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一种构巢曲霉自诱导型表达系统及其应用技术方案

技术编号:29125971 阅读:25 留言:0更新日期:2021-07-02 22:20
本发明专利技术公开了一种构巢曲霉自诱导型表达系统及其应用,属于基因工程领域。本发明专利技术所述的表达系统时基于硝酸盐还原酶启动子受硝酸盐诱导铵盐抑制的特性。在此基础上表征了其自诱导的特征。各实验结果充分说明基于硝酸盐还原酶启动子的自诱导构巢曲霉表达系统能够进行自诱导表达,丰富了构巢曲霉的表达系统形式,培养方式操作简单,在构建蛋白表达系统方面有巨大的应用空间。

【技术实现步骤摘要】
一种构巢曲霉自诱导型表达系统及其应用
本专利技术涉及一种构巢曲霉自诱导型表达系统及其应用,属于基因工程

技术介绍
目前微生物表达系统主要有细菌,酵母,丝状真菌表达系统。细菌表达系统具有生长快,背景清晰等优势,但是,细菌中不存在翻译后修饰系统,表达真核来源的蛋白容易产生无活性的包涵体;酵母表达系统是一种真核表达系统,有翻译后修饰系统,但是不完善,容易发生过度糖基化;丝状真菌表达系统具有完善蛋白质修饰系统,其更接近高等生物。构巢曲霉作为一种丝状真菌模式菌株,主要有两种表达方式,组成型和诱导型表达,经常使用组成型强启动子PgpdA,乙醇诱导型启动子PalcA进行异源蛋白的表达。由于构巢曲霉属于食品安全菌株,其作为一种重要的目的蛋白表达系统,在工业生产中得到广泛应用。但是,目前在构建构巢曲霉表达系统进行目的基因的表达时,往往需要通过更换培养基或者其他方式,在菌株的生长过程中额外的添加诱导剂或者其他生长因子,导致该表达系统无法实现自诱导,在工业生产中的应用受阻。例如公开于ResistanceGene-GuidedGeno本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种构巢曲霉自诱导表达系统,其特征在于,所述表达系统包括表达载体和宿主细胞;所述表达载体为过表达了鸟氨酸氨甲酰基转移酶的pUC19质粒,所述表达载体还含有P

【技术特征摘要】
1.一种构巢曲霉自诱导表达系统,其特征在于,所述表达系统包括表达载体和宿主细胞;所述表达载体为过表达了鸟氨酸氨甲酰基转移酶的pUC19质粒,所述表达载体还含有PniaD启动子过表达目的基因,所述PniaD启动子的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。


2.如权利要求1所述的构巢曲霉自诱导表达系统,其特征在于,所述鸟氨酸氨甲酰基转移酶的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。


3.如权利要求1或2所述的构巢曲霉自诱导表达系统,其特征在于,所述宿主细胞为构巢曲霉ABPU1。


4.如权利要求1~3任一所述的构巢曲霉自诱导表达系统,其特征在于,所述目的基因包括但不限于:葡萄糖醛缩酶、过氧化氢酶、内切葡聚糖酶、纤维二糖水解酶。


5.如权利要求1~4任一所述的构巢曲霉自诱导表达系统,其特征在于,所述表达载体中的目的基因和鸟氨酸氨甲酰基转移酶之间连接...

【专利技术属性】
技术研发人员:周哲敏闫勤韩来闯崔文璟程中一刘中美周丽郭军玲
申请(专利权)人:江南大学
类型:发明
国别省市:江苏;32

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