一种液质联用检测头发中抗癫痫药物及其代谢物的方法技术

本发明专利技术属于药物及其代谢物检测技术领域，具体涉及一种液质联用检测头发中抗癫痫药物及其代谢物的方法。本发明专利技术提供一种系统，通过检测或输入头发中抗癫痫药物或其代谢物的含量，判断抗癫痫药物是否用量超量或不足。本发明专利技术的检测方法包括如下步骤：(1)对头发样品进行预处理，得到待测溶液；(2)采用液相色谱

【技术实现步骤摘要】
一种液质联用检测头发中抗癫痫药物及其代谢物的方法


[0001]本专利技术属于药物及其代谢物检测
，具体涉及一种液质联用检测头发中抗癫痫药物及其代谢物的方法。

技术介绍

[0002]癫痫作为常见的慢性神经系统疾病，主要通过抗癫痫药物进行治疗。足量足疗程合理用药时对控制癫痫发作尤为重要，目前主要通过静脉采血检测患者的血浆/血清抗癫痫药物(或其代谢物)浓度，但静脉采血有创，仅反映当前体内药物浓度水平，对于伴随特殊疾病采血困难者、儿童、妊娠期妇女和老年人等特殊人群更需要定期到医院抽血测药物浓度。因此，本领域需要开发一种更加简单、灵敏的抗癫痫药物(或其代谢物)浓度的检测方法，以满足患者不便采血情况下的检测需求。
[0003]头发可居家采集，采样过程无创、无痛，且头发可常温运输与保存，头发生长缓慢，从头皮至远端不同节段的头发可反映患者不同时期的用药情况。现有技术中，文献“液相色谱
‑
串联质谱法测定头发中11种阿片类生物碱，药学学报，2011，46(12)：1501
‑
1506”提供了一种液相色谱质谱联用，检测头发中的海洛因,吗啡,单乙酰吗啡等11种阿片类生物碱的技术方案。
[0004]但是，头发中包含的成分非常复杂，而服用抗癫痫药物的人头发中的抗癫痫药物(或其代谢物)含量又是极低的。若要实现将上述液相色谱质谱联用联用检测头发样品的方法用于抗癫痫药物(或其代谢物)的检测，如何有效分离头发中抗癫痫药物(或其代谢物)与其他干扰成分是一个非常困难的问题。

技术实现思路
r/>[0005]针对现有技术的缺陷，本专利技术提供一种液质联用检测头发中抗癫痫药物及其代谢物的方法，目的在于：提供简便、灵敏的检测方法，对头发中抗癫痫药物进行检测，从而反映出受试者长期用药情况。
[0006]一种抗癫痫药物使用监测系统，包括计算机设备，所述计算机设备用于执行包括如下步骤的计算机程序：
[0007]a、检测或输入头发中抗癫痫药物或其代谢物的含量，所述抗癫痫药物包括左乙拉西坦、拉莫三嗪或奥卡西平中的至少一种，所述抗癫痫药物的代谢物选自10
‑
羟基
‑
卡马西平；
[0008]b、当左乙拉西坦的含量超过2.5μg/mg、拉莫三嗪的含量超过1μg/mg、奥卡西平的含量超过0.05μg/mg或10
‑
羟基
‑
卡马西平的含量超过1.75μg/mg，提示超量用药；
[0009]c、当左乙拉西坦的含量低于0.5μg/mg、拉莫三嗪的含量低于0.125μg/mg、奥卡西平的含量低于0.002μg/mg或10
‑
羟基
‑
卡马西平的含量低于0.15μg/mg，提示补充用药。
[0010]本专利技术还提供一种液质联用检测头发中抗癫痫药物及其代谢物的方法，包括如下步骤：
[0011](1)对头发样品进行预处理，得到待测溶液；
[0012](2)采用液相色谱
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质谱联用的方法检测对头发中抗癫痫药物及其代谢物的浓度进行检测；所述色谱条件为：流动相A为0.1
‑
1wt.％的甲酸和5
‑
10mmol/L乙酸铵的水溶液，流动相B为体积比(300
‑
700):(300
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700):1的乙腈
‑
甲醇
‑
甲酸溶液为；色谱柱为C18柱。
[0013]优选的，步骤(1)中，所述预处理具体包括如下步骤：
[0014](1.1)将头发样品清洗后晾干；
[0015](1.2)将头发样品研磨成粉末，孵育；
[0016](1.3)取孵育后的上清液加入含待测抗癫痫药物同位素内标或其代谢物同位素内标的乙腈溶液，震荡离心，取离心后的有机层上清液加入流动相A，即得待测溶液。
[0017]优选的，步骤(1.1)中，所述清洗过程为用超纯水洗涤2
‑
4次和丙酮清洗1
‑
2次，优选为超纯水洗涤3次和丙酮清洗1次。
[0018]优选的，步骤(1.2)中，所述孵育在甲醇中进行，优选的所述粉末与甲醇的用量比例为10
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30mg:1ml，优选为20mg:1ml；和/或，所述孵育的条件为40℃
‑
65℃下孵育1
‑
12h，优选为60℃下孵育4h。
[0019]优选的，步骤(1.3)中，所述乙腈溶液中抗癫痫药物同位素内标或其代谢物同位素内标的浓度为30
‑
40ng/ml，优选为20ng/ml；和/或，所述孵育后的上清液与所述乙腈溶液的用量比例为20ul:80
‑
160ul，优选为20ul:80ul；和/或，所述有机层上清液与流动相A的用量比例为40ul:160
‑
360ul，优选为40ul:160ul。
[0020]优选的，所述色谱条件还包括：流动相A为0.1wt.％的甲酸和5mmol/L乙酸铵的水溶液，流动相B为体积比500:500:1的乙腈
‑
甲醇
‑
甲酸溶液；和/或，色谱柱为Kinetex analytical column 5μm C18 100A,100
×
2.1mm或ACQUITY UPLC BEH C18 50mm
×
2.1mm
×
1.7μm；和/或，流速为0.3
‑
0.45mL/min，优选为0.4mL/min；和/或，进样量为5
‑
10μL优选为7.5μL；和/或，柱温为35℃
‑
40℃，优选为40℃；
[0021]和/或，梯度洗脱程序为：
[0022][0023]和/或，所述质谱的质谱条件为：离子源为ESI，扫描类型为MRM，质谱检测模式为正离子模式。
[0024]优选的，所述抗癫痫药物及其代谢物的浓度通过标准曲线法得到。
[0025]优选的，所述标准曲线法的浓度标准工作溶液通过如下方法制备：
[0026](Ⅰ)配制所述抗癫痫药物及其代谢物的对照品配制成溶液，并稀释成系列浓度；
[0027](Ⅱ)取未服用抗癫痫药物的正常人的头发样品，按照与步骤(1)相同的方法进行预处理，制成空白生物基质样品；
[0028](Ⅲ)将所述步骤(Ⅰ)中的系列浓度的对照品溶液分别与步骤(Ⅱ)得到的空白生物基质样品混合，制成含药生物基质样品，加入含待测物同位素内标的乙腈，分离上清液，取上清液与流动相A混合得到含有系列浓度的对照品的工作溶液；
[0029]所述工作溶液用于获得标准曲线。
[0030]优选的，步骤(Ⅰ)中，所述溶液的配制和稀释采用的溶剂为水、DMSO或乙腈中的至少一种；和/或，步骤(Ⅲ)中，所述对照品溶液与空白生物基质样品按照体积比1:(5
‑
25)混合，体积比优选为1:19；和/或，所述含本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗癫痫药物使用监测系统，其特征在于：包括计算机设备，所述计算机设备用于执行包括如下步骤的计算机程序：a、检测或输入头发中抗癫痫药物或其代谢物的含量，所述抗癫痫药物包括左乙拉西坦、拉莫三嗪或奥卡西平中的至少一种，所述抗癫痫药物的代谢物选自10
‑
羟基
‑
卡马西平；b、当左乙拉西坦的含量超过2.5μg/mg、拉莫三嗪的含量超过1μg/mg、奥卡西平的含量超过0.05μg/mg或10
‑
羟基
‑
卡马西平的含量超过1.75μg/mg，提示超量用药；c、当左乙拉西坦的含量低于0.5μg/mg、拉莫三嗪的含量低于0.125μg/mg、奥卡西平的含量低于0.002μg/mg或10
‑
羟基
‑
卡马西平的含量低于0.15μg/mg，提示补充用药。2.一种用于权利要求1所述系统的液质联用检测头发中抗癫痫药物及其代谢物的方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)对头发样品进行预处理，得到待测溶液；(2)采用液相色谱
‑
质谱联用的方法检测对头发中抗癫痫药物及其代谢物的浓度进行检测；所述色谱条件为：流动相A为0.1
‑
1wt.％的甲酸和5
‑
10mmol/L乙酸铵的水溶液，流动相B为体积比(300
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700):(300
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700):1的乙腈
‑
甲醇
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甲酸溶液为；色谱柱为C18柱。3.按照权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤(1)中，所述预处理具体包括如下步骤：(1.1)将头发样品清洗后晾干；(1.2)将头发样品研磨成粉末，孵育；(1.3)取孵育后的上清液加入含待测抗癫痫药物同位素内标或其代谢物同位素内标的乙腈溶液，震荡离心，取离心后的有机层上清液加入流动相A，即得待测溶液。4.按照权利要求3所述的方法，其特征在于：步骤(1.1)中，所述清洗过程为用超纯水洗涤2
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4次和丙酮清洗1
‑
2次，优选为超纯水洗涤3次和丙酮清洗1次。5.按照权利要求3所述的方法，其特征在于：步骤(1.2)中，所述孵育在甲醇中进行，优选的所述粉末与甲醇的用量比例为10
‑
30mg:1ml，优选为20mg:1ml；和/或，所述孵育的条件为40℃
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65℃下孵育1
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12h，优选为60℃下孵育4h。6.按照权利要求3所述的方法，其特征在于：步骤(1.3)中，所述乙腈溶液中抗癫痫药物同位素内标或...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈蕾，李宛凌，
申请(专利权)人：四川大学华西医院，
类型：发明
国别省市：