一种免疫组化联合弹性纤维双重染色试剂盒、染色方法及应用技术

本发明专利技术涉及一种免疫组化联合弹性纤维双重染色试剂盒、染色方法及应用。本发明专利技术提供的试剂盒包括如下组分：抗原修复液、过氧化物酶封闭剂、一抗试剂、维多利亚蓝染液、碱性磷酸酶标二抗聚合物、基于碱性磷酸酶系统红染底物、与红染底物匹配的红染缓冲液，并提供了具体染色方法。本发明专利技术的试剂盒及染色方法将免疫组化染色和弹性纤维染色有机结合，不使用高锰酸钾氧化剂和草酸溶液漂白剂，简化染色程序，提高检测效率，能够在同一张组织切片上同时进行特定肿瘤标志物的免疫组化染色和弹性纤维特殊染色，对组织样本的需求量显著降低，显色对比鲜明直观，无需在显微镜下反复对照不同切片的组织位置，所提供的信息量显著优于传统单染。

【技术实现步骤摘要】
一种免疫组化联合弹性纤维双重染色试剂盒、染色方法及应用
本专利技术属于临床病理检测
，具体涉及一种免疫组化联合弹性纤维双重染色试剂盒、染色方法及应用。
技术介绍
免疫组织化学染色(immunohistochemistry，IHC)又称免疫细胞化学染色，简称免疫组化，是病理学诊断、鉴别诊断、肿瘤特异性分子靶标筛选、鉴定的最重要平台性技术。目前，最常规的免疫组化显色方式是基于辣根过氧化物酶(HRP)系统，显色底物为二氨基联苯胺(DAB)的检测系统。在病理科的日常免疫组化检测工作中，存在一部分病理组织，这些组织中含有与DAB显色颗粒颜色近似的色素或者其他物质，如黑素瘤中的黑色素、肺癌组织中的碳颗粒等。这些物质大量的分布在组织细胞上，遮盖了组织细胞的形态结构，在采用传统的免疫组化显色方法时，DAB呈现的棕褐色或者棕褐色与这些物质的色彩难以区分，严重影响其免疫组化结果的判读。解决办法一般有两种，一种方法是在进行免疫组化试验前，对组织进行去黑素处理，采用强氧化剂去除色素，但是黑色素表现稳定，强烈的氧化处理容易导致组织切片中的部本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种免疫组化联合弹性纤维双重染色试剂盒，其特征在于，包括如下组分：抗原修复液、维多利亚蓝染液、过氧化物酶封闭剂、一抗试剂、碱性磷酸酶标二抗聚合物、碱性磷酸酶系统红染底物、与红染底物匹配的红染缓冲液；所述一抗试剂为AP标记的TTF-1抗体、AP标记的CK20抗体或AP标记的Her-2抗体。/n

【技术特征摘要】
1.一种免疫组化联合弹性纤维双重染色试剂盒，其特征在于，包括如下组分：抗原修复液、维多利亚蓝染液、过氧化物酶封闭剂、一抗试剂、碱性磷酸酶标二抗聚合物、碱性磷酸酶系统红染底物、与红染底物匹配的红染缓冲液；所述一抗试剂为AP标记的TTF-1抗体、AP标记的CK20抗体或AP标记的Her-2抗体。


2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述碱性磷酸酶标二抗聚合物包括碱性磷酸酶标-抗鼠聚合物和/或碱性磷酸酶标-抗兔聚合物。


3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述碱性磷酸酶系统红染底物以坚牢红为色原，所述红染缓冲液中包括萘酚磷酸盐、三羟甲基氨基甲烷。


4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述抗原修复液为柠檬酸修复液(pH6.0)或EDTA修复液(pH9.0)。


5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述维多利亚蓝染液主要由维多利亚蓝、间二苯酚、三氯化铁组成。


6.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括清洗液，所述清洗液为PBST缓冲液(pH7.4)或TBST缓冲液(pH8.0)。


7.一种免疫组化联合弹性纤维双重染色方法，其特征在于，为方法一或方法二，方法一包括如下步骤：
(1)抗原修复；
(2)取待检测的含色素组织切片滴加过氧化物酶封闭剂，进行内源性过氧化物酶的封闭；
(3)使用一抗试剂对组织切片进行孵育，然后使用碱磷酸酶标二抗聚合物进行...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁永波，李莉，陈玲，李三华，刘畅，牛银银，齐华，刘文弟，
申请(专利权)人：河南赛诺特生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：河南;41