一种含泰山霉素的杀菌组合物制造技术

本发明专利技术提供了一种含泰山霉素的杀菌组合物，可用于防治番茄/马铃薯晚疫病、黄瓜霜霉病和辣椒疫霉病等多种卵菌病害，还可防治棉花和茄子的猝倒病等作物苗期病害，应用价值大，经济和社会效益十分显著，可广泛用于农业生产领域。

【技术实现步骤摘要】
一种含泰山霉素的杀菌组合物
本专利技术属于植物保护领域，涉及一种含泰山霉素的杀菌组合物，具体涉及一种含泰山霉素的防治卵菌纲病害的杀菌组合物。
技术介绍
由卵菌纲真菌引起的病害是世界范围内的问题，许多重要蔬菜和水果上均有发生。重要的病害包括番茄和马铃薯晚疫病，葡萄、黄瓜等的霜霉病，辣椒疫霉等。卵菌纲病害如霜霉病、疫病等是非常重要的病害，其造成的损失也是不容忽视的。我国1997年蔬菜和瓜类霜霉病、疫病用药费用为7.96亿元，占十六类作物病害总费用的32.5%。在国外历史上曾因马铃薯晚疫病的发生，导致数万人饥饿而死。由于缺乏有效的抗病品种，目前化学防治仍是防治卵菌病害最有效的方法之一，但随着一些内吸性杀菌剂的不合理及频繁使用，抗性问题已日益突出。因此，采用复配的方式解决抗性成为需要。代森锌、代森锰锌、肟菌酯、氰霜唑、吡唑醚菌酯、烯酰吗啉等杀菌剂是传统生产中防治卵菌病害的药剂。但是长期使用化学农药，带来了杀菌剂抗性产生、环境污染严重、食品安全等问题。有必要筛选防治卵菌病害的绿色、安全的新型药剂应用于农业防控中。氟吡菌胺（fluopicolide）是拜耳公司开发的一种新型吡啶酰胺类内吸性杀菌剂，主要用于防治卵菌纲病原菌引起的病害如霜霉病和疫病等。氟吡菌胺具有独特的作用方式，主要作用于细胞膜和细胞间的特异性蛋白而表现杀菌活性，与其他类杀菌剂无交互抗性，对病原菌的各主要形态均有很好的抑制活性，同时具有保护和治疗作用，而且持效性很好。氟吡菌胺有良好的内吸性，能通过茎叶吸收，由植株下部向上部方向传导，沿植株木质部向整株作物分布。
技术实现思路
针对现有技术中防治卵菌纲药剂抗性产生快的问题，本专利技术提供一种含泰山霉素的杀菌组合物，可用于防治黄瓜、葡萄、辣椒和马铃薯等多种蔬菜水果的卵菌病害，且具有协同增效作用。为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案。一株极细链格孢（Alternariaalternata）SDTF016、其发酵液或提取物在防治卵菌引起的植物病害中的应用，所述极细链格孢SDTF016的保藏编号为CCTCCM2021495。优选地，所述发酵液可以包含或不包含菌体。所述菌体可以为菌丝体或孢子。所述提取物为极细链格孢菌SDTF016的发酵液的乙酸乙酯提取物。所述提取物中的主要有效成分为邻苯二甲酸二丁酯、4-甲基-5-噻唑乙醇、2-甲氧基雷锁酚、对羟基苯乙醇、4-香豆酸和烟酸。优选地，所述提取物的制备方法包括以下步骤：（1）将极细链格孢菌SDTF016在真菌发酵液中发酵，获得发酵液；（2）将发酵液过滤除菌、除蛋白，获得滤液；（3）将滤液以乙酸乙酯为淋洗液过硅胶柱，获得流出液；（4）流出液去除淋洗液获得固体的泰山霉素粗提物。更优选地，上述步骤中还包括进一步纯化粗提物的过程，包括以下步骤：（i）将粗提物溶解后以液相色谱分离并收集214nm波长下有吸收峰的流出液；（ii）将流出液去除溶剂获得提取物泰山霉素。一种含上述提取物的杀菌组合物，包括泰山霉素和杀菌剂A；所述杀菌剂A选自氟吡菌胺、氟醚菌酰胺、烯酰吗啉、氟噻唑吡乙酮、霜霉威盐酸盐、氰霜唑、甲霜灵、精甲霜灵、噁霜灵和霜脲氰中的至少一种。优选地，所述提取物和杀菌剂A的质量比为1:200-5000；优选为1:1000-5000。优选地，所述提取物和杀菌剂A在组合物中的含量为1%-100%（w/w）；更优选为20%-55%（w/w）。优选地，所述组合物中还包括其他有效成分，如杀菌剂、杀虫剂或/和生长调节剂，用于扩大防治谱、省力方便施用。优选地，所述组合物中还包括辅料，所述辅料可以为填料、溶剂、崩解剂、增稠剂、防冻剂、表面活性剂等用于有效成分稳定存在和易于均匀施用。本专利技术具有以下优点：本专利技术提供了一种含泰山霉素的杀菌组合物，可用于防治番茄/马铃薯晚疫病、黄瓜霜霉病和辣椒疫霉病等多种卵菌病害，还可防治棉花和茄子等作物的猝倒病等作物苗期病害，应用价值大，经济和社会效益十分显著，可广泛用于农业生产领域。生物保藏信息极细链格孢（Alternariaalternata）SDTF016，于2021年05月06日保藏于中国典型培养物保藏中心（CGMCC），保藏地址为中国武汉武汉大学保藏中心，保藏编号为CCTCCNo.M2021495。附图说明图1为菌株SDTF016在真菌培养基上生长的菌丝透射电镜照片；图2为泰山霉素粗提物高效液相色谱图。具体实施方式下面结合实施例和附图对本专利技术做进一步说明，但本专利技术不受下述实施例的限制。实施例1极细链格孢SDTF016的分离和鉴定于泰安市采集泰山附近农田土壤，从中分离真菌菌株。具体分离、纯化过程为：称取10g过筛土壤样品，放入装有90mL无菌水和少量玻璃珠的250mL灭菌三角瓶中，将三角瓶置于37℃、180rpm摇床上振荡30min，使之充分悬浮，用无菌水将悬液稀释至10-2-10-5等5个梯度。分别吸取1mL各梯度稀释液于9cm培养皿中并倾注15mL冷至45℃左右的改良马丁培养基（含孟加拉红0.033g/L），水平摇晃混匀，每个梯度重复3次，置于28℃恒温培养箱中培养5-7d后挑取不同的单菌落经平板划线纯化。将纯化后多株菌种以多种植物病原菌为靶标菌进行筛选，获得抑菌效果最好的目标菌株，编号为SDTF016。对该菌进行形态鉴定和生理生化特征试验，其菌丝透射电镜照片如图1所示：菌丝表面光滑，菌丝竹节状生长，并呈现间断性分节状态，刚萌发的菌丝的顶部呈现三角形向外生长，适宜的生长条件下该菌株不产孢子，菌丝生长茂盛多成簇分布。采用Ezup柱式真菌基因组DNA抽提试剂盒（上海生工生物工程股份有限公司）提取菌株基因组DNA，以通用引物ITS1和ITS4为引物PCR扩增真菌ITS序列，获得大小约为500bp的目的条带，PCR产物进行测序。目的基因长度557bp，将测序获得序列与GenBank中已知的基因组序列进行同源性比对分析，并且选择同源性相近的基因组序列进行完整的系统进化分析并构建该菌株的系统发育树。根据系统发育树可知，试验菌株序列与极细链格孢菌的序列一致性为100%；并且系统进化树分析结果表明，试验菌株与极细链格孢菌模式菌株处于同一分支，具有最近的遗传距离和亲缘关系。因此根据扫描电镜观察结果、生理生化试验，以及对ITS序列分析后，最终将SDTF016鉴定为极细链格孢（Alternariaalternata），简称为泰山变种。将上述菌株于2021年05月06日保藏于中国典型培养物保藏中心（CGMCC），保藏编号为CCTCCM2021495。实施例2极细链格孢SDTF016发酵液的获得及发酵产物的提取采用多因素正交试验优化泰山变种的发酵条件（培养基碳源、氮源、无机盐组成与含量、发酵时间12-120h、发酵温度20-37℃、转速90-150rpm），采用以下优化后条件进行发酵：用直径为7mm的打孔器在极细链格孢SDTF016菌株的P本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一株极细链格孢（

【技术特征摘要】
1.一株极细链格孢（Alternariaalternata）SDTF016、其发酵液或提取物在防治卵菌引起的植物病害中的应用，其特征在于，所述极细链格孢SDTF016的保藏编号为CCTCCM2021495。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述发酵液包含或不包含菌体；所述提取物为极细链格孢菌SDTF016的发酵液的乙酸乙酯提取物。


3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述提取物中的主要有效成分为邻苯二甲酸二丁酯、4-甲基-5-噻唑乙醇、2-甲氧基雷锁酚、对羟基苯乙醇、4-香豆酸和烟酸。


4.一种含极细链格孢SDTF016的提取物的杀菌组合物，其特征在于，包括提取物和杀菌剂A；
所述杀菌...

【专利技术属性】
技术研发人员：王红艳，武玉国，姜莉莉，王开运，于颀，王开元，
申请(专利权)人：山东农业大学，山东慧泰华生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37