一种粗糠树组织培养快速生根的方法技术

本发明专利技术属于粗糠树繁育技术领域，具体涉及一种粗糠树组织培养快速生根的方法。本发明专利技术提供了一种粗糠树组织培养快速生根的方法，该方法组织培养周期短，生产成本低：与常见快繁技术相比，生根速度是粗糠树扦插快繁的两倍，而与常见木本植物组织培养周期相比，生根培养过程简单，无需愈伤组织脱分化、再分化培养，培养时间大大缩短。时间大大缩短。时间大大缩短。

【技术实现步骤摘要】
一种粗糠树组织培养快速生根的方法


[0001]本专利技术属于粗糠树繁育
，具体涉及一种粗糠树组织培养快速生根的方法。

技术介绍

[0002]粗糠树(Ehretia macrophylla Wall.)落叶乔木，树皮灰色，小枝褐色，具皮孔；叶面绿色，被糙伏毛，背面色淡，无毛或近无毛；伞房状圆锥花序顶生，花多，芳香，花梗密被短毛，花萼绿色，花冠白色或略带黄，花丝白色，花药黄色，花柱淡绿色；核果绿色转黄色，近球形，花果期3～7月。粗糠树具有较强的吸附灰尘作用，是城市绿化的优良树种，随着国家储备和森林廊道及生态建设工程的发展，粗糠树苗木需求量也越来越大。
[0003]目前，粗糠树的繁育方式主要包括扦插、播种等，例如：耿翠芳等人首次采用播种的形式进行育苗并获得成功(耿翠芳,王利.粗糠树播种育苗技术[J].中国林副特产,2005,000(006):32
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33.)，路买林等人对粗糠物候期、生物学特性，抗逆性、进行了观测记录，对优良单株进行了标记、繁育(路买林,万卉敏.粗糠树种质资源收集及育苗技术研究[J].河南林业科技,2018,v.38；No.139(001):22
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23.)。随后路买林等人又深入研究了不同播种时间、不同的基质、不同种子处理对粗糠树发芽的影响(路买林,徐海霞.粗糠树播种及幼苗移栽关键技术优化研究[J].河南林业科技,2020.)。郝改莲以成年粗糠树母树根为材料，设计了不同粗度和长度的根穗进行根插育苗试验，结果表明粗糠树的根易形成愈伤组织，极易形成根蘖，根插育苗是较好的营养繁育方法(郝改莲.粗糠树的扦插育苗技术[J].濮阳职业技术学院学报,2014,27(02):154
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155.)。
[0004]与传统的繁殖方式相比，组织培养可以不受时间、空间限制且增殖系数高，可以在较短时间内，大量快速地培养无菌苗。但从目前的研究进展来看，关于粗糠树繁育技术的研究还处于刚刚开展的时期，传统的繁育技术仅少数人有所涉及，而利用组织培养技术进行粗糠树的繁育还处于空白。粗糠树所属的紫草科中，已进行过组织培养研究的物种基本都是草本或灌木植物，例如紫草(周立刚,郑光植,徐纯.滇紫草愈伤组织培养的初步研究[J].云南植物研究,1991(02):237
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240.张倩怡,张丽莎,郑宏丽,李永德,姜长阳.紫草的组织培养及快速繁殖研究[J].河南科学,2009,27(01):55
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58.)、蓝蓟(吴月亮.蓝蓟的组织培养与快速繁殖[J].植物生理学通讯,2008(02):304.)、琉璃苣(张红梅,李思颖,蔡宝宏,杨文平,李明,张红,吴鹏.琉璃苣体外培养技术研究[J].安徽农业科学,2014,42(21):6941
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6977.)、轮冠木(Martin K.Rapid in vitro multiplication and ex vitro rooting of Rotula aquatica Lour.a rare rhoeophytic woody medicinal plant[J].Plant Cell Reports,2003,21(5):415
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420.)。
[0005]据资料显示，扦插最快约50天出现不定根，扦插生根率若为100％，也只能做到一枝一苗，而组织培养技术能实现大规模、工厂化育苗。但是，木本植物的生理构造远比草本植物复杂，生长繁殖周期远远长于草本植物，筛选适宜外源激素浓度及培养条件，对扩繁意义重大。

技术实现思路

[0006]为了克服现有技术的不足和缺点，本专利技术的目的在于提供一种粗糠树组织培养快速生根的方法，该方法具有周期短、成本低、生根速度快、生根率高和增殖系数高等优点。
[0007]本专利技术的目的通过下属技术方案实现：
[0008]一种粗糠树组织培养快速生根的方法，包含如下步骤：
[0009](1)剪切粗糠枝条，选取粗糠树当年生春季4月初的幼嫩带芽茎段作为外植体并进行预处理和消毒处理；
[0010](2)将步骤(1)中消毒处理后的外植体接种于生根培养基上，在培养温度为22
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25℃、光照强度为1800
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2400lx，每日光照12h的条件下培养至不定根长出；
[0011](3)生根培养40
‑
50天后，剪取步骤(2)中培养基上的带芽茎段接种于新的生根培养基中，进行二次生根培养，以扩大繁殖数量；
[0012](4)将步骤(2)或步骤(3)生根培养后的组培苗进行炼苗移栽；
[0013]步骤(1)中所述的幼嫩带芽茎段优选为长度为3
‑
4cm、带2个芽的幼嫩带芽茎段；
[0014]步骤(1)中所述的预处理优选为将粗糠树当年生春季4月初的幼嫩带芽茎段用流水冲洗4h；
[0015]步骤(1)中所述的消毒处理的具体操作优选为：
[0016]将粗糠树当年生春季4月初的幼嫩带芽茎段用体积分数为75％的酒精浸洗20
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40s，再用0.1wt.％的氯化汞溶液消毒8min，无菌水冲洗3
‑
4次；无菌水冲洗后，吸干表面水分并切去切口与消毒液的接触部分；
[0017]步骤(2)中所述的生根培养基为：WPM培养基+IBA 1.0mg/L+蔗糖30g/L+AC 3g/L+琼脂4.9g/L，pH＝5.8；
[0018]步骤(3)中所述的带芽茎段的长度优选为3
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4cm；
[0019]步骤(3)中所述的生根培养基为：WPM培养基+IBA 1.0mg/L+蔗糖30g/L+AC 3g/L+琼脂4.9g/L，pH＝5.8；
[0020]步骤(3)中所述的二次生根培养的条件优选为：培养温度为22
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25℃，光照强度为1800
‑
2400lx，每日光照12h；
[0021]步骤(4)中所述的组培苗优选生有3
‑
4条、3
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5cm长的新根；
[0022]步骤(4)中所述的炼苗移栽的具体操作优选为：
[0023]将生根后的幼苗移至温室，置于自然光照下7
‑
10天，使幼苗健壮并木质化，壮苗后开瓶炼苗1
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2天，以便适应外界环境；移栽前用水洗净根部培养基，洗去根部培养基后，移栽到高锰酸钾消毒过的珍珠岩中，移栽后即时浇水；移栽后，环境湿度保持在80
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90％，环境温度为20
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26℃，前期需要适当遮光，后期要多见阳光；
[0024]本专利技术的原理：
[0025]为快速繁殖粗糠树，本专利技术以不同时间的粗糠树幼嫩茎段、新芽为外植体材料，以MS、1/2MS、WPM培养基为基础培养基，同时添加NAA、IAA、IBA等外源激素，开展组织培养实验，最后确定快速生根的外植体取材类型及时间、消毒条件、基础培养基种类、激素种类及浓度等。多次结果表本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种粗糠树组织培养快速生根的方法，其特征在于包含如下步骤：(1)剪切粗糠枝条，选取粗糠树当年生春季4月初的幼嫩带芽茎段作为外植体并进行预处理和消毒处理；(2)将步骤(1)中消毒处理后的外植体接种于生根培养基上，在培养温度为22
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25℃、光照强度为1800
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2400lx，每日光照12h的条件下培养至不定根长出；(3)生根培养40
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50天后，剪取步骤(2)中培养基上的带芽茎段接种于新的生根培养基中，进行二次生根培养，以扩大繁殖数量；(4)将步骤(2)或步骤(3)生根培养后的组培苗进行炼苗移栽。2.根据权利要求1所述的粗糠树组织培养快速生根的方法，其特征在于：步骤(1)中所述的的幼嫩带芽茎段为长度为3
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4cm、带2个芽的幼嫩带芽茎段。3.根据权利要求1所述的粗糠树组织培养快速生根的方法，其特征在于：步骤(1)中所述的预处理为将粗糠树当年生春季4月初的幼嫩带芽茎段用流水冲洗4h。4.根据权利要求1所述的粗糠树组织培养快速生根的方法，其特征在于：步骤(1)中所述的消毒处理的具体操作为：将粗糠树当年生春季4月初的幼嫩带芽茎段用体积分数为75％的酒精浸洗20
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40s，再用0.1wt.％的氯化汞溶液消毒8min，无菌水冲洗3
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4次；无菌水冲洗后，吸干表面水分并切去切口与消毒液的接触部分。5.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：王建，殷兆晴，王朝阳，艾丹，陆晓雨，王鑫，徐睿，张孟仁，曹玲，
申请(专利权)人：河南林业职业学院，
类型：发明
国别省市：