一种用于检测、鉴别猪伪狂犬病毒Ⅰ型和Ⅱ型的引物组合、试剂盒及方法技术

本发明专利技术公开了用于检测、鉴别猪伪狂犬病毒Ⅰ型和Ⅱ型的引物组合、试剂盒及方法。所述引物组合包括：上游引物Ⅰ：5’‑GAAGCCCCCGCGGAACAA‑3’，上游引物Ⅱ：5’‑CGCGGCCTCCACGCCCGC‑3’，下游引物：5’‑GCGAGGGAGGCGTTGGCG‑3’，其中，上游引物Ⅰ与下游引物配合用于扩增Ⅰ型猪伪狂犬病毒获得283bp序列，上游引物Ⅱ与下游引物配合用于扩增Ⅱ型猪伪狂犬病毒获得351bp序列。本研究通过生物信息学分析方法明确可用于基因分型的gC靶基因，并首次利用AS‑PCR原理来设计分型引物，并通过实验筛选到特异性分型的上游引物，而共用保守下游引物，进而减少了体系中的引物种类与数量，降低错配的可能，从而提高扩增效率，最终建立了灵敏度为10

【技术实现步骤摘要】
一种用于检测、鉴别猪伪狂犬病毒Ⅰ型和Ⅱ型的引物组合、试剂盒及方法
本专利技术涉及生物技术检测
，特别是涉及用于检测、鉴别猪伪狂犬病毒Ⅰ型和Ⅱ型的引物组合、试剂盒及方法。
技术介绍
伪狂犬病(Pseudorabies,PR)是由伪狂犬病毒(PseudorabiesVirus,PRV)感染猪或其他动物引起的一种急性传染病。1902年匈牙利学者AladarAujeszky首次报道本病，故又称奥耶斯基氏病(Aujeszky'sdisease,AD)。PRV属于疱疹病毒科，α疱疹病毒亚科，水泡疱疹病毒属成员。PRV病毒颗粒呈球形，大小约为150-180nm，主要由核芯、核衣壳、被膜以及囊膜组成。PRV基因组为双链DNA，全长约150kb，G+C含量高达70％，含有至少70个基因，编码约100种病毒蛋白。猪是PRV的自然宿主，大部分驯养脊椎动物和部分野生动物对PRV易感，非自然宿主感染后主要表现为神经症状，最后发展为死亡。猪感染PRV后临床症状较多样，发病情况与致死率与感染猪的年龄、健康状况、毒株强弱及感染剂量相关。初生仔猪感染PRV本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.用于检测、鉴别猪伪狂犬病毒Ⅰ型和Ⅱ型的引物组合，其特征在于，包括：/n上游引物Ⅰ：5’-GAAGCCCCCGCGGAACAA-3’，/n上游引物Ⅱ：5’-CGCGGCCTCCACGCCCGC-3’，/n下游引物：5’-GCGAGGGAGGCGTTGGCG-3’，/n其中，上游引物Ⅰ与下游引物配合用于扩增Ⅰ型猪伪狂犬病毒获得283bp序列，上游引物Ⅱ与下游引物配合用于扩增Ⅱ型猪伪狂犬病毒获得351bp序列。/n

【技术特征摘要】
1.用于检测、鉴别猪伪狂犬病毒Ⅰ型和Ⅱ型的引物组合，其特征在于，包括：
上游引物Ⅰ：5’-GAAGCCCCCGCGGAACAA-3’，
上游引物Ⅱ：5’-CGCGGCCTCCACGCCCGC-3’，
下游引物：5’-GCGAGGGAGGCGTTGGCG-3’，
其中，上游引物Ⅰ与下游引物配合用于扩增Ⅰ型猪伪狂犬病毒获得283bp序列，上游引物Ⅱ与下游引物配合用于扩增Ⅱ型猪伪狂犬病毒获得351bp序列。


2.如权利要求1所述的引物组合在检测、鉴别猪伪狂犬病毒Ⅰ型和Ⅱ型中的应用。


3.一种用于检测、鉴别猪伪狂犬病毒Ⅰ型和Ⅱ型的试剂盒，其特征在于，包含权利要求1所述引物组合。


4.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，还包括阳性对照，所述阳性对照包括：至少包含如SEQIDNo.1所示序列的Ⅰ型阳性对照，和至少包含如SEQIDNo.2所示序列的Ⅱ型阳性对照。


5.一种非医学诊断为目的的检测、鉴别猪伪狂犬病毒Ⅰ型和Ⅱ型的方法，其特征在于，使用权利要求1所述引物组合，所述方法包括以下步骤：使用上游引物Ⅰ与下游引物配合扩增样本，若扩增出283bp产物，则样本中含有Ⅰ型猪伪狂犬病毒；使用上游引物Ⅱ与下游引物配合扩增样本，若扩增出351bp产物，则样...

【专利技术属性】
技术研发人员：顾金燕，董伟仁，颜焰，周继勇，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33