粉末洗涤剂组合物制造技术

本发明专利技术涉及包含蛋白酶的中性pH和任选地低电导率粉末洗涤剂组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】粉末洗涤剂组合物序列表的引用本申请含有处于计算机可读形式的序列表，将其通过引用并入本文。
本专利技术涉及中性pH粉末洗涤剂组合物，特别涉及包含蛋白酶的中性pH粉末洗涤剂组合物。
技术介绍
枯草杆菌蛋白酶(subtilisin)是来自S8家族，特别是来自S8A亚家族的丝氨酸蛋白酶，如由MEROPS数据库所定义的(https://www.ebi.ac.uk/merops/index.shtml)。在S8A亚家族中，关键活性位点残基Asp、His和Ser通常发生在与S8B亚家族不同的那些基序中。在洗涤剂工业中，酶已经在洗涤配制品中实施了几十年。用于此类配制品中的酶包括蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶、甘露糖苷酶以及其他酶或其混合物。商业上，最重要的酶是蛋白酶。数量不断增长的商用蛋白酶(用于例如衣物和餐具洗涤剂)是天然存在的野生型蛋白酶的蛋白质工程化变体。本领域已经描述了许多相对于亲本蛋白酶具有改变的蛋白酶变体，所述改变产生例如更好的洗涤性能、热稳定性、储存稳定性或催化活性方面的改善。粉末洗涤剂配制品通常是高度碱性的，且pH值高于9，并且通常高于10，如高达约10.5。因此，通常设计用于这种配制品的蛋白酶不仅能够耐受高pH值，而且还能够在碱性条件下以最佳方式发挥作用。然而，在许多情况下，希望在较低的pH值下洗涤，因此需要在这种条件下适用并表现良好的蛋白酶。本专利技术提供了具有较低pH并包含蛋白酶的粉末洗涤剂组合物，其中即使存在相对较低的pH值，蛋白酶也表现出令人惊讶的良好性能。
技术实现思路
本专利技术涉及中性pH粉末洗涤剂组合物，其包含蛋白酶，其中该组合物中蛋白酶的存在令人惊讶地发现产生了改善的清洁性能。本专利技术还涉及本文所述的组合物在清洁过程如衣物洗涤或餐具洗涤中的用途，涉及使用中性pH洗涤剂组合物进行清洁的方法，并且涉及本文描述的蛋白酶在中性pH粉末洗涤剂组合物中的用途。序列说明SEQIDNO:1是来自迟缓芽孢杆菌的蛋白酶多肽的序列。SEQIDNO:2是来自解淀粉芽孢杆菌的BPN’蛋白酶多肽的序列。SEQIDNO:3是来自芽孢杆菌属物种的TY145蛋白酶多肽的序列。定义枯草杆菌酶/蛋白酶：术语“枯草杆菌酶”和“蛋白酶”在本文可以可互换地使用，并且是指水解蛋白质中的肽键的酶，即具有“蛋白酶活性”的酶。它包括属于EC3.4酶组(包括其13个亚类中的每一个)的任何酶，并且特别是内肽酶(EC3.4.21)。EC编号是指来自NC-IUBMB的EnzymeNomenclature1992[1992年酶命名法],学术出版社(AcademicPress),圣地亚哥,加利福尼亚州，分别包括在Eur.J.Biochem.[欧洲生物化学期刊],1994,223,1-5；Eur.J.Biochem.[欧洲生物化学期刊],1995,232,1-6；Eur.J.Biochem.[欧洲生物化学期刊],1996,237,1-5；Eur.J.Biochem.[欧洲生物化学期刊],1997,250,1-6；以及Eur.J.Biochem.[欧洲生物化学期刊],1999,264,610-650中出版的增刊1-5。蛋白酶活性：术语“蛋白酶活性”是指蛋白水解活性(EC3.4)，特别是内肽酶活性(EC3.4.21)。存在几种蛋白酶活性类型，三种主要活性类型是：胰蛋白酶样，其中在P1处的Arg或Lys之后存在酰胺底物的裂解；胰凝乳蛋白酶样，其中在P1处的一个疏水性氨基酸之后发生裂解；和弹性蛋白酶样，其中在P1处的Ala之后发生裂解。蛋白酶活性可以根据WO2016/087619中描述的程序确定。粉末洗涤剂组合物：术语“粉末洗涤剂组合物”是指其中全部或大部分成分呈固体干燥形式的洗涤剂组合物。“粉末”通常由包含一种或多种粉末和或颗粒的混合物组成。术语粉末洗涤剂组合物包括单位剂型例如洗涤块(tab)，其是已通过将一种或多种粉末或颗粒组合、压制或附聚成呈干燥形式的较大结构的洗涤片(tablet)。粉末洗涤剂组合物的含水量应足够低，以防止组合物的粘附或意外附聚。为了简单起见，本说明书和权利要求书中通常称为“粉末”组合物。除非从上下文中另有说明或是明显的，否则本文使用的术语“粉末”应理解为还包括如上所述的固体形式，例如颗粒和洗涤块。序列同一性：两个氨基酸序列之间或两个核苷酸序列之间的关联度通过参数“序列同一性”来描述。出于本专利技术的目的，使用如在EMBOSS软件包(EMBOSS：欧洲分子生物学开放软件包(EMBOSS:TheEuropeanMolecularBiologyOpenSoftwareSuite)，Rice等人,2000,TrendsGenet.[遗传学趋势]16:276-277)(优选5.0.0版本或更新版本)的尼德尔程序中所实施的尼德曼-翁施算法(Needleman-Wunschalgorithm)(Needleman和Wunsch,1970,J.Mol.Biol.[分子生物学杂志]48:443-453)来确定两个氨基酸序列之间的序列同一性。所使用的参数是空位开放罚分10、空位延伸罚分0.5和EBLOSUM62(BLOSUM62的EMBOSS版)取代矩阵。将标记为“最长同一性”的Needle的输出(使用非简化选项获得)用作同一性百分比并且计算如下：(相同的残基x100)/(比对长度-比对中的空位总数)出于本专利技术的目的，使用如在EMBOSS软件包(EMBOSS：欧洲分子生物学开放软件包(EMBOSS:TheEuropeanMolecularBiologyOpenSoftwareSuite)，Rice等人,2000,同上)(优选5.0.0版本或更新版本)的尼德尔程序中所实施的尼德曼-翁施算法(Needleman和Wunsch,1970,同上)来确定两个脱氧核糖核苷酸序列之间的序列同一性。所使用的参数是空位开放罚分10、空位延伸罚分0.5和EDNAFULL(NCBINUC4.4的EMBOSS版)取代矩阵。将标记为“最长同一性”的Needle的输出(使用非简化选项获得)用作同一性百分比并且计算如下：(相同的脱氧核糖核苷酸x100)/(比对长度-比对中的空位总数)变体：术语“变体”意指具有蛋白酶活性的、在一个或多个位置处包括改变(即，取代、插入和/或缺失)的多肽。取代意指用不同的氨基酸替代占据某一位置的氨基酸；缺失意指去除占据某一位置的氨基酸；而插入意指在邻接并且紧随占据某一位置的氨基酸之后添加氨基酸。变体命名惯例出于本专利技术的目的，使用SEQIDNO:2的多肽来确定SEQIDNO:1的变体中相应的氨基酸残基编号。将SEQIDNO:1的变体的氨基酸序列与SEQIDNO:2对齐，并基于比对，将氨基酸位置编号对应于SEQIDNO:1的多肽中的任何氨基酸残基。进一步的信息，参见下文段落“氨基酸位置/残基的编号”。SEQIDNO:3的变体的编号是基于SEQIDNO:3。另一种枯草杆菌酶中的相对应的氨基酸残基本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种粉末洗涤剂组合物，其包含蛋白酶和至少一种洗涤剂组分，其中该组合物的pH不超过约9，其中pH是在20℃、在该组合物在去离子水中的5g/l溶液中确定的。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20181203 EP 18209835.0;20181203 EP 18209836.81.一种粉末洗涤剂组合物，其包含蛋白酶和至少一种洗涤剂组分，其中该组合物的pH不超过约9，其中pH是在20℃、在该组合物在去离子水中的5g/l溶液中确定的。


2.根据权利要求1所述的组合物，其中该组合物的电导率不超过约4.0mS/cm，其中电导率是在20℃、在该组合物在去离子水中的5g/l溶液中确定的。


3.根据权利要求1或2所述的组合物，其中该组合物具有根据权利要求1中所述确定的pH：a)从约7.0至不超过约9.0，例如从约7.2至约8.9，如从约7.4至约8.8、如从约7.6至约8.7、如从约7.8至约8.6；b)从约7.0至约8.2，如从约7.2至约8.0；或c)从约7.8至约8.8，如从约8.0至约8.6。


4.根据权利要求2或3所述的组合物，其中该组合物具有根据权利要求2中所述确定的电导率：不超过约3.9mS/cm，如不超过约3.8mS/cm、如不超过约3.7mS/cm、如不超过约3.6mS/cm、如不超过约3.5mS/cm、如不超过约3.4mS/cm、如不超过约3.3mS/cm、如不超过约3.2mS/cm、如不超过约3.1mS/cm、如不超过约3.0mS/cm、如不超过约2.8mS/cm、如不超过约2.6mS/cm、如不超过约2.4mS/cm、如不超过约2.2mS/cm或不超过约2.0mS/cm。


5.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中该蛋白酶选自下组，该组由以下组成：
a)SEQIDNO:1的多肽的变体，其中该变体具有蛋白酶活性并且与SEQIDNO:1具有至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％或至少95％但少于100％的序列同一性；
b)SEQIDNO:2的多肽或其变体，其中该变体具有蛋白酶活性并且与SEQIDNO:2具有至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％或至少95％但少于100％的序列同一性；以及
c)SEQIDNO:3的多肽或其变体，其中该变体具有蛋白酶活性并且与SEQIDNO:3具有至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％或至少95％但少于100％的序列同一性。


6.根据权利要求1-5中任一项所述的组合物，其中该蛋白酶是SEQIDNO:1的多肽的变体，该变体包含以下突变组中的一组，其中位置编号对应于SEQIDNO:2的多肽的位置：
·S99AD；
·S99D+S101E+S103A+V104I+G160S；
·S3T+V4I+S99D+S101E+S103A+V104I+G160S+V205I；
·S3T+V4I+S99D+S101R+S103A+V104I+G160S+V199M+V205I+L217D；
·Y167A+R170S+A194P；
·S99SE；
·S87N+S101G+V104N；
·S9E+N43R+N76D+V205I+Q206L+Y209W+S259D+N261W+L262E；或
·S99D+S101E+S103A+V104I+S156D+G160S+L262E；
其中该蛋白酶与SEQIDNO:1具有至少80％、至少85％、至少90％或至少95％的序列同一性并包含所述突变组中的一组，或其中该蛋白酶包含具有所述突变组中的一组的、SEQIDNO:1的多肽或由其组成。


7.根据权利要求1-5中任一项所述的组合物，其中该蛋白酶是
a)SEQIDNO:2的多肽；或
b)SEQIDNO:2的变体，该变体包含以下突变组中的一组：
·Y217L；
·S24G+S53G+S78N+S101N+G128S+Y217Q；以及
·S24G+S53G+S78N+S101N+G128A+Y217Q；
其中该蛋白酶变体与SEQIDNO:2具有至少80％、至少85％、至少90％或至少95％的序列同一性并包含所述突变组中的一组，或其中该蛋白酶变体包含具有所述突变组中的一组的、SEQIDNO:2的多肽或由其组成。


8.根据权利要求1-5中任一项所述的组合物，其中该蛋白酶是SEQIDNO:3的多肽或与SEQIDNO:3具有至少80％、至少85％、至少90％或至少95％序列同一性的其变体，例如包含选自下组的一个或多个突变的变体，该组由以下组成：S27K、N109K、S111E、S171E、S173P、G174K、S175P、F180Y、G182A、L184F、Q198E、N199K和T297P，例如包含突变S27K+N109K+S111E+S171E+S173P+G174K+S175P+F180Y+G182A+L184F+Q198E+N199K+T297P的、SEQIDNO:3的变体。


9.根据权利要求1-8中任一项所述的组合物在清洁过程如衣物洗涤或餐具洗涤中的用途。


10.一种清洁方法，特别是用于清洁织物或纺织品，或用于餐具洗涤，该方法包括在适于清洁织物/纺织品或餐具的条件下使织物/纺织品或餐具与根据权利要求1-8中任一项所述的洗涤剂组合物接触。


11.包含5-100g含有蛋白酶和至少一种洗涤剂组分的粉末洗涤剂的洗涤剂组合物在清洁过程如衣物洗涤或餐具洗涤中的用途，其中当将15g该洗涤剂在20℃溶解于15l去离子水中时，该组合物的pH不超过约9。


12.根据权利要求11所述的用途，其中该pH是a)从约7.0至不超过约9.0，例如从约7.2至约8.9，如从约7.4至约8.8、如从约7.6至约8.7、如从约7.8至约8.6；b)从约7.0至约8.2，如从约7.2至约8.0；或c)从约7.8至约8.8，如从约8.0至...

【专利技术属性】
技术研发人员：A贝尼，CM鲍尔，
申请(专利权)人：诺维信公司，
类型：发明
国别省市：丹麦;DK