乳腺或乳腺癌组织脱细胞基质及其制备方法和用途技术

技术编号:29386721 阅读:33 留言:0更新日期:2021-07-23 22:19
本发明专利技术公开了一种乳腺或乳腺癌组织脱细胞基质及其制备方法和用途,属于生物医学工程领域。本发明专利技术的方法步骤如下:1)冰冻乳腺或乳腺癌组织,切成膜片状;2)用液氮反复冻融2~4次;3)在裂解液中静置或摇动12~24h后,洗去裂解液;4)用核酸酶去除残存细胞核成分,流水冲洗,缓冲液漂洗;5)冻干,包装消毒。本发明专利技术的方法去细胞效果好,多细胞外基质纤维伤害小。本发明专利技术的乳腺或乳腺癌组织脱细胞基质可诱导癌细胞的上皮间质转化,基于该原理可制备癌细胞上皮间质转化的细胞模型,应用前景良好。

【技术实现步骤摘要】
乳腺或乳腺癌组织脱细胞基质及其制备方法和用途
本专利技术属于生物医学工程领域。
技术介绍
脱细胞基质(ECM),也叫去细胞基质,是将组织内细胞去除后,得到的固型物,可用于制作外科手术用补片或组织工程中种子细胞生长的载体。目前已经有多种器官来源的脱细胞基质,包括肝脏、肺、心脏、膀胱、真皮等等器官来源。由于组织的构造,细胞排列、结构等不同,制备各种器官的脱细胞基质的方法不同。例如:张沛灵等报道了一种软骨的脱细胞基质制备方法,包括用0.5%胰酶酶解24h,期间更换胰酶,然后再用1U/mL核酸酶酶解4h,再使用1%的TritonX-100处理24h(张沛灵等,软骨脱细胞基质仿生支架的制备及其对骨髓基质干细胞成软骨分化的影响,组织工程与重建外科,2021年2月第17卷第1期)。专利申请CN111494718A报道了一种肺的脱细胞基质的制备方法,包括先从气管灌注保护剂,再从血管灌注去垢剂,去垢剂的选择是先灌注SLES,再灌注TritonX-100。乳腺及乳腺癌组织具有其独特的构造,腺体致密程度和脂肪含量存在个体差异,且乳腺癌是一种高度异质性本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种乳腺或乳腺癌组织脱细胞基质的制备方法,其特征在于,步骤如下:/n1)冰冻乳腺或乳腺癌组织,切成膜片状;/n2)用液氮反复冻融2~4次;/n3)在裂解液中裂解12~24h后,洗去裂解液;/n4)用核酸酶消化去除残存细胞核成分,流水冲洗,缓冲液漂洗;/n5)冻干,包装消毒;/n所述裂解液为体积比为0.25%~1%的Triton X-100及10~30mM NH

【技术特征摘要】
1.一种乳腺或乳腺癌组织脱细胞基质的制备方法,其特征在于,步骤如下:
1)冰冻乳腺或乳腺癌组织,切成膜片状;
2)用液氮反复冻融2~4次;
3)在裂解液中裂解12~24h后,洗去裂解液;
4)用核酸酶消化去除残存细胞核成分,流水冲洗,缓冲液漂洗;
5)冻干,包装消毒;
所述裂解液为体积比为0.25%~1%的TritonX-100及10~30mMNH4OH溶液的混合液。


2.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述裂解液为体积比为0.5%的TritonX-100及20mMNH4OH溶液的混合液。


3.如权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤4)所述核酸酶是DNaseI。


4.如权利要求3所述的方法,其特征在于:步骤4)中DNaseI的浓度为100mg/ml;
和/或,步骤4)中核酸酶消化时间为3h;<...

【专利技术属性】
技术研发人员:谭秋雯吕青徐莉张俊慧解慧琪
申请(专利权)人:四川大学华西医院
类型:发明
国别省市:四川;51

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