一种检测新型冠状病毒SARS-CoV-2抗体的试剂盒及方法技术

本发明专利技术提供了一种检测新型冠状病毒SARS‑CoV‑2抗体的试剂盒，包括包被SARS‑CoV‑2抗原的磁微粒、化学发光标记物标记的抗人IgM/IgG二抗、非新型冠状病毒抗原。采用该试剂盒能特异性地检测出待测病人样本是否含有因新型冠状病毒SARS‑CoV‑2感染所产生的特异性IgM/IgG抗体，且不与流感病毒、普通的冠状病毒等产生交叉反应。本发明专利技术还提供了新型冠状病毒的检测方法。

【技术实现步骤摘要】
一种检测新型冠状病毒SARS-CoV-2抗体的试剂盒及方法
本专利技术涉及生物医学检测领域，特别涉及一种检测新型冠状病毒SARS-CoV-2抗体的试剂盒及方法。
技术介绍
新型冠状病毒(SARS-CoV-2)直接攻击患者呼吸系统和消化系统，造成患者免疫系统紊乱，严重者产生炎症风暴导致死亡。新型冠状病毒危害性巨大的一个主要原因，是患者发病具有3-14天甚至更长的潜伏期。早期病人没有任何症状，即使采用广为接受的金标准荧光定量PCR技术，发病初期阳性检出率也只有30～50％，使得诊断极其困难。医疗机构不得不采用CT和临床症状作为核酸检测的补充手段，不仅花费大、耗时长、造成大量患者无法及时确诊，还存在很大诊断上的不准确性，造成误诊和医疗资源的浪费。日前，国家卫健委临检中心提议补充新型冠状病毒特异抗体检测，以明确患者是否“近期或既往感染过新型冠状病毒”，有助于核酸检测阴性但临床上疑似患者的确诊。但临检中心推荐的检测流程相当繁琐复杂，且一般的抗体检测方法易受到血液标本中的一些物质(如类风湿因子、非特异IgM/IgG(如受其它类型的冠状病毒、流感病毒、腺病毒等感染产生的抗体)等)的干扰而出现“假阳性”结果，导致难以区分是近期新型冠状病毒(SARS-CoV-2)还是其它病毒造成的感染。因此，有必要提供一种能简单、快速、特异性检测新型冠状病毒的技术，以提高检测效率和准确度。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术提供了一种检测新型冠状病毒SARS-CoV-2抗体的试剂盒及检测方法，以简单、快速、特异性检测出人体是否受到新型冠状病毒的感染，提高检测速度和准确度。具体地，第一方面，本专利技术提供了一种检测新型冠状病毒SARS-CoV-2抗体的试剂盒，包括包被SARS-CoV-2抗原的磁微粒、化学发光标记物标记的抗人IgM/IgG二抗、非新型冠状病毒抗原。其中，所述包被SARS-CoV-2抗原的磁微粒、化学发光标记物标记的抗人IgM/IgG二抗、非新型冠状病毒抗原可以单独保存或以混合态保存，但所述包被SARS-CoV-2抗原的磁微粒不与所述化学发光标记物标记的抗人IgM/IgG二抗相混合。例如，所述非新型冠状病毒抗原可以与所述化学发光标记物标记的抗人IgM/IgG抗体二抗在一起保存，也可以与所述包被SARS-CoV-2抗原的磁微粒混合保存。在使用所述试剂盒时，注意使待测样本先与所述非新型冠状病毒抗原所在的体系混合，以使待测样本中的非SARS-CoV-2特异性抗体在溶液中被结合封闭。其中，所述化学发光标记物标记的抗人IgM/IgG二抗可以为化学发光标记物标记的IgM二抗、化学发光标记物标记的IgG二抗，或者为化学发光标记物标记的IgM二抗与化学发光标记物标记的IgG二抗的混合物。可选地，所述化学发光标记物为酶(如碱性磷酸酶、辣根过氧化物酶等)、吖啶酯、三联吡啶钌等中的一种或多种。在本专利技术一实施方式中，所述化学发光标记物为吖啶酯。可选地，所述化学发光标记物标记的抗人IgM/IgG二抗中，所述抗人IgM/IgG二抗与所述化学发光标记物的摩尔比为1：(2-50)。优选为1：(2-10)。可选地，所述SARS-CoV-2抗原包括但不限于刺突蛋白(spikeprotein，S蛋白)S1、刺突蛋白S-RBD、核衣壳蛋白(nucleocapsidprotein，N蛋白)、包膜蛋白(envelopeprotein，E蛋白)等任何与新型冠状病毒SARS-CoV-2有关或类似结构的抗原。进一步可选地，磁微粒可通过其表面的活性基团(如羧基、胺基、巯基、对甲苯磺酰基等等)经过活化或直接与SARS-CoV-2抗原共价偶联，或将磁微粒先与链霉亲和素偶联，同时采用生物素标记SARS-CoV-2抗原，最终得到包被SARS-CoV-2抗原的磁微粒。其中，所述磁微粒的内核为四氧化三铁或三氧化二铁。其中，所述包被SARS-CoV-2抗原的磁微粒上的SARS-CoV-2抗原可以为上述列举的一种或多种。优选为上述刺突蛋白S1、刺突蛋白S-RBD、核衣壳蛋白和包膜蛋白的混合。当SARS-CoV-2抗原为多种时，其可以是多个抗原混合包被的磁微粒，或者某一抗原包被的磁微粒与不同抗原包被的磁微粒的混合。进一步可选地，在所述包被SARS-CoV-2抗原的磁微粒中，所述SARS-CoV-2抗原与磁微粒的包被质量比为0.5％-5％。可选地，所述非新型冠状病毒抗原包括但不限于HKU1冠状病毒、OC43冠状病毒、NL63冠状病毒、229E冠状病毒、SARS冠状病毒、MERS冠状病毒、流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、鼻病毒、腺病毒、人间质肺病毒、人偏肺病毒等的抗原中的至少一种。其中，所述流感病毒包括乙型流感病毒Yamagata、Victoria，及甲型流感病毒H1N1、H3N2、H5N1、H7N9、H7N1、H7N2、H7N3、H7N7、H7N9、H9N2等；所述副流感病毒包括副流感病毒1、2、3型等；所述呼吸道合胞病毒包括呼吸道合胞病毒A、B型等；所述鼻病毒包括鼻病毒A、B、C组等；所述腺病毒包括腺病毒1、2、3、4、5、7、55型等。可选地，所述试剂盒还包括缓冲液和化学发光体系溶液。其中，所述缓冲液可以包括Tris-HCl缓冲液(如pH在7.5-10.0，优选为7.5-9.0)、pH在6.8-8.2的HEPES缓冲液、磷酸盐(PBS)缓冲液(如pH＝6.0-9.5，优选为7.2-8.0)、MES缓冲液(如pH＝5.0-7.5)、硼酸钠缓冲液(如pH＝7.6-9.5)、柠檬酸缓冲溶液(如pH＝6.0-8.0)等。所述缓冲液可以用于清洗、样品稀释，以及包被SARS-CoV-2抗原的磁微粒、化学发光标记物标记的抗人IgM/IgG二抗等溶液的浓度调配。其中，在所述化学发光标记物为辣根过氧化物酶时，所述化学发光体系溶液含有底物鲁米诺；在所述化学发光标记物为碱性磷酸酶时，所述化学发光体系溶液含有底物AMPPD；在所述化学发光标记物为三联吡啶钌时，所述化学发光体系溶液含有三丙胺。在所述化学发光标记物为吖啶酯时，所述化学发光体系溶液包括预激发液A(例如H2O2和HNO3的混合液)和激发液B(例如TritonX-100和NaOH的混合液)。预激发液A和激发液B在进行检测时，先后加入，两者加入时间的间隔从0.001s至10min不等。可选地，预激发液A的加入体积为1.0μL至10.0mL；激发液B的加入体积为1.0μL至10.0mL。在本专利技术一实施方式中，所述试剂盒分为R1试剂、R2试剂，其中，所述R1试剂包括包被SARS-CoV-2抗原的磁微粒，所述R2试剂包括化学发光标记物标记的抗人IgM/IgG二抗和非新型冠状病毒抗原。所述R1试剂与R2试剂分开储存，在使用时再按比例与待测样本混合。进一步可选地，所述R1试剂、所述R2试剂可以独立地含有缓冲液、表面活性剂、稳定剂和防腐剂。其中，所述表面活性剂可以独立地选自吐温、Triton、SDS等；所述稳定剂和防腐剂可以独立地选自牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测新型冠状病毒SARS-CoV-2抗体的试剂盒，其特征在于，包括包被SARS-CoV-2抗原的磁微粒、化学发光标记物标记的抗人IgM/IgG二抗和非新型冠状病毒抗原，且所述包被SARS-CoV-2抗原的磁微粒不与所述化学发光标记物标记的抗人IgM/IgG二抗混合保存。/n

【技术特征摘要】
1.一种检测新型冠状病毒SARS-CoV-2抗体的试剂盒，其特征在于，包括包被SARS-CoV-2抗原的磁微粒、化学发光标记物标记的抗人IgM/IgG二抗和非新型冠状病毒抗原，且所述包被SARS-CoV-2抗原的磁微粒不与所述化学发光标记物标记的抗人IgM/IgG二抗混合保存。


2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述SARS-CoV-2抗原包括SARS-CoV-2的刺突蛋白S1、刺突蛋白S-RBD、核衣壳蛋白和包膜蛋白中的一种或多种。


3.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述非新型冠状病毒抗原包括HKU1冠状病毒、OC43冠状病毒、NL63冠状病毒、229E冠状病毒、SARS冠状病毒、MERS冠状病毒、流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、鼻病毒、腺病毒、人间质肺病毒和人偏肺病毒的抗原中的至少一种。


4.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括缓冲液和化学发光体系溶液。


5.如权利要求1-4任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括R1试剂和R2试剂，其中，所述非新型冠状病毒抗原与所述化学发光标记物标记的抗人IgM/IgG二抗混合保存在所述R2试剂，所述R1试剂包括所述包被SARS-CoV-2抗原的磁微粒。


6.如权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述包被SARS-CoV-2抗原的磁微粒在所述R1试剂中的浓度在0.01-1000mg/mL的范围；所述化学发光标记物标记的抗人IgM/IgG二抗在所述R2试剂中的浓度在0.01-10000ng/mL的范围...

【专利技术属性】
技术研发人员：余枝广，肖良品，柴凡，郭媛媛，吴晓丽，崔易航，吴轩德，
申请(专利权)人：深圳麦科田生物医疗技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44