FABP3在大动脉炎血管纤维化中的应用制造技术

本发明专利技术公开了FABP3在大动脉炎血管纤维化中的应用。本发明专利技术通过加用姜黄颗粒可在6个月内有效控制大动脉炎患者血管纤维化进展，并一定程度降低血清中促纤维化因子FN1和MMP9的水平；本发明专利技术用小干扰RNA和过表达质粒转染AAF，下调或过表达AAF中的FABP3可分别抑制或促进细胞内增殖相关基因Ki67的表达及细胞活力，同时可抑制或促进AAF合成FN1、COL11A、COL1、MMP9和MMP3；本发明专利技术采用姜黄素体外干预FABP3‑OE‑AAF，姜黄素可抑制FABP3的表达，同时可抑制细胞增殖和血管纤维化相关标志物的合成。本发明专利技术为大动脉炎血管纤维化的临床治疗提供了新的分子靶标。

【技术实现步骤摘要】
FABP3在大动脉炎血管纤维化中的应用
本专利技术涉及FABP3在大动脉炎血管纤维化中的应用，属于生物医药

技术介绍
大动脉炎是一种慢性非特异性、炎症性大血管病，主要累及主动脉及其一级分支，胸主动脉、肺动脉及其分支、眼底动脉和颅内动脉同样可以受累。炎症驱动的血管壁纤维化是大动脉炎的主要病理特征，纤维化是最终导致重要脏器缺血、器官功能衰竭的主要原因。临床上大动脉炎的常规治疗中采用30～40mg/天糖皮质激素(Glucocorticoid)加免疫抑制剂等，如加甲氨蝶10-15mg/周或来氟米特20mg/天或环磷酰胺600-800mg/月等，这些药物通过直接或间接抑制机体免疫系统，激活发挥抑制炎症的作用，从而有效的控制病情，然而当糖皮质激素减量至10mg/天及以下时，仅28％的患者能够持续缓解。炎症的反复发作最终导致受累血管的破坏、重塑、增厚、狭窄甚至闭塞，常规治疗后仍有30％的患者出现影像学进展。近年来生物制剂IL-6受体单抗用于大动脉炎治疗，虽然表现出令人满意的疗效和安全性，但仍有病例报告血管病变进展，而且昂贵的价格也导致很多患者无法承担。关于大动脉炎纤维化发生发展的机制是研究热点，但是一直没有被突破，在治疗上也是束手无策。糖皮质激素已被证实可导致总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白水平的升高，且大量研究证实了其与代谢综合征发生的密切关系。因此，长期依赖大剂量糖皮质激素治疗，会导致血脂异常，这会加重了血管壁的动脉硬化和血管的损害。糖皮质激素对血脂的影响与每日剂量和累计剂量有关，小剂量可导致总胆固醇含量升高，增加心血管疾病发生风险；而大剂量可导致甘油三酯含量增加，并诱发骨质疏松、心血管相关并发症。此外，糖皮质激素联合免疫抑制剂造成的各种感染，如疱疹病毒感染、曲霉菌感染、肺炎等，以及免疫抑制剂的细胞毒性作用，也是治疗中的棘手问题。姜黄素具有很强的亲脂性，因而具有与生物膜相互作用的能力，可以通过直接插入细胞膜被细胞摄取，也可以通过与细胞膜上的受体结合进一步发挥效应。姜黄素具有较强的安全性，随机对照研究证实口服高剂量姜黄素纯品(12g)安全可耐受。临床上，姜黄素已被用于各种慢性炎症性疾病，包括类风湿性关节炎、多发性硬化症、炎症性肠病、系统性红斑狼疮。2017年一项临床研究发现姜黄素能够提高大动脉炎的治疗应答，降低患者炎症指标。然而姜黄素对大动脉炎血管纤维化的调控作用及相关靶点机制尚未揭示。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是：大动脉炎的常规治疗中长期采用大剂量糖皮质激素治疗会导致血脂异常、引发心血管相关并发症以及糖皮质激素联合免疫抑制剂会造成各种感染等问题。为了解决上述技术问题，本专利技术公开了FABP3拮抗剂在制备治疗和预防大动脉炎血管纤维化的药物中的应用。优选地，所述应用包括FABP3拮抗剂在制备治疗和预防大动脉炎血管纤维化的辅助药物中的应用。优选地，所述的FABP3拮抗剂包括姜黄素纯品和/或含有姜黄素的制剂。优选地，所述的含有姜黄素的制剂包括姜黄颗粒。本专利技术还公开了抑制FABP3表达的物质在制备抑制细胞外基质蛋白的表达的试剂和/或主动脉外膜成纤维细胞增殖的试剂和/或抑制动脉外膜成纤维细胞合成大动脉炎血管纤维化标志物的试剂中的应用。优选地，所述的抑制FABP3表达的物质包括FABP3的特异性siRNA和/或姜黄素。优选地，所述的细胞外基质蛋白包括蛋白FN1、COL1、MMP9和MMP3中的至少一种。优选地，所述的大动脉炎血管纤维化标志物包括FN1、COL11A、COL1、MMP9和MMP3中的至少一种。优选地，所述的FABP3的特异性siRNA包括序列为5’-GGGACAUUCUCACCCUAAA-3’的siRNA。与现有技术相比，本专利技术的有益效果在于：1.本专利技术通过加用姜黄颗粒可在6个月内有效控制大动脉炎患者血管纤维化进展，并一定程度降低血清中促纤维化因子FN1和MMP9的水平；2.姜黄素具有安全、不良反应小的优点，与糖皮质激素和/或免疫抑制剂联用，可将其他两种药物维持在较小或较安全的剂量，可降低严重不良反应的发生率，尤其是通过调节脂质代谢平衡，减少远期心血管不良事件的发生，增加治疗的安全性；3.姜黄素与传统中药方剂相比，具有服用方便的优势，只需温水泡饮，免去了煎服的复杂工序，且姜黄素价格经济，有利于提高患者的依从性，保证治疗的可持续性。附图说明图1：一位40岁男性大动脉炎患者，接受姜黄颗粒60克/天辅助治疗，基线和6个月全身血管MRA结果，其中，左图为该患者基线图，右图为该患者6个月全身血管MRA图；图2：18例大动脉炎患者加用姜黄颗粒治疗6个月后血清FABP3水平变化；图3：转录组测序差异表达前10基因的PCR验证；其中，FABP3在HSP65刺激后上调最为显著，且姜黄素处理后下调最为明显；图4：大动脉炎患者与健康人动脉外膜FABP3表达情况，其中，****表示p<0.0001；图5：FABP3的表达与FN1，COL1，MMP3和MMP9的表达均呈正相关关系；图6：AAF中FABP3下调对细胞增殖的影响；A：AAF中FABP3敲减成功；B：FABP3下调对AAF细胞活力的影响；C：FABP3下调对细胞核内Ki67表达的影响，图中Merge组圈出的是Ki67染色细胞；图7：AAF中FABP3过表达对细胞增殖的影响；A：AAF中FABP3表达成功上调；B：FABP3过表达对AAF细胞活力的影响；C：FABP3过表达对细胞核内Ki67表达的影响，图中Merge组圈出的是Ki67染色细胞；图8：AAF中FABP3表达对ECMs合成的影响；A：FABP3下调对AAF合成FN1，COL11A，COL1，MMP9及MMP3的影响；B：FABP3过表达对AAF合成FN1，COL11A，COL1，MMP9及MMP3的影响；图9：姜黄素对FABP3-OE-AAF增殖的影响；A：姜黄素降低FABP3-OE-AAF中FABP3的表达；B：姜黄素对FABP3-OE-AAF细胞中ATP合成的影响；C：姜黄素对FABP3-OE-AAF细胞存活率的影响；D：姜黄素对FABP3-OE-AAF中增殖相关分子Ki67表达的影响，图中Merge组圈出的是Ki67染色细胞。其中，以上附图中的符号*表示显著性水平，*表示P<0.05，**表示P<0.01，*****表示P<0.001，****表示P<0.0001。具体实施方式为使本专利技术更明显易懂，兹以优选实施例，并配合附图作详细说明如下。本专利技术的一个实施例中，提供了姜黄素在制备治疗大动脉炎血管纤维化的药物中的应用。姜黄素，结构式为分子式为C21H20O6，分子量为368.39，提取自姜科植物根茎。用于患者的姜黄颗粒用量为60克/天，泡饮，治疗6个月；用于细胞的姜黄素纯品购于sigma公司，干预剂量为5μM。加用姜黄颗粒治疗6个月本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.FABP3拮抗剂在制备治疗和预防大动脉炎血管纤维化的药物中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.FABP3拮抗剂在制备治疗和预防大动脉炎血管纤维化的药物中的应用。


2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用包括FABP3拮抗剂在制备治疗和预防大动脉炎血管纤维化的辅助药物中的应用。


3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的FABP3拮抗剂包括姜黄素纯品和/或含有姜黄素的制剂。


4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的含有姜黄素的制剂包括姜黄颗粒。


5.抑制FABP3表达的物质在制备抑制动脉壁中细胞外基质蛋白的表达的试剂和/或主动脉外膜成纤维细胞增殖的试剂和/或抑制动脉外膜成纤维细胞合成大动脉炎血管纤维化标志物的试剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜林娣，吴思凡，马莉莉，陈慧勇，
申请(专利权)人：复旦大学附属中山医院，
类型：发明
国别省市：上海;31