一种中压制备色谱快速提取莪术有效成分的方法技术

本发明专利技术涉及一种中压制备色谱快速提取莪术有效成分的方法。包括如下步骤：将含有莪术的植物干燥粉碎得到莪术粉，使用回流加热法或者超声提取法提取莪术粉中的莪术挥发油，再用中压快速制备色谱法从莪术挥发油中分离提纯莪术酮和吉马酮，中压快速制备色谱具有分离速度快、上样量大、制备毫克到数十克的样品所需时间较短，分离效率高、且分离纯化后的样品纯度也相对较高的特点。利用该方法经进一步分离提取的莪术酮的纯度为98.35％，吉马酮的纯度为93.29％。该法利用中压快速制备色谱的层析柱分离特性，通过合理的展开剂选择，获得高纯度吉马酮、莪术酮，为快速分离提取莪术有效成分提供了一条操作简单、经济环保和实际可行的高效的方法。高效的方法。高效的方法。

【技术实现步骤摘要】
一种中压制备色谱快速提取莪术有效成分的方法


[0001]本专利技术涉及中药制剂领域，特别是一种中压制备色谱快速提取莪术有效成分的方法。

技术介绍

[0002]莪术来源于姜科植物蓬莪术、广西莪术和温郁金的根茎部位，其具有抗肿瘤、抗细菌、行气破血，消除积肿、缓解疼痛等效果。通常用于血液问题，呼吸不适，心脏疼痛，积食便秘，胃腹肿胀疼痛，淤血，痛经，癓瘕痞块，跌打损伤以及早期宫颈癌等症状，为临床常用药。莪术中主要成分可分为两大类，即挥发油(1.96％～2.5％)和姜黄素类。姜黄素是一种具有降血脂、抗氧化、抗炎和消除自由基等作用的酚类色素物，挥发油则包含莪术抗肿瘤、抗癌症的主要有效成分，这些成分为多种倍半萜类化合物和桉油精。莪术挥发油的有效成分中主要抗肿瘤活性的成分有莪术酮、吉马酮等化合物，这些化合物对肿瘤细胞均具有一定的抑制作用。而莪术挥发油中的莪术酮、吉马酮含量相对较高，一般被认为是莪术抗肿瘤、抗癌的最主要有效成分。
[0003]莪术酮又名莪术呋喃烯酮，是一种倍半萜类化合物，在莪术挥发油中的含量约为1％～2.5％，分子式为C
15
H
18
O2，分子量为230.30，为淡黄色油状物，沸点为320.6
±
42.0℃at 760mmHg，具有光学活性。吉马酮又名杜鹃酮、牻牛儿酮，含有吉马酮的植物中以姜科姜黄属植物的桂郁金中含量相对较高。吉马酮的分子式为C
15
H
22
O，分子量218.33，为淡黄色晶体，熔点为56～57℃，具有光学活性。
[0004]由于天然产物中一般具有的成分及杂质种类较多，分离纯化其中有效成分的纯度一般不高。现有技术从植物中提取莪术挥发油、以及从莪术挥发油中提取莪术酮、吉马酮的方法均存在提取纯度低、操作繁琐等缺点。因此，亟需寻求一种高效、便捷提取莪术酮、吉马酮的方法以满足中药治疗的需要。

技术实现思路

[0005]本专利技术要解决的技术问题为克服现有技术中提取莪术酮、吉马酮的方法均存在提取纯度低、操作繁琐等缺点的不足之处，提供一种中压制备色谱快速提取莪术有效成分的方法。
[0006]为了解决本专利技术的技术问题，所采取的技术方案为，一种中压制备色谱快速提取莪术有效成分的方法，所述有效成分为莪术酮和吉马酮，具体包括如下步骤：
[0007]S1、取含有莪术的植物根茎除去杂质后切片、烘干、粉碎，过筛得到粒径为40
‑
100目的莪术粉；
[0008]S2、提取莪术粉中的莪术挥发油；
[0009]S3、将莪术挥发油用乙醇溶解后与硅胶混合均匀，然后装入中压制备色谱的硅胶色谱柱，使用洗脱剂进行梯度洗脱，洗脱剂的流速为10
‑
40mL/min，压力为0.048
‑
0.103Mpa，根据中压制备色谱检测器的紫外吸收信号所显示的莪术挥发油中各组分的吸收峰，分别收
集各洗脱液，将含有相同成分的过柱洗脱液合并；
[0010]在合并的过柱洗脱液中加入乙醇至刚好溶解，再经薄层色谱法纯化分别得到莪术酮和吉马酮馏分，将两份馏分分别依次经过减压旋蒸浓缩、冷冻干燥，即得高纯莪术酮和吉马酮。
[0011]作为上述中压制备色谱快速提取莪术有效成分的方法进一步的改进：
[0012]优选的，所述提取莪术粉中的莪术挥发油的方法为回流加热法或者超声提取法。
[0013]优选的，所述回流加热法的具体步骤为：称取莪术粉置于洁净干燥圆底烧瓶中，按10
‑
20mL/g的液料比加入乙醇，加入搅拌磁子，置于搭建好的回流装置中，温度80
‑
100℃，加热回流8
‑
16h，将提取液减压抽滤，滤液转移至旋转蒸发仪中浓缩至溶剂完全去除，得到褐色油状物即为莪术挥发油。
[0014]优选的，所述超声提取法的具体步骤为：称取莪术粉置于离心管中，加入提取剂至莪术粉的浓度为2mg/mL，置于超声清洗机中超声震动10
‑
30分钟，离心管内呈浑浊混悬浮液状态，将离心管置于离心机内离心，上层清液即为莪术挥发油。
[0015]优选的，所述提取剂为乙醇、乙酸乙酯、N,N
‑
二甲基甲酰胺即DMF、二甲基亚砜即DMSO、二氧六环中的任意一种。
[0016]优选的，所述提取剂为乙醇。
[0017]优选的，所述洗脱剂为石油醚
‑
乙酸乙酯体系、正己烷
‑
乙酸乙酯体系、石油醚
‑
二氯甲烷体系中的一种。
[0018]优选的，所述洗脱剂为石油醚
‑
乙酸乙酯体系，石油醚为A相、乙酸乙酯为B相，两者按体积比(100～81):(0～19)配制而成。
[0019]本专利技术相比现有技术的有益效果在于：
[0020]1)本专利技术通过提取和分离两步从莪术切片中制备了莪术酮和吉马酮。本专利技术在第一步粗提莪术挥发油时，对比了超声提取法和加热回流提取法提取莪术挥发油，检测莪术挥发油所含的主要物质为莪术酮和吉马酮；超声提取法中不同有机溶剂对莪术中有效成分的提取率存在差异；在加热回流提取法中，排除了加热回流法的实验溶剂的影响因素，方便了实验的操作，解决了实验废料排放的后处理问题，提升了实验效率，为以后莪术挥发油的工业化生产提供了一个经济环保的参考途径。然后以薄层色谱探索展开剂选择体系，选择展开剂体系为石油醚：乙酸乙酯＝5:1，通过中压快速制备色谱除去杂质，薄层色谱板纯化得到莪术酮从莪术粉中的提取率约为0.2％，莪术酮的纯度为93.29％；吉马酮从莪术粉中的提取率提取率约为0.2％，吉马酮的纯度为98.35％。
[0021]第二步利用了中压快速制备色谱对莪术挥发油中有效成分进行纯化。中压快速制备色谱具有分离速度快、上样量大、制备毫克到数十克的样品所需时间较短，分离效率高、且分离纯化后的样品纯度也相对较高的特点。同时，其可自主填充分离柱的填料，增加了分离溶剂体系的可选择性。中压快速制备色谱在天然产物分离纯化工作中已经发展为一种备受欢迎的分离纯化方法。本研究首次将中压快速制备色谱运用于莪术中有效成分的分离纯化，并获得高纯度莪术酮和吉马酮，为生产医用级莪术酮和吉马酮提供了数据参考及高效环保的生产途径的参考。
附图说明
[0022]图1是中压制备色谱洗脱极性设置与出峰情况结果，横坐标为时间，单位为min；左边纵坐标为吸光强度，单位为Abs；右边纵坐标为B相百分比，单位为％；
[0023]图2(a)为实施例3经过薄层色谱法纯化后样品中莪术酮LCMS鉴定图、图2(b)为莪术酮1HNMR鉴定图、图2(c)为莪术酮HPLC鉴定图；
[0024]图3(a)为实施例3经过薄层色谱法纯化后样品中吉马酮LCMS鉴定图、图3(b)为吉马酮1HNMR鉴定图、图3(c)为吉马酮HPLC鉴定图。
具体实施方式
[0025]为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术进行进一步本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种中压制备色谱快速提取莪术有效成分的方法，所述有效成分为莪术酮和吉马酮，其特征在于，具体包括如下步骤：S1、取含有莪术的植物根茎除去杂质后切片、烘干、粉碎，过筛得到粒径为40
‑
100目的莪术粉；S2、提取莪术粉中的莪术挥发油；S3、将莪术挥发油用乙醇溶解后与硅胶混合均匀，然后装入中压制备色谱的硅胶色谱柱，使用洗脱剂进行梯度洗脱，洗脱剂的流速为10
‑
40mL/min，压力为0.048
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0.103Mpa，根据中压制备色谱检测器的紫外吸收信号所显示的莪术挥发油中各组分的吸收峰，分别收集各过柱洗脱液，将含有相同成分的过柱洗脱液合并；在合并的过柱洗脱液中加入乙醇至刚好溶解，再经薄层色谱法纯化分别得到莪术酮和吉马酮馏分，将两份馏分分别依次经过减压旋蒸浓缩、冷冻干燥，即得高纯莪术酮和吉马酮。2.根据权利要求1所述的中压制备色谱快速提取莪术有效成分的方法，其特征在于，所述提取莪术粉中的莪术挥发油的方法为回流加热法或者超声提取法。3.根据权利要求1所述的中压制备色谱快速提取莪术有效成分的方法，其特征在于，所述回流加热法的具体步骤为：称取莪术粉置于洁净干燥圆底烧瓶中，按10
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20mL/g的液料比加入乙醇，加入搅拌磁子，置于搭建好的回流装置中，温度80
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100℃，加热回流8

【专利技术属性】
技术研发人员：王爱东，丰洒，于启蒙，张新超，孟惠琴，张霖，朱德志，
申请(专利权)人：黄山学院，
类型：发明
国别省市：