一种负载靶基因siRNA的新型胞内响应纳米粒子及其制备方法技术

一种负载靶基因siRNA的新型胞内响应纳米粒子，包括包裹在靶基因siRNA外且在细胞质内谷胱甘肽浓度下分解的高分子聚合物PDSA，纳米粒子至少同时包载MGLL‑siRNA和CB2‑siRNA两种靶基因siRNA。利用能在胞质谷胱甘肽浓度下分解释放siRNA的纳米粒子，解决现有技术中siRNA传递的缺陷，能快速响应胞内谷胱甘肽，提高了siRNA传递效率。而纳米粒子同时包载MGLL‑siRNA和CB2‑siRNA则能实现沉默恶性肿瘤恶性表型基因的同时促进肿瘤相关巨噬细胞向抗癌表型重极化，敲低MGLL表达则能够直接作用于恶性肿瘤进行抑制，敲低CB2则促进肿瘤相关巨噬细胞向M1型重极化协同抗肿瘤。

【技术实现步骤摘要】
一种负载靶基因siRNA的新型胞内响应纳米粒子及其制备方法
本专利技术涉及生物医药
，更具体地，涉及一种负载靶基因siRNA的新型胞内响应纳米粒子及其制备方法。
技术介绍
RNA干扰技术(RNAinterference，RNAi)近年来发展迅速，在多种疾病的治疗中都得到应用，其中就包括癌症治疗上的应用。与现有肿瘤治疗技术中的小分子靶向药物相比，基于RNA干扰技术的靶基因siRNA对靶点的选择性会更好，能够特异性结合靶基因并下调靶基因表达，且不会影响细胞中其它正常基因的表达，毒副作用小；运用在肿瘤治疗中，就可以通过siRNA特异性下调促进肿瘤发生、进展的基因表达，从而达到治疗的目的。但现有的RNAi技术在临床转化时存在明显缺陷，即缺少低毒高效的载体将siRNA输送到病灶部位和细胞内。对于基于RNAi技术的癌症治疗，siRNA在输送过程需要克服一系列生理屏障，例如如何靶向肿瘤细胞、穿透肿瘤组织和细胞膜、从内涵体高效逃逸以及在细胞质内有效释放siRNA等；过程复杂、技术难度大、环节多，且成本高昂，并不稳定。虽然能通过传统的病毒载本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种负载靶基因siRNA的新型胞内响应纳米粒子，其特征在于，包括包裹在靶基因siRNA外且在细胞质内谷胱甘肽浓度下分解的高分子聚合物PDSA，所述纳米粒子至少同时包载MGLL-siRNA和CB2-siRNA两种靶基因siRNA。/n

【技术特征摘要】
1.一种负载靶基因siRNA的新型胞内响应纳米粒子，其特征在于，包括包裹在靶基因siRNA外且在细胞质内谷胱甘肽浓度下分解的高分子聚合物PDSA，所述纳米粒子至少同时包载MGLL-siRNA和CB2-siRNA两种靶基因siRNA。


2.根据权利要求1所述的一种负载靶基因siRNA的新型胞内响应纳米粒子，其特征在于，粒径分布范围为30～400nm，在细胞质内谷胱甘肽浓度下释放包载的靶基因siRNA。


3.根据权利要求2所述的一种负载靶基因siRNA的新型胞内响应纳米粒子，其特征在于，用于靶向作用癌变生物中肿瘤细胞和/或影响肿瘤增殖扩散的相关非肿瘤细胞的特异性基因，以杀伤肿瘤和/或抑制肿瘤生长和转移。


4.一种制备权利要求1至3任一项所述的负载靶基因siRNA的新型胞内响应纳米粒子的制备方法，其特征在于，包括步骤：
S1、将胱氨酸二甲酯盐酸盐加入至脂肪二酸与三乙胺的混合溶液中，合成PDSA高分子聚合物；
S2、基于纳米沉淀法利用PDSA溶液、靶基因siRNA水溶液制备由PDSA包载靶基因siRNA的纳米粒子；
S3、对步骤S2获取的纳米粒子进行检测，包括沉默靶基因检测，以获得具有应用价值的负载靶基因siRNA的新型胞内响应纳米粒子。


5.根据权利要求4所述的一种负载靶基因siRNA的新型胞内响应纳米粒子的制备方法，其特征在于，步骤S2具体包括：
S21、选取二甲基甲酰胺作为溶剂，分别配置PDSA和DSPE-PEG3000溶液；
S22、取PDSA溶液、DSPE-PEG3000溶液、靶基因siRNA水溶液，与两亲性阳离子溶液缓和，并在搅拌条件下逐滴加至去离子水中获得纳米溶液；
S23、将纳米溶液转移至超滤膜中，离心分离纳米粒子，使用去离子水洗涤两次后收...

【专利技术属性】
技术研发人员：许小丁，蔡佩娥，曹舒雯，
申请(专利权)人：中山大学孙逸仙纪念医院，
类型：发明
国别省市：广东;44