一种前列腺癌辅助诊断试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种前列腺癌辅助诊断试剂盒，属于癌症检测试剂领域。本发明专利技术的试剂盒通过检测前列腺组织中环状RNA hsa_circ_0006357表达水平，预测待检者患前列腺癌的风险。本发明专利技术还提供了一种辅助预测前列腺癌进展的试剂盒，该试剂盒是通过检测前列腺癌组织中环状RNA hsa_circ_0006357水平实现预测的。

【技术实现步骤摘要】
一种前列腺癌辅助诊断试剂盒
本专利技术属于癌症检测试剂领域。
技术介绍
前列腺癌是发生在前列腺的上皮恶性肿瘤，是男性泌尿生殖系统最常见的恶性肿瘤。前列腺癌若能早期诊断治疗，I期患者5年生存率可达90％以上，但转移性前列腺癌患者的5年生存率仅为10％～15％，因此，前列腺癌的早诊断早治疗对于提高患者生存率至关重要。circRNA是一种共价闭合、单链环状的RNA，由mRNA前体(pre-mRNA)经反向剪接(back-splicing)形成。circRNA没有5′帽子结构和3′poly(A)结构，并且对核酸酶不敏感，因此，它比线性RNA(linearRNA)更稳定。circRNA主要位于细胞质中，并且可以被储存在外泌体中。到目前为止，部分circRNA可作为前列腺癌诊断标志物或治疗靶点，例如：circAMOTL1L在前列腺癌患组织下调表达，circ-SMARCA5、circRNA-MYLK、circAGO2、circ_0062019等在前列腺癌组织中上调表达(孙志伟,环状RNA在泌尿系恶性肿瘤中的研究进展,南通大学学报(医学版),2020:40(2))。Hsa_circ_0006357是7号染色体Zeste基因增强子同源物2(enhancerofzestehomolog2,EZH2)基因第2和3外显子反向剪接、首尾拼接而成的环状RNA，其生成示意图如图1所示。Qiao等报道了hsa_circ_0006357在脑室周围白质损伤(periventricularwhitematterdamage，PWMD)的婴儿血液中与在正常婴儿血液中的水平存在显著差异(LixingQiao等,CircularRNAexpressionalterationinwholebloodofprematureinfantswithperiventricularwhitematterdamage,Genomics,Volume112,Issue4,2020)。目前尚未见hsa_circ_0006357作为癌症诊断标记物的报道。
技术实现思路
本专利技术要解决的问题是：提供检测circRNAhsa_circ_0006357的试剂在制备前列腺癌诊断试剂盒中的用途。hsa_circ_0006357的序列(SEQIDNO.1)如下：AAUAAUCAUGGGCCAGACUGGGAAGAAAUCUGAGAAGGGACCAGUUUGUUGGCGGAAGCGUGUAAAAUCAGAGUACAUGCGACUGAGACAGCUCAAGAGGUUCAGACGAGCUGAUGAAGUAAAGAGUAUGUUUAGUUCCAAUCGUCAGAAAAUUUUGGAAAGAACGGAAAUCUUAAACCAAGAAUGGAAACAGCGAAGGAUACAGCCUGUGCACAUCCUGACUUCUGUGAGCUCAUUGCGCGGGACUAGGGAG本专利技术的技术方案如下：一种前列腺癌辅助诊断试剂盒，所述试剂盒包括检测前列腺组织中环状RNAhsa_circ_0006357水平的试剂。进一步地，所述试剂为荧光定量PCR试剂、原位杂交试剂、RNA印迹检测试剂或核酸测序试剂。进一步地，所述荧光定量PCR试剂包括序列如SEQIDNO.2～3所述的引物；和/或，所述原位杂交试剂包括序列如SEQIDNO.12所述的探针。一种辅助预测前列腺癌进展的试剂盒，所述试剂盒包括检测前列腺癌组织hsa_circ_0006357水平的试剂。进一步地，所述试剂为荧光定量PCR试剂、原位杂交试剂、RNA印迹检测试剂或核酸测序试剂。进一步地，所述荧光定量PCR试剂包括序列如SEQIDNO.2～3所述的引物；和/或，所述原位杂交试剂包括序列如SEQIDNO.12所述的探针。检测前列腺组织hsa_circ_0006357水平的试剂在制备前列腺癌辅助诊断试剂盒中的用途。进一步地，所述试剂为荧光定量PCR试剂、原位杂交试剂、RNA印迹检测试剂或核酸测序试剂。优选地，所述荧光定量PCR试剂包括序列如SEQIDNO.2～3所述的引物；和/或，所述原位杂交试剂包括序列如SEQIDNO.12所述的探针。检测前列腺癌组织hsa_circ_0006357水平的试剂在制备辅助预测前列腺癌进展的试剂盒中的用途。进一步地，所述试剂为荧光定量PCR试剂、原位杂交试剂、RNA印迹检测试剂或核酸测序试剂。优选地，所述荧光定量PCR试剂包括序列如SEQIDNO.2～3所述的引物；和/或，所述原位杂交试剂包括序列如SEQIDNO.12所述的探针。术语“前列腺癌进展”定义为治疗后出现下列任一事件：血清PSA升高(超过治疗后最低检测值2ng/ml，或连续3次血清PSA检测呈进行性升高)、局部病灶扩大或出现新病灶、出现新转移病灶、因本病死亡。出现“前列腺癌进展”意味着前列腺癌病情明显恶化。本专利技术的有益效果如下：实验表明，Has_circ_0006357在前列腺癌组织中的表达水平显著高于良性前列腺增生组织；前列腺癌组织中Has_circ_0006357表达量越高，其发生前列腺癌进展的可能性越大。本专利技术的试剂盒通过检测前列腺组织中Has_circ_0006357的表达量，可预测待检者患前列腺癌的风险，还能通过检测前列腺癌组织中Has_circ_0006357的表达量，预测前列腺癌的进展风险高低。显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。尤其是本专利技术的核心内容是利用对Has_circ_0006357表达量的检测，区分前列腺癌和良性前列腺增生，预测前列腺癌的进展风险高低，而具体检测Has_circ_0006357的试剂并不重要，只要能进行Has_circ_0006357的相对定量或绝对定量的试剂，均能达到本专利技术的技术目的，将其用于制备前列腺癌辅助诊断试剂盒或辅助预测前列腺癌进展的试剂盒，均在本专利技术的范围之内。以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。附图说明图1：Has_circ_0006357生成示意图。图2：前列腺组织和相关细胞株中的hsa_circ_0006357的PCR检测结果。图3：Hsa_circ_0006357的鉴定。左侧，采用has_circ_0006357divergentprimers以cDNA和gDNA(基因组DNA)为模板进行PCR扩增后的结果；右侧，以RNaseR消化前后，PCR扩增检测hsa_circ_0006357的结果。表示divergentprimers，表示convergentprimers。图4：HE染色和原位杂交检测图。图5：前列腺癌患者单因素生存分析。Di本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种前列腺癌辅助诊断试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括检测前列腺组织中环状RNA hsa_circ_0006357水平的试剂。/n

【技术特征摘要】
1.一种前列腺癌辅助诊断试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括检测前列腺组织中环状RNAhsa_circ_0006357水平的试剂。


2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂为荧光定量PCR试剂、原位杂交试剂、RNA印迹检测试剂或核酸测序试剂。


3.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：所述荧光定量PCR试剂包括序列如SEQIDNO.2～3所述的引物；
和/或，所述原位杂交试剂包括序列如SEQIDNO.12所述的探针。


4.一种辅助预测前列腺癌进展的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括检测前列腺癌组织hsa_circ_0006357水平的试剂。


5.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂为荧光定量PCR试剂、原位杂交试剂、RNA印迹检测试剂或核酸测序试剂。


6.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于：所述荧光定量PCR试剂包括序列如SEQIDNO.2～3所述的引物；<...

【专利技术属性】
技术研发人员：苏征征，
申请(专利权)人：四川大学华西医院，
类型：发明
国别省市：四川;51