一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒及其使用方法技术

本发明专利技术公开了一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒及其使用方法。由胶体金免疫层析检测试纸条和检测夹组成，检测夹由表面张力减弱装置和检测结果观察组件可拆卸的连接；检测夹为空心结构，检测试纸条可拆卸的放置在检测夹内。灵敏度高、特异性好、使用便捷，采样简单方便，检测速度快(15～20分钟)；不需要特殊人员或设备辅助，检测成本低，可实时监测感染状态；特别适用于大规模自我检测，可以促进新型冠状病毒筛查效率。所用胶体金颗粒小、假阳性极低；格栅型平台区用于唾液样本表面张力的减弱，能够快速准确的与胶体金颗粒标记得单抗结合形成复合物，实现后续检测目的。

【技术实现步骤摘要】
一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒及其使用方法
本专利技术涉及临床医学检
，具体涉及一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒及其使用方法。
技术介绍
新型冠状病毒检测目前有三种，分别为：核酸检测、抗体检测、抗原检测。三种检测方法的窗口期有所区别，核酸/抗体/抗原检测各有侧重，不能相互替代，应用多种方法联合检测，可有效缩短检测窗口期，提高阳性检出率，为各种可能的风险人群提供双重保障。现有新型冠状病毒病原体检测过度依赖核酸检测，且抗体/抗原检测试剂灵敏度和特异性还有限，因此，继续研究另一种检测方法与之互补，建立快速的新型冠状病毒S抗原的方法也迫在眉睫。另外，由于唾液及其他环境样本粘度大难以流入小孔，传统检测试剂盒无法做到唾液直接检测。胶体金免疫层析试纸条将胶体金免疫层析和单克隆抗体结合起来，既具有快速简便、准确直观等优点，同时也具有的良好特异性和敏感性。是目前应用最广泛的一种用于临床快速诊断的方法。
技术实现思路
基于上述技术问题，本专利技术采用“双抗夹心法”，使用两种抗原特异性抗体去识别和结合一个靶点抗原的不同表位的检测原理。目的是提供一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒及其使用方法。本专利技术保护的一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒，该检测试剂盒由胶体金免疫层析检测试纸条1和检测夹2组成，所述检测夹2由表面张力减弱装置21和检测结果观察组件22可拆卸的连接；所述胶体金免疫层析检测试纸条1包括PVC胶板11以及依次相互搭接粘贴在PVC胶板11上的样品垫12、胶体金垫13、包被抗体固相硝酸纤维素膜14和吸水垫15；所述检测夹2为空心结构，所述胶体金免疫层析检测试纸条1可拆卸的放置在检测夹2内，且所述胶体金免疫层析检测试纸条1上的包被抗体固相硝酸纤维素膜14正好对准检测结果观察组件22的观察窗口23处；所述样品垫12的上方为表面张力减弱装置21；所述检测试剂盒还包括与检测结果观察组件22配套使用的套管3。进一步的，所述胶体金免疫层析检测试纸条1宽度为2.5～3.5mm；长度为75～85mm。进一步的，所述胶体金垫13为单克隆抗体S003用胶体金颗粒标记后形成的复合物涂覆在玻璃纤维素膜上形成，其中，胶体金颗粒为粒径的5nm的橘红色。进一步的，所述包被抗体固相硝酸纤维素膜14内包被有检测线16和质控线17，其中，所述检测线16由单克隆抗体S001包被于硝酸纤维素膜上作为检测线16；所述质控线17用羊抗鼠HRP-IgG二抗包被于硝酸纤维素膜作为质控线17。优化的，所述试剂盒中采用的单克隆抗体对S001和S003由中国科学院西北高原生物研究所研发并生产，具体使用重组新型冠状病毒S1蛋白为免疫原，通过免疫balb/C小鼠，分离融合阳性脾成熟B细胞，使用小鼠腹水法制得。进一步的，所述样品垫12为吸滤纸、滤油纸或玻璃纤维膜；所述吸水垫15为吸水纸。进一步的，所述表面张力减弱装置21为格栅型平台区，所述格栅型平台区与观察窗口23处于同一水平面；所述检测结果观察组件22的端部为圆柱形密封结构。进一步的，所述观察窗口23为长60～88mm，宽30～50mm的长方形凹槽，凹槽的下边缘设有用于衬托胶体金免疫层析检测试纸条1的横向托板24。进一步的，上述检测试剂盒被包装在放入铝箔袋中封口；上述检测试剂盒检测包含新型冠状病毒Covid-19抗原的唾液或者环境样本或新型冠状病毒变异株抗原的唾液或者环境样本。本专利技术还保护的一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒的使用方法，具体包括如下步骤：表面张力减弱装置21直接伸进口腔取唾液样本，环境样本可以通过其他方式采集，采集后的唾液或者环境样本通过格栅型平台区的格栅条流到样品垫12上；若样品中含有新型冠病毒S抗原时，抗原与金标单克隆抗体S003结合形成复合物，导致胶体金颗粒在检测线聚集，出现肉眼可见的条带，复合物继续通过毛细血管作用流动与羊抗鼠IgG结合，在质控线17聚集，出现质控线；若样本中没有新型冠病毒S抗原的话，检测线16不会聚集胶体金颗粒，而质控线17的羊抗鼠IgG依然可与标记的单抗形成复合物引起胶体金颗粒聚集，出现红色条带。相比于现有的技术，本专利技术具有如下有益效果：本专利技术一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒，灵敏度为40pg/mL，高深圳市锦瑞生物科技有限公司的N抗原试剂盒55pg/mL的灵敏度，特异性好，使用便捷，采样简单方便，检测速度快(15～25分钟)；不需要特殊人员或设备辅助、检测成本低及可实时监测感染状态；特别适用于大规模自我检测，可以促进新型冠状病毒筛查效率。对英国新型冠状病毒变异株的灵敏度可达到10pg/mL；英国新型冠状病毒RBD区变异，对试剂盒的功能没有影响。试剂盒对真病毒敏感。试剂盒对新型冠状活病毒敏感，阳性样本检测为阳性的最低病毒滴度约为500～1000copies/mL。其中，具体装置中所用的胶体金溶液是自主研发的5nm橘红色胶体金，具有颗粒小、假阳性极低的优点。格栅型平台区，用于样本表面张力的减弱，能够快速，准确的与胶体金颗粒标记得单抗S003结合形成复合物，实现后续检测目的。附图说明图1为本专利技术试剂盒的结构示意图；图2为本专利技术剂盒的正面结构示意图；图3为本专利技术试剂盒的反面结构示意图；图4为本专利技术试剂盒的胶体金免疫层析检测试纸条的侧面结构示意图；图5为本专利技术试剂盒的胶体金免疫层析检测试纸条的俯视结构示意图；图6为本专利技术试剂盒的灵敏度测试结果；图7为用本专利技术试剂盒测试英国新型冠状病毒变异株的测试结果；图8为用本专利技术试剂盒测试新型冠状病毒疫苗稀释50倍后的检测结果；图9为用本专利技术试剂盒测试新型冠状病毒灭活疫苗稀释2500倍后的检测能力。图中，1、胶体金免疫层析检测试纸条；2、检测夹；3、套管；11、PVC胶板；12、样品垫；13、胶体金垫；14、抗体固相硝酸纤维素膜；15、吸水垫；16、检测线；17、质控线；21、表面张力减弱装置；22、检测结果观察组件；23、观察窗口；24、横向托板。具体实施方式下面将结合实施例对本专利技术的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒，该检测试剂盒由胶体金免疫层析检测试纸条1和检测夹2组成，检测夹2由表面张力减弱装置21和检测结果观察组件22可拆卸的连接；胶体金免疫层析检测试纸条1包括PVC胶板11以及依次相互搭接粘贴在PVC胶板11上的样品垫12、胶体金垫13、包被抗体固相硝酸纤维素膜14和吸水垫15；检测夹2为空心结构，胶体金免疫层析检测试纸条1可拆卸的放置在检测夹2内，且胶体金免疫层析检测试纸条1上的包被抗体固相硝酸纤维素膜14正好对准检测结果观察组件22的观察窗口23处；样品垫12的上方为表面张力减弱装置21；检测试剂盒还包括与检测结果观察本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒，其特征在于，该检测试剂盒由胶体金免疫层析检测试纸条(1)和检测夹(2)组成，所述检测夹(2)由表面张力减弱装置(21)和检测结果观察组件(22)可拆卸的连接；所述胶体金免疫层析检测试纸条(1)包括PVC胶板(11)以及依次相互搭接粘贴在PVC胶板(11)上的样品垫(12)、胶体金垫(13)、包被抗体固相硝酸纤维素膜(14)和吸水垫(15)；所述检测夹(2)为空心结构，所述胶体金免疫层析检测试纸条(1)可拆卸的放置在检测夹(2)内，且所述胶体金免疫层析检测试纸条(1)上的包被抗体固相硝酸纤维素膜(14)正好对准检测结果观察组件(22)的观察窗口(23)处；所述样品垫(12)的上方为表面张力减弱装置(21)；所述检测试剂盒还包括与检测结果观察组件(22)配套使用的套管(3)。/n

【技术特征摘要】
1.一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒，其特征在于，该检测试剂盒由胶体金免疫层析检测试纸条(1)和检测夹(2)组成，所述检测夹(2)由表面张力减弱装置(21)和检测结果观察组件(22)可拆卸的连接；所述胶体金免疫层析检测试纸条(1)包括PVC胶板(11)以及依次相互搭接粘贴在PVC胶板(11)上的样品垫(12)、胶体金垫(13)、包被抗体固相硝酸纤维素膜(14)和吸水垫(15)；所述检测夹(2)为空心结构，所述胶体金免疫层析检测试纸条(1)可拆卸的放置在检测夹(2)内，且所述胶体金免疫层析检测试纸条(1)上的包被抗体固相硝酸纤维素膜(14)正好对准检测结果观察组件(22)的观察窗口(23)处；所述样品垫(12)的上方为表面张力减弱装置(21)；所述检测试剂盒还包括与检测结果观察组件(22)配套使用的套管(3)。


2.根据权利要求1所述的一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒，其特征在于，所述胶体金免疫层析检测试纸条(1)宽度为2.5～3.5mm；长度为75～85mm。


3.根据权利要求1所述的一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒，其特征在于，所述胶体金垫(13)为单克隆抗体S003用胶体金颗粒标记后形成的复合物涂覆在玻璃纤维素膜上形成，其中，胶体金颗粒为粒径的5nm的橘红色。


4.根据权利要求1所述的一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒，其特征在于，所述包被抗体固相硝酸纤维素膜(14)内包被有检测线(16)和质控线(17)，其中，所述检测线(16)由单克隆抗体S001包被于硝酸纤维素膜上作为检测线(16)；所述质控线(17)用羊抗鼠HRP-IgG二抗包被于硝酸纤维素膜作为质控线(17)。


5.根据权利要求4所述的一种新型冠状病毒S抗原检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中采用的单克隆抗体对S001和S003由中国科学院西北高原生物研究所研发并生产，具体使用重组新...

【专利技术属性】
技术研发人员：江磊，
申请(专利权)人：中国科学院西北高原生物研究所，
类型：发明
国别省市：青海;63