棉花GraiRGA转录因子特异识别抗体制备方法技术

本发明专利技术涉及生物信息学与分子遗传学技术领域，尤其涉及棉花GraiRGA转录因子特异识别抗体制备方法，通过分析棉花GraiRGA转录因子氨基酸序列后选取了长度为318个氨基酸的序列，经原核表达、新西兰大白兔免疫进行抗血清制备，再经抗原亲和纯化后，可以得到GraiRGA转录因子的特异结合抗体。本发明专利技术制得的GraiRGA抗体可用于GraiRGA转录因子的亚细胞定位研究，也可通过染色质免疫沉淀技术(ChIP)进行该转录因子在细胞中的染色质作用位点以及互作蛋白分析，为该转录因子介导的棉花抗逆机制研究提供重要工具，具有较高的应用价值和潜力。具有较高的应用价值和潜力。

【技术实现步骤摘要】
棉花GraiRGA转录因子特异识别抗体制备方法


[0001]本专利技术涉及生物信息学与分子遗传学
，尤其涉及棉花GraiRGA转录因子特异识别抗体制备方法。

技术介绍

[0002]转录因子即能结合在特异的染色质序列位点(即顺式调控元件)的蛋白质，亦被称为反式作用因子。通过与顺式作用元件相互结合作用，或与其他调控因子蛋白的相互作用，来调控基因转录，借以行使其调控生物体生长发育、信号转到以及胁迫应答等生物学功能。RGA(repressor of GA1
‑
3 mutant)属于植物特有的GRAS转录因子家族，该蛋白家族的成员具有其特有的GRAS结构域，部分成员还具有DELLA蛋白结构，该结构与植物的抗逆机制有着密切的联系，是植物逆境响应机制研究及抗逆材料培育的重要目标基因。
[0003]开展转录因子介导的生物学功能研究就要对转录因子进行深入分析，包括其在细胞中的分布、染色质结合位点以及互作蛋白等分析。其中，一个重要的研究手段是制备转录因子蛋白的特异抗体，通过应用特异识别抗体，来示踪并开展互作分析，解析其功能机制。但是本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.棉花GraiRGA转录因子特异识别抗体制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、首先利用生物信息学将棉花GraiRGA转录因子的基因的核苷酸序列翻译为氨基酸序列；根据氨基酸序列进行蛋白结构分析，确定蛋白非跨膜区，结合抗原表位分析以及亲水性分析，最终确定抗原多肽序列；步骤2、根据抗原序列构建原核表达载体，并进行原核表达：步骤3、将原核表达多肽作为抗原免疫新西兰大白兔；步骤4、收集免疫后动物血清，进行抗原亲和纯化，获得抗体；步骤5、抗体经ELISA验证，显示抗体可特异识别棉花GraiRGA转录因子，证实抗体制备成功。2.根据权利要求1所述的棉花GraiRGA转录因子特...

【专利技术属性】
技术研发人员：王凯，韩金磊，余光润，张会，
申请(专利权)人：南通大学，
类型：发明
国别省市：