一种鸭坦布苏病毒弱毒株及其制备方法和应用技术

本发明专利技术中公开了一种鸭坦布苏病毒弱毒株，该弱毒株为鸭坦布苏病毒的基因缺失突变病毒株，其缺失的基因序列包括编码鸭坦布苏病毒的Capsid蛋白氨基酸的核苷酸序列。本发明专利技术还提供了上述鸭坦布苏病毒弱毒株的制备方法及在鸭坦布苏病毒疫苗中的应用。本发明专利技术中的鸭坦布苏病毒弱毒株通过基因缺失突变，删除了Capsid蛋白氨基酸序列的第20位‑第43位氨基酸，直接影响了vRNA的复制能力，从而使突变病毒致弱，显著降低病毒的毒力；其对雏鸭的单次免疫就能显著激活受感染雏鸭的免疫系统，能为雏鸭提供有效的免疫保护。因此，该突变病毒株可应用于制备预防鸭坦布苏病毒病的疫苗，尤其是应用于制备鸭坦布苏病毒致弱活疫苗。

【技术实现步骤摘要】
一种鸭坦布苏病毒弱毒株及其制备方法和应用
本专利技术涉及生物工程
，尤其涉及一种鸭坦布苏病毒弱毒株及其制备方法和应用。
技术介绍
鸭坦布苏病毒(DTMUV)是能引起蛋鸭产蛋下降综合征，甚至致死性脑炎的一种新型黄病毒。几乎所有品种的鸭都能感染鸭坦布苏病毒，包括樱桃谷鸭、北京鸭、麻鸭等，由于蛋鸭感染后其特征性病变为卵泡膜出血，卵泡变形甚至破裂，所以该病曾被称为“出血性卵巢炎”，导致蛋鸭产蛋量大幅度下降甚至停止产蛋，严重者能够导致死亡，死亡率可以达到10％-30％。剖检时可以见到脾脏明显肿大；另外部分鸭肝脏出血严重，并同时伴有针尖状白色坏死点；卵巢病理变化非常严重，出血、萎缩、破裂，输卵管有大量粘液。此外，有报道鸡、鹅、麻雀等也能感染该病毒。经病原的分离与鉴定确定引起该病的病原为鸭坦布苏病毒(DuckTembusuvirus，DTMUV)。目前对于坦布苏病毒的免疫防治主要还是通过疫苗免疫来进行，现有的坦布苏病毒弱毒活疫苗通常是通过传统的连续传代方式获得，其安全风险较高。
技术实现思路
本专利技术的目的在于解决现有技术本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种鸭坦布苏病毒弱毒株，其特征在于，该弱毒株为鸭坦布苏病毒的基因缺失突变病毒株，其缺失的基因序列包括编码鸭坦布苏病毒的Capsid蛋白氨基酸的核苷酸序列。/n

【技术特征摘要】
1.一种鸭坦布苏病毒弱毒株，其特征在于，该弱毒株为鸭坦布苏病毒的基因缺失突变病毒株，其缺失的基因序列包括编码鸭坦布苏病毒的Capsid蛋白氨基酸的核苷酸序列。


2.根据权利要求1所述的鸭坦布苏病毒弱毒株，其特征在于，所述弱毒株缺失的基因序列为编码鸭坦布苏病毒的Capsid蛋白第20位-第43位氨基酸的核苷酸序列，所述弱毒株命名为鸭坦布苏ΔC20-43突变病毒株。


3.一种鸭坦布苏病毒弱毒株的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、以鸭坦布苏病毒株DTMUV-CQW1株的pACNR-FL-CQW1质粒为模板，以序列SEQIDNO.1和SEQIDNO.2为引物，PCR扩增得到片段A；以序列SEQIDNO.3和SEQIDNO.4为引物，PCR扩增得到片段B；再以片段A和片段B为模板，以序列SEQIDNO.1和SEQIDNO.4为引物，通过融合PCR扩增得到基因缺失突变的片段AB，所述片段AB缺失的基因序列为编码鸭坦布苏病毒的Capsid蛋白第20位-第43位氨基酸的核苷酸序列；
S2、将pACNR-FL-CQW1质粒用限制性内切酶MluI和XhoI进行双酶切，并回收纯化，获得纯化的线性pACNR...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈舜，贺煜，程安春，汪铭书，
申请(专利权)人：四川农业大学，
类型：发明
国别省市：四川;51