组分的重量数为：基础保存液：100ml；缓冲液：柠檬酸0.45

【技术实现步骤摘要】
一种病毒保存液配方及其制作方法


[0001]本专利技术涉及病毒保存液制作
，具体涉及一种病毒保存液配方及其制作方法。

技术介绍

[0002]呼吸道感染是人类最常见的一类感染性疾病，是全球范围内引起人群发病和死亡的最主要原因之一。呼吸道感染引起的临床症状和体征都较为相似，其临床表现主要为咳嗽、咳痰、发热、胸痛等症状，严重的可引起气管炎、支气管炎及肺炎等。不同病原体引起的感染，传染性、致病性严重程度不一样，其治疗方法、疗效和病程也不尽相同，需要通过病原体检测进行鉴别诊断。
[0003]呼吸道感染疾病中以呼吸道病毒引起的病原体感染最常见，检测呼吸道病毒的方法有病毒分离培养、酶联免疫吸附法、免疫荧光法、PCR检测等，其中PCR检测灵敏度和特异性高、用时较短，成为临床常用检测方法。
[0004]目前，呼吸道样本多采用咽拭子、鼻拭子、痰液和肺泡灌洗液，临床上多采用咽拭子、鼻拭子，采样对患者无创伤、无痛苦，方便快捷，拭子采集完后需放入病毒保存液中进行保存，再运送至实验室对样本进行各种处理和检测；而病毒本身是一种结构简单的微生物，必须寄生在活细胞内，病毒保存液需要保护病毒完整性，降低病毒降解率，否则易造成检测假阴性；普通的基础保存液，如Hank
’
s液，虽可以保存细胞从而保护病毒完整性，但无法抵御细菌真菌生长，容易造成污染，无法长期保存，影响病毒提取率和检测；另一方面，呼吸道感染常在秋冬季发生，而我国大部分地区在秋冬季气温降低，尤其北方会达到零下几十度，现有的病毒保存液在此环境下容易被冻成固体状态，影响临床医务人员采样；由此有必要对现有病毒保存液进行改进，以解决上述问题。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是解决普通的基础保存液，如Hank
’
s液，虽可以保存细胞从而保护病毒完整性，但无法抵御细菌真菌生长，容易造成污染，无法长期保存，影响病毒提取率和检测；另一方面，呼吸道感染常在秋冬季发生，而我国大部分地区在秋冬季气温降低，尤其北方会达到零下几十度，现有的病毒保存液配方在此环境下容易被冻成固体状态，影响临床医务人员采样的问题；本专利技术的病毒保存液配方及其制作方法，实现了保存液安全无毒，可在低温下保持液体状态，方便采样。
[0006]为了达到上述目的，本专利技术所采用的技术方案是：一种病毒保存液配方，包括以下组分及各组分的重量数为：基础保存液：100ml；缓冲液：柠檬酸0.45
‑
12.85g，4
‑
羟乙基哌嗪乙磺酸2.6
‑
36.5g；BSA：0.2
‑
5.0g；氨基酸：0.28
‑
2.95g；
抗生素：包括但不限于青霉素、万古霉素、庆大霉素、多粘菌素、二性霉素和制霉菌素，其中青霉素0.01
‑
0.12g、万古霉素0.50
‑
2.82g、庆大霉素0.55
‑
1.50g、多粘菌素B 0.01
‑
0.10g、二性霉素0.10
‑
2.95g和制霉菌素0.10
‑
0.70g；酸碱指示剂：0.01
‑
0.66g；防冻剂：1.0
‑
10.0ml。
[0007]前述的病毒保存液配方，所述基础保存液包括但不限于氯化钠、氯化钾、氯化钙、氯化镁、硫酸镁、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾和葡萄糖，其中氯化钠0.5
‑
15.6g、氯化钾0.5
‑
5.5g、氯化钙0.15
‑
3.6g、氯化镁0.1
‑
2.4g、硫酸镁0.1
‑
2.8g、磷酸氢二钠0.3
‑
7.0g、磷酸二氢钾0.1
‑
6.3g和葡萄糖1.0
‑
10.0g。
[0008]前述的病毒保存液配方，所述氨基酸采用的是L
‑
谷氨酸。
[0009]前述的病毒保存液配方，所述酸碱指示剂采用的是酚红。
[0010]前述的病毒保存液配方，所述防冻剂为丙三醇、二甲亚矾和聚乙烯吡咯烷酮中的一种或几种组合。
[0011]前述的病毒保存液配方，包括以下组分及各组分的重量数为：氯化钠7.6g、氯化钾3.5g、氯化钙1.8g、氯化镁1.3g、硫酸镁2.1g、磷酸氢二钠3.2g、磷酸二氢钾4.5g和葡萄糖6.3g；柠檬酸5.75g，4
‑
羟乙基哌嗪乙磺酸22.3g；BSA2.8g；L
‑
谷氨酸1.92g；青霉素0.07g、万古霉素1.73g、庆大霉素0.85g、多粘菌素B 0.06g、二性霉素2.14g和制霉菌素0.58g；酚红0.55g；丙三醇、二甲亚矾和聚乙烯吡咯烷酮按比例1:1:2组合8.0ml。
[0012]一种病毒保存液的制作方法，包括以下步骤：步骤（A），配置基础保存液，将氯化钠0.5
‑
15.6g、氯化钾0.5
‑
5.5g、氯化钙0.15
‑
3.6g、氯化镁0.1
‑
2.4g、硫酸镁0.1
‑
2.8g、磷酸氢二钠0.3
‑
7.0g、磷酸二氢钾0.1
‑
6.3g和葡萄糖1.0
‑
10.0g依次量取加入至定量容器内部，再加入生理盐水定容至100ml；步骤（B），基础保存液中加入缓冲液，将柠檬酸0.45
‑
12.85g，4
‑
羟乙基哌嗪乙磺酸2.6
‑
36.5g依次量取并加入至基础保存液内部，再搅拌3
‑
5min至均匀，制成混合液A；步骤（C），混合液A中加入BSA和氨基酸，将BSA0.2
‑
5.0g和L
‑
谷氨酸0.28
‑
2.95g依次量取并加入至混合液A内部，再搅拌1
‑
2min至均匀，制成混合液B；步骤（D），混合液B中加入抗生素，将青霉素0.01
‑
0.12g、万古霉素0.50
‑
2.82g、庆大霉素0.55
‑
1.50g、多粘菌素B 0.01
‑
0.10g、二性霉素0.10
‑
2.95g和制霉菌素0.10
‑
0.70g依次量取并放入玻璃容器内部混合，再将玻璃容器内部混合后的抗生素加入至混合液B中，搅拌3
‑
5min至均匀，制成混合液C；步骤（E），混合液C中加入防冻剂，将丙三醇、二甲亚矾和聚乙烯吡咯烷酮中的一种或几种组合1.0
‑
10.0ml量取并加入至混合液C中，再搅拌1
‑
2min至均匀，制成保存液；步骤（F），保存液中加入酸碱指示剂，将酚红0.01
‑
0.66g量取并加入至保存液内部，再搅拌3
‑
5min至均本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种病毒保存液配方，其特征在于，包括以下组分及各组分的重量数为：基础保存液：100ml；缓冲液：柠檬酸0.45
‑
12.85g，4
‑
羟乙基哌嗪乙磺酸2.6
‑
36.5g；BSA：0.2
‑
5.0g；氨基酸：0.28
‑
2.95g；抗生素：包括但不限于青霉素、万古霉素、庆大霉素、多粘菌素、二性霉素和制霉菌素，其中青霉素0.01
‑
0.12g、万古霉素0.50
‑
2.82g、庆大霉素0.55
‑
1.50g、多粘菌素B 0.01
‑
0.10g、二性霉素0.10
‑
2.95g和制霉菌素0.10
‑
0.70g；酸碱指示剂：0.01
‑
0.66g；防冻剂：1.0
‑
10.0ml。2.根据权利要求1所述的病毒保存液配方，其特征在于，所述基础保存液包括但不限于氯化钠、氯化钾、氯化钙、氯化镁、硫酸镁、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾和葡萄糖，其中氯化钠0.5
‑
15.6g、氯化钾0.5
‑
5.5g、氯化钙0.15
‑
3.6g、氯化镁0.1
‑
2.4g、硫酸镁0.1
‑
2.8g、磷酸氢二钠0.3
‑
7.0g、磷酸二氢钾0.1
‑
6.3g和葡萄糖1.0
‑
10.0g。3.根据权利要求1所述的病毒保存液配方，其特征在于，所述氨基酸采用的是L
‑
谷氨酸。4.根据权利要求1所述的病毒保存液配方，其特征在于，所述酸碱指示剂采用的是酚红。5.根据权利要求1所述的病毒保存液配方，其特征在于，所述防冻剂为丙三醇、二甲亚矾和聚乙烯吡咯烷酮中的一种或几种组合。6.根据权利要求1
‑
5所述的病毒保存液配方，其特征在于，包括以下组分及各组分的重量数为：氯化钠7.6g、氯化钾3.5g、氯化钙1.8g、氯化镁1.3g、硫酸镁2.1g、磷酸氢二钠3.2g、磷酸二氢钾4.5g和葡萄糖6.3g；柠檬酸5.75g，4
‑
羟乙基哌嗪乙磺酸22.3g；BSA2.8g；L
‑
谷氨酸1.92g；青霉素0.07g、万古霉素1.73g、庆大霉素0.85g、多粘菌素B 0.06g、二性霉素2.14g和制霉菌素0.58g；酚红0.55g；丙三醇、二甲亚矾和聚乙烯吡咯烷酮按比例1:1:2组合8.0ml。7.一种病毒保存液的制作方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤（A），配置基础保存液，将氯化钠0.5
‑
15.6g、氯化钾0.5
‑
5.5g、氯化钙0.15
‑
3.6g、氯化镁0.1
‑
2.4g、硫酸镁0.1
‑
2.8g、磷酸氢二钠0.3
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7.0g、磷酸二氢钾0.1
‑
6.3g和葡萄糖1.0
‑
10.0g依次量取加入至定量容器内部，再加入...

【专利技术属性】
技术研发人员：王斌，李秀艳，
申请(专利权)人：江苏沃兴生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：