一种橡胶草叶绿体提取方法技术

本发明专利技术公开了一种橡胶草叶片叶绿体提取的方法，包括采集橡胶草植物的完整叶片；将所述叶片组织破碎后进行初提得到橡胶草叶绿体粗提液；在细胞分离液的上层加入所述橡胶草叶绿体粗提液后在4℃，进行第一次超高速离心10‑15min；离心结束后在吸取所述细胞分离液的的沉淀，用叶绿体提取液清洗沉淀后进行第二次超高速离心12min，沉淀即可得完整橡胶草叶绿体。本发明专利技术可以应用于橡胶草叶绿体分离，还可以提取菊科或同属科植物的叶绿体，既适于从一般的植物材料收取，还可用于顽拗植物叶片的叶绿体分离。

【技术实现步骤摘要】
一种橡胶草叶绿体提取方法
本专利技术属于植物组织鉴定
，尤其涉及一种橡胶草叶绿体提取方法。
技术介绍
橡胶草其中甲羟戊酸(MVA)途径中用于调节天然橡胶生物合成，橡胶草是二倍体(2n＝16)，具有相对简单的基因组，长度为1.29Gb，其中包含46,731个预测的蛋白质编码基因，橡胶草根含有高分子量橡胶分子，其特性与巴西橡胶树的橡胶胶乳相当，可以作为一种替代橡胶作物，橡胶草根的橡胶含量高，占其总干重的3％至28％，它们也是菊粉的新来源(线性β-(2-1)-连锁果聚糖)。此外，橡胶草可以在相对较短的生命周期中在寒冷和温带地区广泛生长，并且易于收获和进行遗传转化，因此可以用作专利技术小麦基因功能的理想模型植物以及天然橡胶的生物合成材料。叶绿体是行使光合作用的细胞器,皮层叶绿体的结构的基础。完整叶绿体的获得是开展叶绿体能量转化、电子传递﹑碳固定及下游组学研究的前提,但关于橡胶草叶绿体的提取尚为空白,严重制约了皮层光合作用的生理和分子机制的研究,因此,以橡胶草为材料,建立橡胶草叶绿体的提取纯化体系,将在细胞器、亚细胞器和分子水平上推动橡胶草本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种橡胶草叶绿体提取方法，其特征在于，包括以下步骤：/nA采集橡胶草植物的完整叶片；/nB将所述叶片组织破碎后进行初提得到橡胶草叶绿体粗提液；/nC在细胞分离液的上层加入所述橡胶草叶绿体粗提液后在4℃，进行第一次超高速离心10-15min；/nD离心结束后在吸取所述细胞分离液的的沉淀，用叶绿体提取液清洗沉淀后进行第二次超高速离心12min，沉淀即可得完整橡胶草叶绿体。/n

【技术特征摘要】
1.一种橡胶草叶绿体提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
A采集橡胶草植物的完整叶片；
B将所述叶片组织破碎后进行初提得到橡胶草叶绿体粗提液；
C在细胞分离液的上层加入所述橡胶草叶绿体粗提液后在4℃，进行第一次超高速离心10-15min；
D离心结束后在吸取所述细胞分离液的的沉淀，用叶绿体提取液清洗沉淀后进行第二次超高速离心12min，沉淀即可得完整橡胶草叶绿体。


2.根据权利要求1所述一种橡胶草叶绿体提取方法，其特征在于，所述初提的方法包括在所述叶片组织中按照重量比为100：1加入PVPP粉末充分研磨，在所述叶片组织的研磨样品中按照每克样品加入5mL叶绿体提取液，过滤研磨液加入叶绿体提取液。


3.根据权利要求1所述一种橡胶草叶绿体提取方法，其特征在于，所述叶绿...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢全亮，王旭初，李鸿彬，
申请(专利权)人：石河子大学，
类型：发明
国别省市：新疆;65