一种植物叶片基因组DNA快速提取方法技术

本发明专利技术公开了一种植物叶片基因组DNA快速提取方法。本发明专利技术所提供的提取植物叶片基因组DNA的方法包括：将植物叶片置于液氮中预冷，用组织研磨杵捣碎叶片组织；加入提取缓冲液，95‑100℃加热裂解植物细胞，离心后上清液为植物叶片基因组DNA粗提液；所述提取缓冲液为pH 7.0‑8.0的10‑20mM Tris‑HCl。本发明专利技术操作简单，大幅减少了提取实验所用的时间，适用于大量植物叶片样品的基因组DNA提取。更重要的是，本发明专利技术所用试剂成本低廉，容易配制；且无需有毒有害试剂，对操作人员和操作环境安全无毒。本发明专利技术的方法适用性广，能应用于多种植物。

【技术实现步骤摘要】
一种植物叶片基因组DNA快速提取方法
本专利技术涉及分子生物学
，具体涉及一种植物叶片基因组DNA快速提取方法。
技术介绍
基因组DNA是生物遗传信息的载体。以基因组DNA为模板，通过PCR扩增获取基因组DNA信息是研究基因结构和功能的必要步骤。目前，实验室常用的植物基因组DNA提取方法主要有三种：SDS提取法、CTAB提取法和高盐低pH提取法。这三种方法操作繁琐，提取过程中需使用SDS、CTAB、β-巯基乙醇、三氯甲烷、异戊醇、异丙醇等有毒有害的试剂。市场上常见的植物基因组DNA提取试剂盒，一般利用膜吸附柱或磁珠分离基因组DNA。虽然试剂盒法在一定程度上简化了操作步骤，但仍然略显繁琐，更适用于少量样本的植物基因组DNA提取，无法满足大量样本的基因组提取实验。此外，试剂盒法虽然减少了有毒有害试剂的使用量，但仍然无法完全避免使用这些试剂。
技术实现思路
为了有效解决上述技术问题，本专利技术旨在提供一种简单、无毒、高效，且对实验室设备条件要求不高的快速提取植物基因组DNA的方法。第一方面，本专利技术要求保护一种提取本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种提取植物叶片基因组DNA的方法，包括如下步骤：/n(A)将植物叶片置于液氮中预冷，用组织研磨杵捣碎叶片组织；/n(B)向步骤(A)处理后的样品中加入提取缓冲液，95-100℃加热裂解植物细胞，离心后上清液为植物叶片基因组DNA粗提液；/n所述提取缓冲液为pH 7.0-8.0的10-20mM Tris-HCl。/n

【技术特征摘要】
1.一种提取植物叶片基因组DNA的方法，包括如下步骤：
(A)将植物叶片置于液氮中预冷，用组织研磨杵捣碎叶片组织；
(B)向步骤(A)处理后的样品中加入提取缓冲液，95-100℃加热裂解植物细胞，离心后上清液为植物叶片基因组DNA粗提液；
所述提取缓冲液为pH7.0-8.0的10-20mMTris-HCl。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(A)中，所述预冷的时间为至少10秒。


3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：步骤(B)中，所述加热的时间为5-10分钟；和/或
步骤(B)中，所述离心为12000g离心5-10分钟。


4.根据权利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于：步骤(B)中，所述提取缓冲液的用量与步骤(A)中所述植物叶片的用量配比为200μL：50-100mg。


5.根据权利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于：所述植物叶片为1月龄叶片或2月龄叶片。

【专利技术属性】
技术研发人员：秦国政，王威浩，王豫颖，王柯茹，
申请(专利权)人：中国科学院植物研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11