提高黑曲霉糖化酶生产能力的方法及重组黑曲霉菌株技术

本申请公开了一种提高黑曲霉糖化酶生产能力的方法及重组黑曲霉菌株。通过外源质粒的启动子使用Tet‑on系统，利用同源重组在黑曲霉糖化酶高产的尿嘧啶缺陷型(pyrG‑)菌株上进行整合，使得酰基辅酶A脱氢酶编码基因、乙酰辅酶A酰基转移酶编码基因或细胞色素P450单加氧酶编码基因中的至少一种过表达，通过脂肪酸代谢途径的调控大大提高了黑曲霉的糖化酶生产能力。

【技术实现步骤摘要】
提高黑曲霉糖化酶生产能力的方法及重组黑曲霉菌株
本申请涉及生物工程
，具体涉及一种提高黑曲霉糖化酶生产能力的方法及重组黑曲霉菌株。
技术介绍
葡萄糖水解酶(Glucoamylase,E.C.3.2.1.3.)也被称为糖化酶(amyloglucosidase),是一种一条肽链的酸性糖蛋白酶，具有外切活力，能水解淀粉、糊精、糖原等碳水化合物碳链上的1,4糖苷键连接的非还原端，终产物是β-D-葡萄糖，也可水解α-1,6和α-1,3糖苷键，只是相对水解速度较慢。葡萄糖淀粉酶是水解淀粉产生葡萄糖的主要酶类，自上世纪70年代黑曲霉来源的葡萄糖淀粉酶被首次纯化出来后，它便被广泛地应用于淀粉糖、食品、医药、酿造等工业生产中，是世界上仅次于蛋白酶的第二大类酶制剂，占全球酶制剂交易市场的25-33％。目前，工业上糖化酶的生产主要是由Aspergillus和Rhizopu属发酵制取。构建糖化酶基因的高拷贝工程菌，异源表达以及糖化酶发酵培养基和工艺的优化，如优化培养温度，pH，菌丝体大小，通气，搅拌以及反应器的类型，是提高糖化酶工业化生产的主要手段，寻找新的糖化本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种提高黑曲霉糖化酶生产能力的方法，其特征在于，包括：在黑曲霉菌株中导入基因表达调控元件，使所述黑曲霉菌株中至少一种脂肪酸代谢途径调控基因过表达。/n

【技术特征摘要】
1.一种提高黑曲霉糖化酶生产能力的方法，其特征在于，包括：在黑曲霉菌株中导入基因表达调控元件，使所述黑曲霉菌株中至少一种脂肪酸代谢途径调控基因过表达。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述脂肪酸代谢途径调控基因是酰基辅酶A脱氢酶编码基因An14g03240基因、乙酰辅酶A酰基转移酶编码基因An04g05720基因或细胞色素P450单加氧酶编码基因An03g06460基因中的至少一种。


3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述基因表达调控元件为Tet-on系统调控元件。


4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，，所述方法包括：将所述脂肪酸代谢途径调控基因插入到含有可诱导表达Tet-on系统的质粒中，并导入到黑曲霉菌株，使所述脂肪酸代谢途径调控基因在所述黑曲霉菌株中过表达。


5.一种糖化酶生产能力提高的重组黑曲霉菌株，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：欧阳立明，祁洁，隋雨菲，肖贤尊，庄英萍，
申请(专利权)人：华东理工大学，
类型：发明
国别省市：上海;31