【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】同时扩增多种免疫细胞类型的方法、相关组合物及其在癌症免疫疗法中的用途对相关申请的交叉引用本申请要求于2018年11月26日提交的美国临时专利申请号62/771,482的优先权权益，该申请的全部内容通过引用纳入本文。ASCII文本文件中材料的引用合并本申请通过引用纳入同时提交的以下ASCII文本文件中包含的序列表:文件名:NKT0028WO_ST25.txt；创建于2019年11月22日，大小为9.4KB。专利技术背景恶性肿瘤是体内细胞不受控制地生长的结果。同样，许多疾病或感染是由正常组织的生长和死亡失调造成。虽然手术疗法或药物疗法长期以来一直是一线治疗方式，但免疫疗法是治疗癌性或病变组织的一种新兴选择。
技术实现思路
传统的抗癌疗法依靠的是手术疗法，放疗，化疗或这些方法的组合。同样，许多疾病或感染是用传统的药物方法治疗，然而最近生物制剂的新发展导致了治疗方法的改变。随着研究的深入，人们对某些癌症的一些机制有了更多的了解，此知识被用来开发靶向癌症疗法。靶向疗法是一种癌症治疗方法，采用某些药物靶...
【技术保护点】
1.一种产生包含至少两个工程化免疫细胞亚群的工程化免疫细胞混合群体的方法，该方法包括:/n从血液样品中分离出单个核细胞群体，/n其中所述分离的单个核细胞群体至少包括免疫细胞的第一和第二亚群，/n从所述分离的单个核细胞中分离出免疫细胞的第一亚群；/n在培养容器中将分离的免疫细胞的第一亚群与饲养细胞群体进行培养，/n其中所述饲养细胞配置为表达至少一种用于刺激所述免疫细胞的第一亚群内自然杀伤(NK)细胞的扩增的分子，/n其中所述至少一种分子选自4-1BB配体(4-1BBL)、白细胞介素15(IL-15)及其组合，/n从而产生扩增的NK细胞群体；/n从所述分离的单个核细胞中分离出免...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20181126 US 62/771,4821.一种产生包含至少两个工程化免疫细胞亚群的工程化免疫细胞混合群体的方法，该方法包括:
从血液样品中分离出单个核细胞群体，
其中所述分离的单个核细胞群体至少包括免疫细胞的第一和第二亚群，
从所述分离的单个核细胞中分离出免疫细胞的第一亚群；
在培养容器中将分离的免疫细胞的第一亚群与饲养细胞群体进行培养，
其中所述饲养细胞配置为表达至少一种用于刺激所述免疫细胞的第一亚群内自然杀伤(NK)细胞的扩增的分子，
其中所述至少一种分子选自4-1BB配体(4-1BBL)、白细胞介素15(IL-15)及其组合，
从而产生扩增的NK细胞群体；
从所述分离的单个核细胞中分离出免疫细胞的第二亚群；
在培养容器中用至少一种用于刺激所述免疫细胞的第二亚群中T细胞扩增的分子培养所述免疫细胞的第二亚群，
其中所述至少一种用于刺激T细胞扩增的分子包括针对CD3或CD28的抗体中的一种或多种，
从而产生扩增的T细胞群体；
用编码工程化受体的核酸转导扩增的NK细胞群体，该工程化受体配置为与由癌细胞表达的靶物结合，并在结合后触发对所述癌细胞的细胞毒性活性，以产生工程化细胞毒性NK细胞，
用编码工程化受体的核酸转导扩增的T细胞群体，该工程化受体配置为与癌细胞表达的靶物结合，并在结合后触发针对所述癌细胞的细胞毒性活性，从而产生工程化细胞毒性细胞，
将所述工程化细胞毒性NK细胞的一部分与所述工程化细胞毒性T细胞的一部分组合，从而产生工程化免疫细胞的混合群体，
其中所述工程化细胞毒性NK细胞和所述工程化细胞毒性T细胞以一定比例组合，其中(i)与单独的工程化NK细胞相比，所述工程化NK细胞群体表现出对所述癌细胞的增强的细胞毒性，(ii)所述工程化细胞毒性T细胞能够增加增殖的工程化NK细胞的数量，和/或(iii)与单独的工程化T细胞相比，所述工程化T细胞群体表现出细胞因子释放减少，并且
其中所述比例为至少约5:1。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述至少一种用于刺激NK细胞扩增的分子包括4-1BBL和IL15的组合。
3.根据权利要求2所述的方法，其中所述白细胞介素15(IL-15)在饲养细胞上是膜结合的。
4.根据权利要求1所述的方法，其中所述培养分离的免疫细胞的第一亚群还包括向所述培养物中加入可溶性白细胞介素2、可溶性白细胞介素12、可溶性白细胞介素18或其组合中的一种或多种。
5.根据权利要求1所述的方法，其中所述NK细胞和所述T细胞都用相同的核酸转导。
6.根据权利要求5所述的方法，其中所述核酸编码嵌合抗原受体。
7.根据权利要求6所述的方法，其中所述嵌合抗原受体针对CD19、CD123、泌乳激素、Ral-B、FLT3、CD70、DLL3、CD5、GUCY2C、EGFR、KREMEN2、PSMA、ALPPL2、CLDN6、CLDN18、GPR143、GRM8、LPAR3、GD2、ADAM12、LECT1、或TMEM186。
8.根据权利要求7所述的方法，其中所述嵌合抗原受体针对CD19。
9.根据权利要求8所述的方法，其中抗CD19CAR包括与抗CD19scFv可操作偶联的OX40共刺激结构域和CD3zeta信号传导结构域。
10.根据权利要求9所述的方法，其中所述抗CD19CAR是由与SEQIDNO:1具有至少95％序列同一性的核酸编码的。
11.根据权利要求9所述的方法，其中抗CD19CAR包括与SEQIDNO:2具有至少95％序列同一性的氨基酸序列。
12.根据权利要求1-11中任一项所述的方法，其中所述至少一种用于刺激T细胞扩增的分子包括抗CD3抗体。
13.根据权利要求1-11中任一项所述的方法，其中所述至少一种用于刺激T细胞扩增的分子包括抗CD3和抗CD28抗体的混合物。
14.根据权利要求1-11中任一项所述的方法，其中所述至少一种用于刺激T细胞扩增的分子包括抗CD28抗体。
15.根据权利要求12-13中任一项所述的方法，其中所述针对CD3的抗体包括OKT3抗体。
16.根据权利要求15所述的方法，其中所述OKT3抗体是由与所述免疫细胞的第二亚群共培养的饲养细胞表达的。
17.根据权利要求12-16中任一项所述的方法，其中所述抗体与固体支持物结合。
18.根据权利要求17所述的方法，其中所述固体支持物包括培养容器、包含标记物的生物相容性珠子或超顺磁性珠子。
19.根据权利要求1-18中任一项所述的方法，其中所述血液样品是外周血液样品本。
20.根据权利要求1-18中任一项所述的方法，其中所述血液样品是脐带血液样品本。
21.根据权利要求1-20中任一项所述的方法，其中所述工程化免疫细胞的混合群体包括约1x108至约1x1010个工程化细胞毒性NK细胞和约1x106至约1x108个工程化细胞毒性T细胞。
22.根据权利要求21所述的方法，其中与单独的NK细胞或T细胞相比，所述工程化免疫细胞的混合群体表现出对肿瘤细胞的快速细胞毒性作用，随后对肿瘤细胞的持久性细胞毒性作用增强。
23.根据权利要求21或22所述的方法，其中与单独的NK细胞或T细胞相比，所述工程化免疫细胞的混合群体对肿瘤细胞表现出更长的持续时间的持久细胞毒性作用。
24.一种工程化细胞毒性免疫细胞的混合群体，包括:
包含NK细胞的免疫细胞的第一亚群，
其中所...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘道峰，黎广南，JB特雷格，
申请(专利权)人：恩卡尔塔公司，
类型：发明
国别省市：美国;US
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。