一种使裂殖壶菌在富含木糖培养基中正常生长且生产脂质化合物的方法技术

本发明专利技术公开了一种使裂殖壶菌在富含木糖培养基中正常生长且生产脂质化合物的方法，通过将裂殖壶菌在逐渐增加木糖与葡萄糖的比例的驯化培养基中进行驯化培养得使得裂殖壶菌可以在富含木糖培养基中进行正常生长代谢且生产脂质化合物。本发明专利技术提供的方法，增加了裂殖壶菌可利用的底物种类，有助于后面裂殖壶菌对木制纤维素的高效利用，此外本发明专利技术的驯化方法目的性强，效率高，使得裂殖壶菌不仅可以在富含木糖的培养基上进行正常的生长代谢，而且可以保证裂殖壶菌的生物量、总油脂、DHA等指标，该方法有利于加强对廉价原材料木质纤维素的高效利用。

【技术实现步骤摘要】
一种使裂殖壶菌在富含木糖培养基中正常生长且生产脂质化合物的方法
本专利技术属于微生物
，具体涉及一种使裂殖壶菌在富含木糖培养基中正常生长且生产脂质化合物的方法。
技术介绍
由于化石原料的大量使用，能源短缺与环境污染的现象越来越严重。这使可再生能源受到越来越多的关注。木质纤维素是地球上最广泛存在的生物质，主要存在于农业副产品、城市固体废物、低投入能源作物和森林残留物中，占全球生物质总量的一半。木质纤维素主要由木质素，纤维素和半纤维素组成，经酸碱预处理和酶水解后可以产生一些糖类，其中约38％-50％为葡萄糖，23％-32％为木糖。由此可见，木糖是木质纤维素水解后的第二大糖源，要想能高效充分的利用木质纤维素，就必须能高效利用木糖。裂殖壶菌是一种异养，油质的海洋生物，具有巨大的脂质化合物物生产潜力。裂殖壶菌积累的油脂中，有50％左右为二十二碳六烯酸(DHA)组分，因此是目前世界公认的最适合量产DHA油脂的微生物。目前裂殖壶菌主要以葡萄糖为碳源生产脂质化合物，导致微生物油脂的生产成本较高。研究表明，以葡萄糖作为碳源生产油脂的成本占整本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种使裂殖壶菌在富含木糖培养基中正常生长且生产脂质化合物的方法，其特征在于，将裂殖壶菌在含木糖的驯化培养基中进行驯化培养使得裂殖壶菌可以在富含木糖培养基中进行正常生长代谢且生产脂质化合物。/n

【技术特征摘要】
1.一种使裂殖壶菌在富含木糖培养基中正常生长且生产脂质化合物的方法，其特征在于，将裂殖壶菌在含木糖的驯化培养基中进行驯化培养使得裂殖壶菌可以在富含木糖培养基中进行正常生长代谢且生产脂质化合物。


2.根据权利要求1所述的使裂殖壶菌在富含木糖培养基中正常生长且生产脂质化合物的方法，其特征在于，通过在驯化培养基中逐渐增加木糖与葡萄糖的比例使得裂殖壶菌可以在富含木糖培养基中进行正常生长代谢且生产脂质化合物。


3.根据权利要求1或2所述的使裂殖壶菌在富含木糖培养基中正常生长且生产脂质化合物的方法，其特征在于，通过在驯化培养基中逐渐增加木糖与葡萄糖的质量比，优选从等比例按质量分数4.5-5％增加到86-90％。


4.根据权利要求1或2所述的使裂殖壶菌在富含木糖培养基中正常生长且生产脂质化合物的方法，其特征在于，具体包括如下步骤：
(1)将冻存的裂殖壶菌菌种接入以葡萄糖为主要碳源的培养基中进行活化培养，然后转接2～3代培养形成裂殖壶菌种子液；
(2)将裂殖壶菌种子液接种含木糖和葡萄糖的混合培养基中进行第一梯度驯化培养，所述第一梯度的驯化培养基中木糖与葡萄糖的质量比为等比例；
(3)当第一梯度的驯化培养基中菌株浓度以正常生长速度生长到OD600为12～18，将第一梯度形成的种子液接入木糖含量增加第二梯度的驯化培养基中继续进行驯化培养，直至菌株可以以正常生长速度生长到OD600为12～18；
(4)依次重复步骤(3)进行梯度驯化培养，每个梯度均培养到菌株可以以正常生长速度生长到OD600为12～18接种到下一梯度培养，依次培养到木糖与葡萄糖的比例为86-90％的第九梯度；
(5)将步骤(4)驯化后的菌种接种在富含木糖的培养基中进行发酵培养，对发酵后的脂质化合物进行含量及成分的测定。


5.根据权利要求4所述的使裂殖壶菌在富含木糖培养基中正常生长且生产脂质化合物的方法，其特征在于，步骤(2)中将步骤(1)所得种子液接种到以30～60g/L的木糖及其与葡萄糖的等质量比的第一梯度的驯化培养基中，控制菌液的初始浓度OD600为0.2～0.3，于28℃～30℃、170～220rpm的条件下培养至0D600为12～18，仍然控制起始接种OD600为0.2～0.3在第一梯度驯化进行传代，直至菌株的生长速度与在以葡...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙小曼，王伶如，王雨舟，许莹霜，马旺，
申请(专利权)人：南京师范大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32