一种体外模拟细胞因子释放对间接靶细胞表型影响的方法技术

本发明专利技术为一种体外模拟细胞因子释放对间接靶细胞表型影响的方法，涉及免疫细胞研究领域，特别是CAR‑T细胞与其对应靶细胞共孵育时其细胞因子对间接靶细胞表型影响的体外研究。CRS体外模型是在Corining Transwell 12孔板(0.4μm孔径，12mm底面积)中，上层隔室加入CART细胞(A细胞)和对应靶细胞(B细胞)，下层12孔板中加入间接靶细胞(C细胞，包括HUVEC，PBMCs，CD34+磁珠分选后的G‑PBMCs)。小于0.4μm孔径物质可自由通过(如细胞因子)，而细胞无法自由通过，从而模拟CAR‑T细胞与肿瘤细胞接触时释放细胞因子对HUVEC等间接靶细胞表型的影响。

【技术实现步骤摘要】
一种体外模拟细胞因子释放对间接靶细胞表型影响的方法
本专利技术涉及免疫治疗中细胞因子释放研究领域，特是CAR-T细胞与其对应靶细胞共孵育时其细胞因子释放对间接靶细胞的体外研究。
技术介绍
自2010年以后，嵌合抗原受体(Chimericantigenreceptormodified-Tcells,CAR-T)疗法取得不断突破，在急性淋巴细胞白血病，B细胞淋巴瘤，多发性骨髓瘤、等多种血液肿瘤和部分实体瘤显示出良好的疗效。2017年，美国FDA批准两项CAR-T药物上市。CAR-T广泛应用的同时也带来了许多不良反应，其中最常见最严重的是细胞因子释放综合症(Cytokinereleasesyndrome,CRS)。CRS是在90年代T细胞单抗OKT3治疗中第一次定义的。目前大多数临床常用的单克隆抗体CRS发生率较低，但在基于T细胞的免疫疗法中发生率相当高，这些疗法多在临床早起发展阶段，包括双特异性抗体(dual-affinityretargetingantibodies,DART),T-cellreceptormodified-Tcells(TCR-本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种在体外模拟CRS对其它细胞影响的系统，具有上层隔室和下层隔室，上下层隔室之间通过微孔膜隔开，其特征再于上层隔室中A细胞B细胞共培养，在下层隔室中放入C细胞。/n

【技术特征摘要】
1.一种在体外模拟CRS对其它细胞影响的系统，具有上层隔室和下层隔室，上下层隔室之间通过微孔膜隔开，其特征再于上层隔室中A细胞B细胞共培养，在下层隔室中放入C细胞。


2.如权利要求1所述的系统，其特征在于：
A细胞选自靶向CD123CD19，CD20，CD22，BCMA，MUC-1之一的CAR-T细胞。


3.如权利要求1或2所述的系统，其特征在于：B细胞为A细胞所对应靶细胞，为靶抗原阳性细胞或靶抗原阴性细胞，选自以下细胞或细胞系之一：白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤、肝癌、肺癌、肾癌的细胞系及原代细胞，或人体正常组织原代细胞系及原代细胞。


4.如权利要求3所述的系统，其特征在于：B细胞为阳性对照组或实验组，选自人白血病细胞系MOLM-13、原代AML细胞、原代AML-2、原代AML-3。


5.如权利要求1所述的系统，其特征在于：C细胞选自在细胞因子释放综合症中参与或受影响的单核细胞，巨噬细胞，T细胞，B细胞，平滑肌细胞，基质细胞，肿瘤细胞。


6.如权利要求5所述的系统，其特征在于：C细胞为间接靶细胞，选自HUVEC，PBMCs，CD34+G-PBMCs。


7.如权利要求1所述的系统，其特征在于：微孔膜的孔径小于3μm。


8.使用如权利要求1-7之一模拟CRS对其它细胞影响的系统的方法，其特征在于包括以下步骤：
1)将A细胞与B细胞在上层隔室共孵育；
2)...

【专利技术属性】
技术研发人员：张斌，孙耀，赵龙，
申请(专利权)人：中国人民解放军总医院第五医学中心，
类型：发明
国别省市：北京;11